一种用于菊属植物染色体高分辨率荧光原位杂交的探针及方法

    公开(公告)号:CN111926005A

    公开(公告)日:2020-11-13

    申请号:CN201910392989.8

    申请日:2019-05-13

    Abstract: 本发明提供了一种基于菊属植物重复序列设计的寡核苷酸探针套,并公开了一种基于寡核苷酸探针套的菊属植物有丝分裂中期染色体荧光原位杂交方法。具体为:将染色体制片先于-80℃下保存12h,揭片后放入无水乙醇中脱水30min以上,晾干后制片置于碱变性液中44℃变性5min,室温下置于70.0%、70.0%、100.0%酒精中,依次梯度脱水各5min,气干;配制FISH杂交液并混匀,滴加于染色体制片上,37℃培养箱中进行杂交培养,最后进行信号检测;本发明开发的寡核苷酸探针套和原位杂交方法,可有效的用于菊属植物染色体分析核型图谱的构建(图1),通过组配好的寡核苷酸探针套通过一次FISH分析进行检测,避免了对一张制片重复多次杂交,大大简化了FISH分析的程序,提高了实验效率。

    一种基于菊花近缘种属植物参考基因组的核糖体DNA寡核苷酸混合探针套及开发方法

    公开(公告)号:CN113957166B

    公开(公告)日:2023-10-27

    申请号:CN202010700190.3

    申请日:2020-07-20

    Abstract: 本发明提供了一种基于菊花近缘种属植物参考基因组的核糖体DNA(rDNA)寡核苷酸混合探针套,并公开了一种基于菊花近缘种属植物参考基因组的核糖体DNA(rDNA)寡核苷酸混合探针套的开发方法。具体为:利用已下载的拟南芥rDNA数据,对已有的菊花脑、甘野菊、黄蒿和向日葵进行本地Blast比对,获得5S rDNA和45S rDNA(5.8S、18S和28S)共有序列;再利用该数据在Oligo7软件开发5S rDNA和45S rDNA探针;合成的5S rDNA和45SrDNA寡核苷酸探针套分别包含2条和10条寡核苷酸探针。本发明开发的寡核苷酸探针开发方法和探针套,可有效的用于菊属植物染色体分析核型图谱的构建,通过组配好的寡核苷酸探针套通过FISH分析进行检测,避免克隆重组、标记探针的繁琐程序和异源片段,大大简化了FISH分析的程序,提高了实验效率。

    一种用于菊属植物染色体高分辨率荧光原位杂交的探针及方法

    公开(公告)号:CN111926005B

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN201910392989.8

    申请日:2019-05-13

    Abstract: 本发明提供了一种基于菊属植物重复序列设计的寡核苷酸探针套,并公开了一种基于寡核苷酸探针套的菊属植物有丝分裂中期染色体荧光原位杂交方法。具体为:将染色体制片先于‑80℃下保存12h,揭片后放入无水乙醇中脱水30min以上,晾干后制片置于碱变性液中44℃变性5min,室温下置于70.0%、70.0%、100.0%酒精中,依次梯度脱水各5min,气干;配制FISH杂交液并混匀,滴加于染色体制片上,37℃培养箱中进行杂交培养,最后进行信号检测;本发明开发的寡核苷酸探针套和原位杂交方法,可有效的用于菊属植物染色体分析核型图谱的构建(图1),通过组配好的寡核苷酸探针套通过一次FISH分析进行检测,避免了对一张制片重复多次杂交,大大简化了FISH分析的程序,提高了实验效率。

    一种基于菊花近缘种属植物参考基因组的核糖体DNA寡核苷酸混合探针套及开发方法

    公开(公告)号:CN113957166A

    公开(公告)日:2022-01-21

    申请号:CN202010700190.3

    申请日:2020-07-20

    Abstract: 本发明提供了一种基于菊花近缘种属植物参考基因组的核糖体DNA(rDNA)寡核苷酸混合探针套,并公开了一种基于菊花近缘种属植物参考基因组的核糖体DNA(rDNA)寡核苷酸混合探针套的开发方法。具体为:利用已下载的拟南芥rDNA数据,对已有的菊花脑、甘野菊、黄蒿和向日葵进行本地Blast比对,获得5S rDNA和45S rDNA(5.8S、18S和28S)共有序列;再利用该数据在Oligo7软件开发5S rDNA和45S rDNA探针;合成的5S rDNA和45SrDNA寡核苷酸探针套分别包含2条和10条寡核苷酸探针。本发明开发的寡核苷酸探针开发方法和探针套,可有效的用于菊属植物染色体分析核型图谱的构建,通过组配好的寡核苷酸探针套通过FISH分析进行检测,避免克隆重组、标记探针的繁琐程序和异源片段,大大简化了FISH分析的程序,提高了实验效率。

    一种通过人工调控提高菊花根尖有丝分裂相的方法

    公开(公告)号:CN109856330B

    公开(公告)日:2021-05-28

    申请号:CN201910085871.0

    申请日:2019-01-29

    Abstract: 本发明公开了一种通过人工调控提高菊花根尖有丝分裂相的方法。利用人工调控的方法,即通过实验验证的合适的暗处理和光照(强)时间来对菊花组培苗进行处理,不仅获得了较为干净的染色体制片,还有效提高细胞有丝分裂中期分裂相数量(见图1、图2)。本发明利用的原材料易得,简单易行,成本低廉,可操作性强,实用性突出;通过暗处理和光照处理,提高在菊花染色体制片观察时其有丝分裂中期相的数量,且获得干净的根尖有丝分裂中期染色体图像,可用于菊花有丝分裂染色体的鉴定,同时也有助于获得用于核型分析、FISH分析等细胞学研究。而这种获得清晰的菊花根尖有丝分裂中期的染色体图像的方法可推广至菊属其他植物的细胞学研究中。

    一种通过人工调控提高菊花根尖有丝分裂相的方法

    公开(公告)号:CN109856330A

    公开(公告)日:2019-06-07

    申请号:CN201910085871.0

    申请日:2019-01-29

    Abstract: 本发明公开了一种通过人工调控提高菊花根尖有丝分裂相的方法。利用人工调控的方法,即通过实验验证的合适的暗处理和光照(强)时间来对菊花组培苗进行处理,不仅获得了较为干净的染色体制片,还有效提高细胞有丝分裂中期分裂相数量(见图1、图2)。本发明利用的原材料易得,简单易行,成本低廉,可操作性强,实用性突出;通过暗处理和光照处理,提高在菊花染色体制片观察时其有丝分裂中期相的数量,且获得干净的根尖有丝分裂中期染色体图像,可用于菊花有丝分裂染色体的鉴定,同时也有助于获得用于核型分析、FISH分析等细胞学研究。而这种获得清晰的菊花根尖有丝分裂中期的染色体图像的方法可推广至菊属其他植物的细胞学研究中。

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