公开(公告)号：CN113337474B

公开(公告)日：2022-09-27

申请号：CN202110166859.X

申请日：2021-02-05

Applicant: 华南农业大学 ,  广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)

Inventor： 杨美艳 ,  吴清平 ,  刘泽锟 ,  陈韩芳 ,  张菊梅 ,  丁郁 ,  陈谋通 ,  薛亮 ,  王涓 ,  古其会 ,  韦献虎 ,  张友雄 ,  曾海燕

IPC: C12N7/00 ,  A61K35/76 ,  A61P31/04 ,  A23K10/18 ,  A23K50/80 ,  A01N63/40 ,  A01P3/00 ,  A01P1/00 ,  C12R1/92

Abstract: 本发明公开一种副溶血性弧菌噬菌体vB_VpP_DE17，其对副溶血性弧菌具有强烈的裂解作用，并且能够感染11种O抗原中的10种副溶血性弧菌。该噬菌体可以通过特异性宿主进行扩增，产生效价高的发酵产物，并且能够耐受60℃高温、耐受pH 5.0~pH 10.0。其最佳侵染复数（MOI）较广，在MOI为1~0.1的范围内，具有较强的防控副溶血性弧菌效果。因而，该副溶血性弧菌噬菌体可用于防控在水产养殖过程中由副溶血性弧菌引起的急性肝胰腺坏死综合症，具体较高的应用价值。

公开(公告)号：CN113337474A

公开(公告)日：2021-09-03

申请号：CN202110166859.X

申请日：2021-02-05

Applicant: 华南农业大学 ,  广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)

Inventor： 杨美艳 ,  吴清平 ,  刘泽锟 ,  陈韩芳 ,  张菊梅 ,  丁郁 ,  陈谋通 ,  薛亮 ,  王涓 ,  古其会 ,  韦献虎 ,  张友雄 ,  曾海燕

IPC: C12N7/00 ,  A61K35/76 ,  A61P31/14 ,  A23K10/18 ,  A23K50/80 ,  A01N63/40 ,  A01P3/00 ,  A01P1/00 ,  C12R1/92

Abstract: 本发明公开一种副溶血性弧菌噬菌体vB_VpP_DE17，其对副溶血性弧菌具有强烈的裂解作用，并且能够感染11种O抗原中的10种副溶血性弧菌。该噬菌体可以通过特异性宿主进行扩增，产生效价高的发酵产物，并且能够耐受60℃高温、耐受pH 5.0~pH 10.0。其最佳侵染复数（MOI）较广，在MOI为1~0.1的范围内，具有较强的防控副溶血性弧菌效果。因而，该副溶血性弧菌噬菌体可用于防控在水产养殖过程中由副溶血性弧菌引起的急性肝胰腺坏死综合症，具体较高的应用价值。

公开(公告)号：CN116987802B

公开(公告)日：2024-07-23

申请号：CN202310790836.5

申请日：2023-06-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  李鹏儒 ,  沈兴 ,  徐则珂 ,  孟静南 ,  王涓 ,  罗林 ,  雷红涛

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/085

Abstract: 本发明公开了一种用于检测呕吐型蜡样芽孢杆菌的RPA引物对，所述RPA引物对包括核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示的正向RPA引物和核苷酸序列如SEQ ID NO：17所示的反向RPA引物。所述引物对以呕吐型蜡样芽孢杆菌毒力基因cesB作为检测靶基因，不会对蜡样芽孢杆菌群组成员及其他食源性致病菌进行非特异性扩增，检测结果准确，具有优异的特异性；同时该RPA引物对呕吐型蜡样芽孢杆菌的基因组DNA检测限为10‑2ng/μL，对菌液的检测限为1.6×102CFU/mL，在增菌2h后检测限能够达到1.6CFU/mL；并且检测过程不依赖于大型仪器，适用于现场快速检测，结果易于观察，极大提高了检测效率。

公开(公告)号：CN116987802A

公开(公告)日：2023-11-03

申请号：CN202310790836.5

申请日：2023-06-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  李鹏儒 ,  沈兴 ,  徐则珂 ,  孟静南 ,  王涓 ,  罗林 ,  雷红涛

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/085

Abstract: 本发明公开了一种用于检测呕吐型蜡样芽孢杆菌的RPA引物对，所述RPA引物对包括核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示的正向RPA引物和核苷酸序列如SEQ ID NO：17所示的反向RPA引物。所述引物对以呕吐型蜡样芽孢杆菌毒力基因cesB作为检测靶基因，不会对蜡样芽孢杆菌群组成员及其他食源性致病菌进行非特异性扩增，检测结果准确，具有优异的特异性；同时该RPA引物对呕吐型蜡样芽孢杆菌的基因组DNA检测限为10‑2ng/μL，对菌液的检测限为1.6×102CFU/mL，在增菌2h后检测限能够达到1.6CFU/mL；并且检测过程不依赖于大型仪器，适用于现场快速检测，结果易于观察，极大提高了检测效率。

公开(公告)号：CN114195179B

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202111243750.8

申请日：2021-10-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  孟静南 ,  刘英菊 ,  沈兴 ,  王涓 ,  王弘 ,  雷红涛 ,  沈玉栋

IPC: C01F17/235 ,  C01F17/10 ,  B22F9/24 ,  B22F1/054 ,  B82Y40/00 ,  B82Y30/00 ,  G01N33/551 ,  G01N33/58 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种非诊断目的双抗夹心酶联免疫检测蜡样芽胞杆菌的方法，本发明利用合成Cu/CeO2纳米颗粒作为模拟酶，替代HRP与二抗标记(偶联)，其具有辣根过氧化物酶(HRP)活性。进一步以抗B.cereus的单克隆抗体作为捕获抗体(包被抗体)，抗B.cereus的多克隆抗体作为检测抗体，Cu/CeO2纳米颗粒作为模拟酶标记二抗，建立了B.cereus的夹心ELISA分析方法，该方法具有灵敏度高、特异型好、成本低、操作简单，其用于食品中蜡样芽胞杆菌B.cereus的快速、高通量、低成本检测。

公开(公告)号：CN112094328A

公开(公告)日：2020-12-18

申请号：CN202010994172.0

申请日：2020-09-21

Applicant: 华南农业大学 ,  广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)

Inventor： 王涓 ,  聂翔 ,  吴清平 ,  丁郁 ,  张菊梅 ,  马国祥 ,  杨小鹃 ,  曾海燕

IPC: C07K14/205 ,  C07K1/14 ,  C07K1/34

Abstract: 本发明提供了一种空肠弯曲杆菌外膜囊泡的提取及纯化方法，包括以下方法：S1培养空肠弯曲杆菌，获得菌液；S2提取菌液外膜囊泡，获得粗提的外膜囊泡；S3采用Optiprep密度梯度离心法纯化粗提的外膜囊泡。本发明的将超速离心法和Optiprep密度梯度离心法相结合提取纯化空肠弯曲杆菌外膜囊泡，Optiprep梯度离心液浓度为35％的位置回收OMVs。本发明的方法还优化了空肠弯曲杆菌的培养基和培养条件，提高了空肠弯曲杆菌的生长率，这有利于获得更多的OMVs的，增加了OMVs的量。通过本发明的方法制备OMVs减少了杂质纯度更高。

公开(公告)号：CN117946979A

公开(公告)日：2024-04-30

申请号：CN202410093492.7

申请日：2024-01-23

Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) ,  华南农业大学

Inventor： 王涓 ,  王梓萌 ,  徐天翔 ,  丁郁 ,  吴清平 ,  张菊梅 ,  刘鸣

IPC: C12N7/00 ,  A01N63/40 ,  A01P1/00 ,  A61K35/76 ,  A61P31/04 ,  A23L3/3571 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/92

Abstract: 本发明公开了三株具有特异性分子靶标的烈性小肠结肠炎耶尔森氏菌噬菌体及其应用。Yersinia enterocolitica phage vB_YenP_WW1于2023年11月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为：GDMCC No：64014‑B1。Yersinia enterocolitica phage vB_YenP_WW2于2023年11月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为：GDMCC No：64015‑B1。Yersinia enterocolitica phage vB_YenP_WX1于2023年11月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为：GDMCC No：64016‑B1。本发明提供的新型烈性小肠结肠炎耶尔森氏菌噬菌体WW1、WW2和WX1，共可裂解186株食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌中的34株，裂解率为18.3％；同时，以上噬菌体具有良好的热稳定性，对酸碱具有耐受性，有较强的环境适应能力，不易在应用过程中失活，且在牛奶和猪肉中对目标菌有较好的抑制效果。综上所述，噬菌体WW1、WW2、WX1有望成为一种抑菌制剂用于防控食品、人体或环境中小肠结肠炎耶尔森氏菌的污染。

公开(公告)号：CN114195179A

公开(公告)日：2022-03-18

申请号：CN202111243750.8

申请日：2021-10-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  孟静南 ,  刘英菊 ,  沈兴 ,  王涓 ,  王弘 ,  雷红涛 ,  沈玉栋

IPC: C01F17/235 ,  C01F17/10 ,  B22F9/24 ,  B22F1/054 ,  B82Y40/00 ,  B82Y30/00 ,  G01N33/551 ,  G01N33/58 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种非诊断目的双抗夹心酶联免疫检测蜡样芽胞杆菌的方法，本发明利用合成Cu/CeO2纳米颗粒作为模拟酶，替代HRP与二抗标记(偶联)，其具有辣根过氧化物酶(HRP)活性。进一步以抗B.cereus的单克隆抗体作为捕获抗体(包被抗体)，抗B.cereus的多克隆抗体作为检测抗体，Cu/CeO2纳米颗粒作为模拟酶标记二抗，建立了B.cereus的夹心ELISA分析方法，该方法具有灵敏度高、特异型好、成本低、操作简单，其用于食品中蜡样芽胞杆菌B.cereus的快速、高通量、低成本检测。

公开(公告)号：CN118064382A

公开(公告)日：2024-05-24

申请号：CN202410093503.1

申请日：2024-01-23

Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) ,  华南农业大学

Inventor： 王涓 ,  肖铠姗 ,  潘琪琪 ,  丁郁 ,  吴清平 ,  张菊梅 ,  汪智

IPC: C12N7/00 ,  A01N63/40 ,  A01P1/00 ,  A61K35/76 ,  A61P31/04 ,  A23L3/3571 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/92

Abstract: 本发明公开了一株空肠弯曲菌噬菌体vB_CjeM_WX1及其应用。Campylobacterjejuni phage vB_CjeM_WX1已于2023年11月09日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：中国广州市先烈中路100号广东省科学院微生物研究所，邮编：510070，保藏编号为GDMCC No:64003‑B1。本发明提供了一株空肠弯曲菌噬菌体(Campylobacterjejuni phage)vB_CjeM_WX1，裂解率为47.3％(35/74)，有较强的环境适应能力，不易在应用过程中失活，且在牛奶和鸡肉中对目标菌有较好的抑制效果。

公开(公告)号：CN113046326B

公开(公告)日：2022-08-16

申请号：CN202110166825.0

申请日：2021-02-05

Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) ,  华南农业大学

Inventor： 杨美艳 ,  吴清平 ,  叶元明 ,  陈韩芳 ,  张菊梅 ,  丁郁 ,  陈谋通 ,  薛亮 ,  王涓 ,  曾海燕 ,  吴诗 ,  叶青华 ,  古其会

IPC: C12N7/00 ,  A61K35/76 ,  A61P31/04 ,  A61P1/18 ,  A23K10/18 ,  A23K50/80 ,  C12R1/92

Abstract: 本发明公开一株烈性副溶血性弧菌噬菌体vB_VpP_FE11的分离及应用，所述的噬菌体vB_VpP_FE11的耐受温度＜70℃，pH值为4至11时可以存活。水产养殖环境中，pH条件一般为中性或偏酸性。本发明的副溶血性弧菌噬菌体vB_VpP_FE11可裂解133株食源性副溶血性弧菌菌株中的35株，裂解率为26.3%，说明该噬菌体为烈性噬菌体且具有广谱性。并验证噬菌体的体外裂菌能力，制备新型生物杀菌制剂，可以有效防控副溶血性弧菌感染，解决目前抗生素治疗副溶血性弧菌面临的耐药性问题。