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公开(公告)号：CN114164229A
公开(公告)日：2022-03-11
申请号：CN202111297086.5
申请日：2021-11-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用FvePILS5基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体获得再生效率高的草莓新种质的方法及应用，包括：根据草莓FvePILS5的DNA序列，设计并合成包含目的基因靶点的sgRNA序列；用Bsa I酶将合成的包含目的基因靶点的sgRNA序列连接到pYLCRISPR/Cas9Pubi‑H载体；并利用农杆菌转化森林草莓叶片外植体，测序验证再生植株突变序列，得到愈伤形成和离体芽再生频率较高的pils5‑1森林草莓突变体种质。本发明通过构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，并用农杆菌转化法，获得了再生效率较高的pils5‑1突变体，创造了新种质，为草莓再生苗的获得提供了一种高效的方法。
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公开(公告)号：CN114164229B
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202111297086.5
申请日：2021-11-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用FvePILS5基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体获得再生效率高的草莓新种质的方法及应用，包括：根据草莓FvePILS5的DNA序列，设计并合成包含目的基因靶点的sgRNA序列；用Bsa I酶将合成的包含目的基因靶点的sgRNA序列连接到pYLCRISPR/Cas9Pubi‑H载体；并利用农杆菌转化森林草莓叶片外植体，测序验证再生植株突变序列，得到愈伤形成和离体芽再生频率较高的pils5‑1森林草莓突变体种质。本发明通过构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，并用农杆菌转化法，获得了再生效率较高的pils5‑1突变体，创造了新种质，为草莓再生苗的获得提供了一种高效的方法。
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公开(公告)号：CN111471691B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202010253412.1
申请日：2020-04-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种FveCHA1基因及RNAi载体在促进草莓愈伤形成及离体芽再生中的应用。本发明从森林草莓中筛选得到森林草莓FveCHA1基因，构建得到森林草莓FveCHA1基因的植物抑制表达载体GN2300‑FveCHA1，进而转染得到转基因工程菌，转入二倍体森林草莓‘Ruegen’中，获得FveCHA1基因的RNAi表达干扰株系。在离体叶片组织培养条件下，FveCHA1基因抑制表达株系的愈伤形成和芽点再生时间早于野生型，表明下调森林草莓FveCHA1基因可促进森林草莓草莓愈伤形成及离体芽再生。本发明对优化草莓再生体系和促进植物快繁具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111471691A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010253412.1
申请日：2020-04-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种FveCHA1基因及RNAi载体在促进草莓愈伤形成及离体芽再生中的应用。本发明从森林草莓中筛选得到森林草莓FveCHA1基因，构建得到森林草莓FveCHA1基因的植物抑制表达载体GN2300-FveCHA1，进而转染得到转基因工程菌，转入二倍体森林草莓‘Ruegen’中，获得FveCHA1基因的RNAi表达干扰株系。在离体叶片组织培养条件下，FveCHA1基因抑制表达株系的愈伤形成和芽点再生时间早于野生型，表明下调森林草莓FveCHA1基因可促进森林草莓草莓愈伤形成及离体芽再生。本发明对优化草莓再生体系和促进植物快繁具有重要意义。
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