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公开(公告)号:CN112094328A
公开(公告)日:2020-12-18
申请号:CN202010994172.0
申请日:2020-09-21
Applicant: 华南农业大学 , 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
IPC: C07K14/205 , C07K1/14 , C07K1/34
Abstract: 本发明提供了一种空肠弯曲杆菌外膜囊泡的提取及纯化方法,包括以下方法:S1培养空肠弯曲杆菌,获得菌液;S2提取菌液外膜囊泡,获得粗提的外膜囊泡;S3采用Optiprep密度梯度离心法纯化粗提的外膜囊泡。本发明的将超速离心法和Optiprep密度梯度离心法相结合提取纯化空肠弯曲杆菌外膜囊泡,Optiprep梯度离心液浓度为35%的位置回收OMVs。本发明的方法还优化了空肠弯曲杆菌的培养基和培养条件,提高了空肠弯曲杆菌的生长率,这有利于获得更多的OMVs的,增加了OMVs的量。通过本发明的方法制备OMVs减少了杂质纯度更高。
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公开(公告)号:CN114540314B
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202011333306.0
申请日:2020-11-24
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明提供了一种克罗诺杆菌噬菌体,所述噬菌体为克罗诺杆菌噬菌体vB_CtuP_A24,其保藏编号为:GDMCC No:61184‑B1,所述噬菌体为短尾噬菌体,呈多面体的头部和短尾结构,头部长127.6mm,宽56.7mm,尾部约36.1mm。本发明中的噬菌体在pH 4.0‑11范围和温度25‑60℃条件下具有良好的稳定性,不携带任何毒力或抗生素耐药基因,可以安全地运用于食品克罗诺杆菌的防控。
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公开(公告)号:CN112575100B
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN202011619201.1
申请日:2020-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Inventor: 吴诗 , 吴清平 , 丁郁 , 陈谋通 , 薛亮 , 张菊梅 , 代京莎 , 王涓 , 叶青华 , 蔡芷荷 , 庞锐 , 雷涛 , 杨小鹃 , 张淑红 , 古其会 , 韦献虎 , 张友雄 , 张峰 , 黄嘉慧 , 陈鲁
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,具有涉及3株我国自主知识产权的、符合国内传播规律的银白色葡萄球菌标准参考菌株,可用作食品、药品、临床检验等不同领域的标准参考菌株。其保藏号分别为:GDMCC 60854、GDMCC 60948和GDMCC 60949。本发明的3株银白色葡萄球菌菌株,遗传背景清晰,且样品来源、耐药性和分子检测靶标等信息清晰,完全满足食品、药品、临床检验方面对于标准菌株的要求。本发明还涉及一组用于检测、鉴别上述3株银白色葡萄球菌标准菌株的特异性靶标基因以及对应的PCR引物。最后,本发明还提供了一种存活率高、特异性的银白色葡萄球菌冻干保护剂,可用于本发明标准菌株的长期储存。
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公开(公告)号:CN109609668B
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN201910105795.5
申请日:2019-02-01
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种鼠伤寒沙门菌MLVA分型的检测引物组、试剂盒及应用。本发明针对鼠伤寒沙门菌4个具有较好分辨能力的VNTR位点设计特异性引物,建立多重PCR扩增检测方法,对各位点PCR扩增产物片段进行测序,采用本地Blast技术对测序结果进行分析,获得4个位点重复序列数目组合,对鼠伤寒沙门菌进行MLVA分型。本发明的方法可对鼠伤寒沙门菌进行稳定的分型检测,仅分析4个VNTR位点、一次多重PCR扩增检测、直观方便的本地Blast分析获得VNTR重复序列数目,其分辨率与原MLVA‑5点分型方法相同,但分型效率高于原有MLVA‑5位点法,更简单、方便。
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公开(公告)号:CN111979292A
公开(公告)日:2020-11-24
申请号:CN202010730727.0
申请日:2020-07-27
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种同时携带多重耐药基因cfr和lsa(E)的MRSA的用途。金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)Sta2868B2在筛选功能微生物、药物或抗菌材料中的应用,所述的金黄色葡萄球菌Sta2868B2,保藏号:GDMCC No:61037。本发明提供了一种同时携带多重耐药基因cfr和lsa(E)的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌-金黄色葡萄球菌Sta2868B2。该菌株对11种类型的抗生素特别是利奈唑胺耐药,可做为筛选新型功能微生物/药物/抗菌材料的模型材料,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN111724859A
公开(公告)日:2020-09-29
申请号:CN202010551662.3
申请日:2020-06-16
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种基于核心基因组SNP分析的副溶血性弧菌溯源方法,所述方法对研究样品菌株和参考菌株核心基因组的SNP进行分析,判断其与各参考菌株之间的双尾SNP距离,可得到样品菌株与参考菌株之间的溯源关系,并可进一步用于样品菌致病性研究。本发明的副溶血性弧菌菌株溯源方法,可精确地反映样品菌与已知参考菌之间的分化时间,能较好地解释不同菌株之间的克隆性。相对于传统的分型方法,本发明方法通量更高,分辨率、准确性和重复性都更好,有助于确定不同菌株之间是否存在直接传播关系,对于不同菌株的流行病学关联研究、疾病防控具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN109652573B
公开(公告)日:2019-08-30
申请号:CN201910105788.5
申请日:2019-02-01
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于鼠伤寒沙门菌或其单相菌变种分型检测的VNTR位点、检测引物组及检测分析方法。本发明针对鼠伤寒沙门菌及其单相菌变种沙门菌1,4,[5],12:i:‑新筛选2个VNTR位点,并联用已知的5个VNTR位点,建立MLVA‑2位点法和MLVA‑7位点法。经过大量鼠伤寒沙门菌及其单相菌变种沙门菌1,4,[5],12:i:‑菌株检测验证,本发明的检测分析方法可直接对鼠伤寒沙门菌及其单相菌变种沙门菌1,4,[5],12:i:‑进行稳定的分型检测,仅分析2个基因,分型效率与传统的MLST分型方法相当,仅分析7个基因,分型效率高于联用原有MLST和MLVA‑5位点分型方法。
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公开(公告)号:CN111020041B
公开(公告)日:2022-10-11
申请号:CN201911399987.8
申请日:2019-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开16种不同血清型沙门氏菌特异性新分子靶标及其快速检测方法,本发明方法提供了用于不同血清型沙门氏菌——肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、德尔卑沙门氏菌、印第安纳沙门氏菌、阿贡纳沙门氏菌、婴儿沙门氏菌、里森沙门氏菌、布伦登卢普沙门氏菌、维尔肖沙门氏菌、奥尔巴尼沙门氏菌、哈达尔沙门氏菌、韦太夫雷登沙门氏菌、伦敦沙门氏菌、火鸡沙门氏菌、山夫登堡沙门氏菌和波莫纳沙门氏菌的共72个特异性分子检测靶标及对应的PCR引物组和快速检测方法。本发明方法具有检测时间短、成本低、操作简单、特异性强的优点;同时本发明的检测方法可用于检测某些抗原不表达的菌株,弥补免疫检测的缺陷,检测结果更准确,判定更简单,实用性更强。
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公开(公告)号:CN112538544B
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN202011608299.0
申请日:2020-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Inventor: 吴清平 , 张菊梅 , 丁郁 , 薛亮 , 陈谋通 , 相欣然 , 王涓 , 叶青华 , 吴诗 , 曾海燕 , 杨小鹃 , 张淑红 , 庞锐 , 雷涛 , 古其会 , 韦献虎 , 张友雄 , 陈鲁
Abstract: 本发明提供了用于检测食源性致病菌的特异性分子靶标,所述特异性分子靶标的核苷酸序列如SEQ ID NO:1~31所示。本发明还提供了一种食源性致病菌活菌的检测方法,包括以下步骤:步骤1:在待测样品加入PMA染料溶液;步骤2:提取待测样品中的菌体DNA;步骤3:以步骤2中的菌体DNA为模板,进行实时荧光定量PCR检测;步骤4:待反应结束后,将获得的荧光定量PCR扩增的曲线和Ct值与建立的标准曲线计算样品中食源性致病菌活菌的数量。本发明的检测方法具有检测时间短,无须经过传统的培养增菌过程,不受样品中食源性致病菌标准菌株死菌干扰,准确检测并定量样品中食源性致病菌标准菌株的具体含菌数量。
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公开(公告)号:CN112795669B
公开(公告)日:2022-05-20
申请号:CN202011615514.X
申请日:2020-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Inventor: 王涓 , 吴清平 , 丁郁 , 陈惠元 , 张菊梅 , 陈谋通 , 薛亮 , 吴诗 , 叶青华 , 代京莎 , 徐环 , 庞锐 , 曾海燕 , 雷涛 , 古其会 , 韦献虎 , 张友雄 , 张淑红 , 杨小鹃 , 刘鸣 , 王惠贤 , 陈鲁
Abstract: 本发明提供了三株可以作为小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)相关实验的对照的标准菌株,所述标准菌株具有典型的小肠结肠炎耶尔森氏菌菌落形态和生理生化特征,可用于检验小肠结肠炎耶尔森氏菌选择性培养基的准确性,同时可以作为小肠结肠炎耶尔森氏菌常见生理生化表型及分子特征的检测中的对照样品;所述标准菌株含有相应的特异性分子靶标(如SEQ ID NO:1~11所示的核苷酸序列),还提供了含有所述分子靶标特异性的特异性PCR扩增引物。本发明还提供了一种小肠结肠炎耶尔森氏菌的冻干保护剂,所述保护剂其冻干存活率能达到85%以上;在‑20℃条件下保存可以保证其数量级至少一年以上不发生变化,因此可用于长期储存质控菌株。
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