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公开(公告)号：CN116218878A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202211622044.9
申请日：2022-12-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开一种显著促进膨胀蛋白TgS可溶表达的方法及其应用。本发明利用助溶标签蛋白，并通过改变和优化蛋白表达过程中的发酵条件，从而提高膨胀蛋白TgS的可溶表达。基于前期研究结果和当前可溶蛋白利用优化的需求，发现在大肠杆菌体系的蛋白表达过程中，TRX标签蛋白、低温(12℃)，通气量为0.5(V/V·min‑1)，添加0.02g·L‑1ZnSO4和0.1％丙三醇条件下可以实现膨胀蛋白TgS可溶表达。本发明从包涵体生成特性来组合优化蛋白发酵过程，实现了膨胀蛋白TgS异源表达时的可溶性高效表达，显著增加了其生物活性，同时降低了包涵体变复性成本。
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公开(公告)号：CN116042578A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202211206454.5
申请日：2022-09-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明生物技术领域，具体涉及一种几丁质酶及其应用。本发明所述的几丁质酶，其氨基酸序列选自如下（A1）或（A2）：（A1）氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；（A2）将SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与（A1）所示的蛋白质具有相同功能的蛋白质。本发明得到的几丁质酶，最适温度为80℃，并且具有良好的热稳定性，且水解效率较高，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN116004587A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202210950794.2
申请日：2022-08-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术及应用领域，具体涉及一种耐高温蛋白酶AbTp及其应用。所述蛋白酶AbTp至少包含氨基酸片段TNNHVVEGA、PFTDLAVIRAE和GGALVNAAGQVI的一种或多种。本发明所提供的耐高温的蛋白酶AbTp，其最适温度为70℃，最适pH 6.0，在70℃下的半衰期可达267分钟，比活力可达1877 U·mg‑1。将蛋白酶AbTp应用于虾壳蛋白质的降解中，蛋白降解率可达61%，高于以往生物降解法中通常采用的猪来源胰蛋白酶和猪来源胃蛋白酶。
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公开(公告)号：CN113151326B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202110419551.1
申请日：2021-04-19
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种内切纤维素酶基因egI及其编码的蛋白与应用。本发明的内切纤维素酶基因egI，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示所示；该基因编码的蛋白即为内切纤维素酶EGI。从EGI的酶促反应动力学分析可得其水解CMC的最大反应速率达22.2 mg·min‑1。酶学结果分析表明：在pH 3‑4时，EGI水解CMC每分钟可产生的还原糖含量最高值高达21.4 mg·mL‑1，属于酸性内切纤维素酶；温度达100℃时，EGI水解CMC每分钟产生的还原糖含量可达12.4 mg·mL‑1，在高温下仍有较强的活性。本发明为农业废弃物的资源化利用、生态农业的发展提供了理论基础和技术保障。
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公开(公告)号：CN114181958A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202110775430.0
申请日：2021-07-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种α‑淀粉酶基因amy1及其编码的蛋白与应用。首先以堆肥样品为原料提取总RNA，再通过反转录获取α‑淀粉酶基因amy1的cDNA；以cDNA为模板，利用PCR扩增法获得的amy1基因的完整序列；接着采用双酶切和酶连方法，将完整的amy1基因插入到pPICZαA表达载体上，获得重组表达质粒pPICZαA‑amy1；然后采用电击转化法将重组表达质粒pPICZαA‑amy1转化到毕赤酵母感受态中，筛选高效的工程菌转化子；最后工程菌经过液体发酵培养基诱导培养后，分泌α‑淀粉酶AMY1。酶学结果分析表明：温度在40℃时，AMY1水解可溶性淀粉每分钟产生的还原糖含量为0.55μg/mL，在pH6‑8时，AMY1水解可溶性淀粉每分钟可产生的还原糖含量最高值为0.78μg/mL。本发明为农业废弃物的资源化利用、生态农业的发展提供了理论基础和技术保障。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113151326A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110419551.1
申请日：2021-04-19
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种内切纤维素酶基因egI及其编码的蛋白与应用。本发明的内切纤维素酶基因egI，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示所示；该基因编码的蛋白即为内切纤维素酶EGI。从EGI的酶促反应动力学分析可得其水解CMC的最大反应速率达22.2 mg·min‑1。酶学结果分析表明：在pH 3‑4时，EGI水解CMC每分钟可产生的还原糖含量最高值高达21.4 mg·mL‑1，属于酸性内切纤维素酶；温度达100℃时，EGI水解CMC每分钟产生的还原糖含量可达12.4 mg·mL‑1，在高温下仍有较强的活性。本发明为农业废弃物的资源化利用、生态农业的发展提供了理论基础和技术保障。
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公开(公告)号：CN111334452A
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN201910879014.8
申请日：2019-09-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种畜禽粪污降解复合菌剂及其应用。复合菌剂由疏棉状嗜热丝孢菌NJAU-F4-11，芽孢杆菌NJAU-N45、芽孢杆菌NJAU-ND8和芽孢杆菌B5菌液组成。所述的复合菌剂的应用为其加速堆肥发酵。步骤如下：将畜禽粪污与辅料按照一定C/N混匀后接种液体菌种，砌成条垛后，采用条垛式发酵工艺翻抛发酵。相比于对照不添加菌种和添加单菌处理，复合菌剂的添加有效促进了堆肥初期堆体温度的升高，促使堆体提前进入降温期，促进堆肥产品发芽指数等提高。
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公开(公告)号：CN110066746B
公开(公告)日：2019-12-27
申请号：CN201910247608.7
申请日：2019-03-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一株加速堆肥腐熟的耐高温芽孢杆菌属细菌NJAU‑ND8及其应用。所述的芽孢杆菌属细菌NJAU‑ND8的保藏编号为CGMCC No.16737，所述的菌株的应用为其加速堆肥发酵。步骤如下：将畜禽粪污与辅料按照一定C/N混匀后接种液体菌种，砌成条垛后，采用条垛式发酵工艺，翻抛发酵。相比于对照不添加菌种，菌种的添加有效促进了堆肥初期堆体温度的升高，促使堆体提前进入降温期，促进堆肥产品发芽指数的提高和促使堆体C/N提前降至腐熟范围。
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公开(公告)号：CN109880771B
公开(公告)日：2019-11-01
申请号：CN201910247761.X
申请日：2019-03-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种加速堆肥腐熟的高温芽孢杆菌属高温细菌NJAU‑N30及其加速发酵制备有机肥的工艺方法。所述菌种保藏编号为CGMCC No.16736，所述的菌株的应用为其加速堆肥发酵。步骤如下：将畜禽粪污与辅料按照一定C/N混匀后接种液体菌种，砌成条垛后，采用条垛式发酵工艺，翻抛发酵。相比于对照不添加菌种，菌种的添加有效促进了堆肥初期堆体温度的升高，促使堆体提前进入降温期，促进堆肥产品发芽指数等的提高。所制成的有机肥，能够有效促进植株的生长。
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公开(公告)号：CN109234257A
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201811105101.X
申请日：2018-09-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种腈水解酶基因nit2及其过表达方法和应用。一种哈茨木霉NJAU4742中IAA生物合成的关键基因腈水解酶基因nit2，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。含有腈水解酶基因nit2的过表达方法。腈水解酶基因nit2及其过表达片段在构建IAA产量显著提高的哈茨木霉NJAU4742基因工程菌中的应用。本发明最新发现的哈茨木霉NJAU4742中nit2基因在IAA合成过程中具有重要的作用，基因的过表达后均能显著增加植物主根系根毛区中柱鞘位置的IAA含量。本发明为新型木霉生物有机肥的研制、生态农业的发展提供了理论基础和技术保障。
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