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公开(公告)号：CN114181958B
公开(公告)日：2023-06-09
申请号：CN202110775430.0
申请日：2021-07-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种α‑淀粉酶基因amy1及其编码的蛋白与应用。首先以堆肥样品为原料提取总RNA，再通过反转录获取α‑淀粉酶基因amy1的cDNA；以cDNA为模板，利用PCR扩增法获得的amy1基因的完整序列；接着采用双酶切和酶连方法，将完整的amy1基因插入到pPICZαA表达载体上，获得重组表达质粒pPICZαA‑amy1；然后采用电击转化法将重组表达质粒pPICZαA‑amy1转化到毕赤酵母感受态中，筛选高效的工程菌转化子；最后工程菌经过液体发酵培养基诱导培养后，分泌α‑淀粉酶AMY1。酶学结果分析表明：温度在40℃时，AMY1水解可溶性淀粉每分钟产生的还原糖含量为0.55μg/mL，在pH6‑8时，AMY1水解可溶性淀粉每分钟可产生的还原糖含量最高值为0.78μg/mL。本发明为农业废弃物的资源化利用、生态农业的发展提供了理论基础和技术保障。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113151326B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202110419551.1
申请日：2021-04-19
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种内切纤维素酶基因egI及其编码的蛋白与应用。本发明的内切纤维素酶基因egI，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示所示；该基因编码的蛋白即为内切纤维素酶EGI。从EGI的酶促反应动力学分析可得其水解CMC的最大反应速率达22.2 mg·min‑1。酶学结果分析表明：在pH 3‑4时，EGI水解CMC每分钟可产生的还原糖含量最高值高达21.4 mg·mL‑1，属于酸性内切纤维素酶；温度达100℃时，EGI水解CMC每分钟产生的还原糖含量可达12.4 mg·mL‑1，在高温下仍有较强的活性。本发明为农业废弃物的资源化利用、生态农业的发展提供了理论基础和技术保障。
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公开(公告)号：CN114181958A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202110775430.0
申请日：2021-07-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种α‑淀粉酶基因amy1及其编码的蛋白与应用。首先以堆肥样品为原料提取总RNA，再通过反转录获取α‑淀粉酶基因amy1的cDNA；以cDNA为模板，利用PCR扩增法获得的amy1基因的完整序列；接着采用双酶切和酶连方法，将完整的amy1基因插入到pPICZαA表达载体上，获得重组表达质粒pPICZαA‑amy1；然后采用电击转化法将重组表达质粒pPICZαA‑amy1转化到毕赤酵母感受态中，筛选高效的工程菌转化子；最后工程菌经过液体发酵培养基诱导培养后，分泌α‑淀粉酶AMY1。酶学结果分析表明：温度在40℃时，AMY1水解可溶性淀粉每分钟产生的还原糖含量为0.55μg/mL，在pH6‑8时，AMY1水解可溶性淀粉每分钟可产生的还原糖含量最高值为0.78μg/mL。本发明为农业废弃物的资源化利用、生态农业的发展提供了理论基础和技术保障。
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公开(公告)号：CN113151326A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110419551.1
申请日：2021-04-19
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种内切纤维素酶基因egI及其编码的蛋白与应用。本发明的内切纤维素酶基因egI，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示所示；该基因编码的蛋白即为内切纤维素酶EGI。从EGI的酶促反应动力学分析可得其水解CMC的最大反应速率达22.2 mg·min‑1。酶学结果分析表明：在pH 3‑4时，EGI水解CMC每分钟可产生的还原糖含量最高值高达21.4 mg·mL‑1，属于酸性内切纤维素酶；温度达100℃时，EGI水解CMC每分钟产生的还原糖含量可达12.4 mg·mL‑1，在高温下仍有较强的活性。本发明为农业废弃物的资源化利用、生态农业的发展提供了理论基础和技术保障。
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公开(公告)号：CN113151325B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202110419550.7
申请日：2021-04-19
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶基因bgI及其编码蛋白与应用。本发明的β‑葡萄糖苷酶基因bgI，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；该基因编码的蛋白为β‑葡萄糖苷酶BGI。从BGI的酶促反应动力学分析可得其水解p‑NPG的最大反应速率达0.648μM·min‑1。酶学结果分析表明：在pH4‑6时，BGI水解p‑NPG每分钟可产生的还原糖含量最高值高达0.058μM·mL‑1，属于酸性内切纤维素酶；温度达100℃时，BGI水解p‑NPG每分钟产生的还原糖含量可达0.023μM·mL‑1，在高温下仍有较强的活性。本发明为农业废弃物的资源化利用、生态农业的发展提供了理论基础和技术保障。
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公开(公告)号：CN113151325A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110419550.7
申请日：2021-04-19
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶基因bgI及其编码蛋白与应用。本发明的β‑葡萄糖苷酶基因bgI，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；该基因编码的蛋白为β‑葡萄糖苷酶BGI。从BGI的酶促反应动力学分析可得其水解p‑NPG的最大反应速率达0.648μM·min‑1。酶学结果分析表明：在pH4‑6时，BGI水解p‑NPG每分钟可产生的还原糖含量最高值高达0.058μM·mL‑1，属于酸性内切纤维素酶；温度达100℃时，BGI水解p‑NPG每分钟产生的还原糖含量可达0.023μM·mL‑1，在高温下仍有较强的活性。本发明为农业废弃物的资源化利用、生态农业的发展提供了理论基础和技术保障。
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