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公开(公告)号:CN101906159B
公开(公告)日:2012-03-21
申请号:CN201010204412.9
申请日:2010-06-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及杂交瘤细胞株D6D的研制,属于生物技术领域。用BSA与OTA偶联后的OTA-BSA免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,用HAT培养基进行选择性培养。用KLH与OTA偶联后的完全抗原OTA-KLH作为ELISA的包被抗原,用间接ELISA方法,对杂交瘤细胞培养上清中的抗体含量进行检测,筛选获得稳定分泌抗OTA单克隆抗体的杂交瘤细胞株D6D,测得D6D腹水ELISA效价为1∶3200,经鉴定该单克隆抗体可与OTA特异性结合,纯化的单克隆抗体的SDS-PAGE电泳图呈现两条蛋白条带分别约是50KD、25KD,与抗体蛋白变性成两条轻链重链的分子量大小吻合,再次表明获得抗OTA特异性抗体的事实,该单克隆抗体的亚型为IgG2b,轻链为κ链。本发明提供的特异性单克隆抗体可用于OTA的研究和OTA免疫学检测方法的建立。
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公开(公告)号:CN101899111A
公开(公告)日:2010-12-01
申请号:CN201010204427.5
申请日:2010-06-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及杂交瘤细胞株F3的研制,属于生物技术领域。取Sp2/0骨髓瘤细胞与用牛血清白蛋白(BSA)与伏马菌素B1(FB1)偶联后的偶联蛋白(FB1-BSA)免疫BALB/c小鼠的脾细胞进行细胞融合,用HAT培养基进行选择性培养后,用卵清白蛋白(OVA)与伏马菌素B1偶联后的偶联蛋白(FB1-OVA)进行间接ELISA筛选,对细胞培养上清进行检测、筛选获得稳定分泌抗伏马菌素B1单克隆抗体的杂交瘤细胞株F3,测得F3腹水ELISA效价为1∶51200,经鉴定该单克隆抗体可与FB1特异性结合,F3细胞株的染色体数目为101条,该单克隆抗体的类别为IgG1,轻链类型为κ。本发明提供的FB1单克隆抗体特异性强,制备方法简单,可用于FB1的研究和FB1免疫学检测方法的建立。
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公开(公告)号:CN118703526A
公开(公告)日:2024-09-27
申请号:CN202410885038.5
申请日:2024-07-03
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了水稻中两个HAKs参与水稻抗倒伏的应用。本发明提供了两个水稻钾离子转运体基因OsHAK8和OsHAK9。本发明中,首次发现由OsHAK8和OsHAK9构建的日本晴背景(Oryza sativa.ssp.cv.Japonica)单突变体(oshak8、oshak9)和双突变体(oshak8oshak9)在茎秆钾积累及抗倒伏过程中存在差异。主要表现在相较于oshak8和oshak9,oshak8oshak9水稻茎杆中的K+浓度明显降低,茎秆直径变短,第三节茎节的抗折力、细胞壁的木质素和纤维素的含量均降低。
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公开(公告)号:CN114507296B
公开(公告)日:2023-03-17
申请号:CN202210176672.2
申请日:2022-02-25
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有抗凝血活性地衣多糖的制备方法,该方法以地衣为原料,采用微波水浸提法提取其粗多糖,并采用大孔树脂吸附等层析法进行富集、分离和纯化,获得了一种精制地衣多糖,并进而采取硫酸酯化对其进行结构修饰获得一种具有新型分子结构的硫酸酯化地衣多糖。本发明的地衣多糖及其硫酸酯化衍生物具有抗凝血功能,在相关保健品或药物方面具有开发潜力;其制取工艺操作简便、能耗低、得率高、不破坏多糖活性和安全性高等特点,适合工业化生产,从而可提高地衣的利用价值,为其深加工和相关功能因子的开发和应用奠定生产基础。
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公开(公告)号:CN106987598A
公开(公告)日:2017-07-28
申请号:CN201710310546.0
申请日:2017-05-05
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种菊芋V型质子泵c亚基的基因HtVHAc1,其序列为SEQ ID NO.1,同时提供了一种扩增引物对P1、P2和一种将基因HtVHAc1序列连接到中间载体pMD19‑T所得到的重组质粒以及他们在基因工程中的应用。本发明首次克隆HtVHAc1基因并发现HtVHAc1基因构建的重组表达载体,通过农杆菌介导的水稻转基因技术转染到野生型水稻日本晴中,达到理想耐盐性并能提高作物产量。除此之外,在基因HtVHAc1超表达后不但增强了转基因水稻的耐盐能力,而且与对照野生型相比,在低养分条件下生物量明显增大,低钾环境下各株系趋势更加显著。
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公开(公告)号:CN114507296A
公开(公告)日:2022-05-17
申请号:CN202210176672.2
申请日:2022-02-25
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有抗凝血活性地衣多糖的制备方法,该方法以地衣为原料,采用微波水浸提法提取其粗多糖,并采用大孔树脂吸附等层析法进行富集、分离和纯化,获得了一种精制地衣多糖,并进而采取硫酸酯化对其进行结构修饰获得一种具有新型分子结构的硫酸酯化地衣多糖。本发明的地衣多糖及其硫酸酯化衍生物具有抗凝血功能,在相关保健品或药物方面具有开发潜力;其制取工艺操作简便、能耗低、得率高、不破坏多糖活性和安全性高等特点,适合工业化生产,从而可提高地衣的利用价值,为其深加工和相关功能因子的开发和应用奠定生产基础。
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公开(公告)号:CN101906159A
公开(公告)日:2010-12-08
申请号:CN201010204412.9
申请日:2010-06-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及杂交瘤细胞株D6D的研制,属于生物技术领域。用BSA与OTA偶联后的OTA-BSA免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,用HAT培养基进行选择性培养。用KLH与OTA偶联后的完全抗原OTA-KLH作为ELISA的包被抗原,用间接ELISA方法,对杂交瘤细胞培养上清中的抗体含量进行检测,筛选获得稳定分泌抗OTA单克隆抗体的杂交瘤细胞株D6D,测得D6D腹水ELISA效价为1∶3200,经鉴定该单克隆抗体可与OTA特异性结合,纯化的单克隆抗体的SDS-PAGE电泳图呈现两条蛋白条带分别约是50KD、25KD,与抗体蛋白变性成两条轻链重链的分子量大小吻合,再次表明获得抗OTA特异性抗体的事实,该单克隆抗体的亚型为IgG2b,轻链为κ链。本发明提供的特异性单克隆抗体可用于OTA的研究和OTA免疫学检测方法的建立。
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公开(公告)号:CN106987598B
公开(公告)日:2020-07-03
申请号:CN201710310546.0
申请日:2017-05-05
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种菊芋V型质子泵c亚基的基因HtVHAc1,其序列为SEQ ID NO.1,同时提供了一种扩增引物对P1、P2和一种将基因HtVHAc1序列连接到中间载体pMD19‑T所得到的重组质粒以及他们在基因工程中的应用。本发明首次克隆HtVHAc1基因并发现HtVHAc1基因构建的重组表达载体,通过农杆菌介导的水稻转基因技术转染到野生型水稻日本晴中,达到理想耐盐性并能提高作物产量。除此之外,在基因HtVHAc1超表达后不但增强了转基因水稻的耐盐能力,而且与对照野生型相比,在低养分条件下生物量明显增大,低钾环境下各株系趋势更加显著。
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