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公开(公告)号：CN108486108B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201810220691.4
申请日：2018-03-16
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开一种敲除人HMGB1基因的细胞株及其应用，属于分子生物学领域。本发明提供一种靶向敲除人HMGB1基因的gRNA序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。利用CRISPR‑Cas9技术首次在人Huh7细胞基因组上敲除HMGB1基因，使得HMGB1蛋白的表达完全丧失，获得HMGB1敲除的Huh7细胞株，且敲除细胞株形态、生长速度等方面均与对照细胞无明显差异，是较为理想的HMGB1敲除的细胞模型；且操作简便，周期短，成本低，改造后细胞株稳定，可用于研究HMGB1蛋白在自噬、凋亡、细胞炎症、病毒感染等方面的具体作用机制。本发明获得的细胞株能够显著增强乙型脑炎病毒毒株的感染。
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公开(公告)号：CN111304201B
公开(公告)日：2022-10-21
申请号：CN202010106272.5
申请日：2020-02-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , A61K48/00 , A61K31/713 , A61P31/14 , A61P25/00
Abstract: 本发明提供了一种降低乙型脑炎脑病毒感染的siRNA及其应用。本发明通过构建含有膜性细胞器标志蛋白稳定表达的细胞系，利用dsRNA抗体靶向乙脑病毒基因组复制复合体找到乙脑病毒的膜性复制位点，然后利用siRNA对乙型脑炎病毒基因组的复制位点进行RNA干扰，通过检测比对RNA干扰前后的乙型脑炎病毒的病毒RNA水平以及病毒滴度，验证得到降低乙型脑炎脑病毒感染的siRNA，并通过深入探究乙型脑炎病毒基因组的复制位点，为找到具有研究价值或商业应用价值的检测靶标、防治药物靶点提供参考。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111334482A
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN202010243659.5
申请日：2020-03-31
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种复制性增强的减毒JEV及其制备方法与应用，属于生物医学技术领域。本发明的减毒JEV是日本乙型脑炎病毒NS5蛋白644位天冬氨酸突变为苏氨酸，和3’非编码区248位碱基T突变为C、254位碱基A突变为G、258位点碱基A突变为G，所得的日本乙型脑炎病毒。本发明方法获得的突变毒株在复制能力上有了明显的提升，同时致病性降低，用于疫苗生产中，可提高产量，降低成本。利用本发明方法获得突变毒株的时间周期短，操作简便，可加快弱毒毒株的培育和病毒致病机制研究的进程。
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公开(公告)号：CN114438087A
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN202210211936.3
申请日：2022-03-04
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12N7/02 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开一种敲除人SLC25A12基因的细胞株及其应用，属于分子生物学和细胞生物学技术领域。本发明提供一种靶向敲除人SLC25A12基因的gRNA序列，其核苷酸序列如SEQID NO.1所示。利用CRISPR‑Cas9技术首次在人Hela细胞基因组上敲除SLC25A12基因，获得SLC25A12敲除的Hela细胞株，且敲除细胞株活性、生长速度等方面均与对照细胞无明显差异，是较为理想的SLC25A12敲除的细胞模型；且操作简便，周期短，成本低，改造后细胞株稳定，可用于研究SLC25A12蛋白在糖胺聚糖代谢和蛋白质代谢等方面的具体作用机制。本发明获得的细胞株能够显著提高乙型脑炎病毒毒株的复制水平。
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公开(公告)号：CN111334482B
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202010243659.5
申请日：2020-03-31
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种复制性增强的减毒JEV及其制备方法与应用，属于生物医学技术领域。本发明的减毒JEV是日本乙型脑炎病毒NS5蛋白644位天冬氨酸突变为苏氨酸，和3’非编码区248位碱基T突变为C、254位碱基A突变为G、258位点碱基A突变为G，所得的日本乙型脑炎病毒。本发明方法获得的突变毒株在复制能力上有了明显的提升，同时致病性降低，用于疫苗生产中，可提高产量，降低成本。利用本发明方法获得突变毒株的时间周期短，操作简便，可加快弱毒毒株的培育和病毒致病机制研究的进程。
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公开(公告)号：CN111304201A
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN202010106272.5
申请日：2020-02-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , A61K48/00 , A61K31/713 , A61P31/14 , A61P25/00
Abstract: 本发明提供了一种降低乙型脑炎脑病毒感染的siRNA及其应用。本发明通过构建含有膜性细胞器标志蛋白稳定表达的细胞系，利用dsRNA抗体靶向乙脑病毒基因组复制复合体找到乙脑病毒的膜性复制位点，然后利用siRNA对乙型脑炎病毒基因组的复制位点进行RNA干扰，通过检测比对RNA干扰前后的乙型脑炎病毒的病毒RNA水平以及病毒滴度，验证得到降低乙型脑炎脑病毒感染的siRNA，并通过深入探究乙型脑炎病毒基因组的复制位点，为找到具有研究价值或商业应用价值的检测靶标、防治药物靶点提供参考。
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公开(公告)号：CN108486108A
公开(公告)日：2018-09-04
申请号：CN201810220691.4
申请日：2018-03-16
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开一种敲除人HMGB1基因的细胞株及其应用，属于分子生物学领域。本发明提供一种靶向敲除人HMGB1基因的gRNA序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。利用CRISPR-Cas9技术首次在人Huh7细胞基因组上敲除HMGB1基因，使得HMGB1蛋白的表达完全丧失，获得HMGB1敲除的Huh7细胞株，且敲除细胞株形态、生长速度等方面均与对照细胞无明显差异，是较为理想的HMGB1敲除的细胞模型；且操作简便，周期短，成本低，改造后细胞株稳定，可用于研究HMGB1蛋白在自噬、凋亡、细胞炎症、病毒感染等方面的具体作用机制。本发明获得的细胞株能够显著增强乙型脑炎病毒毒株的感染。
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