公开(公告)号：CN108486108B

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN201810220691.4

申请日：2018-03-16

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 亓文宝 ,  梁佳琪 ,  刘墅楷 ,  邢金超 ,  胡平生 ,  黄丽红 ,  廖明

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开一种敲除人HMGB1基因的细胞株及其应用，属于分子生物学领域。本发明提供一种靶向敲除人HMGB1基因的gRNA序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。利用CRISPR‑Cas9技术首次在人Huh7细胞基因组上敲除HMGB1基因，使得HMGB1蛋白的表达完全丧失，获得HMGB1敲除的Huh7细胞株，且敲除细胞株形态、生长速度等方面均与对照细胞无明显差异，是较为理想的HMGB1敲除的细胞模型；且操作简便，周期短，成本低，改造后细胞株稳定，可用于研究HMGB1蛋白在自噬、凋亡、细胞炎症、病毒感染等方面的具体作用机制。本发明获得的细胞株能够显著增强乙型脑炎病毒毒株的感染。

公开(公告)号：CN108486108A

公开(公告)日：2018-09-04

申请号：CN201810220691.4

申请日：2018-03-16

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 亓文宝 ,  梁佳琪 ,  刘墅楷 ,  邢金超 ,  胡平生 ,  黄丽红 ,  廖明

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开一种敲除人HMGB1基因的细胞株及其应用，属于分子生物学领域。本发明提供一种靶向敲除人HMGB1基因的gRNA序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。利用CRISPR-Cas9技术首次在人Huh7细胞基因组上敲除HMGB1基因，使得HMGB1蛋白的表达完全丧失，获得HMGB1敲除的Huh7细胞株，且敲除细胞株形态、生长速度等方面均与对照细胞无明显差异，是较为理想的HMGB1敲除的细胞模型；且操作简便，周期短，成本低，改造后细胞株稳定，可用于研究HMGB1蛋白在自噬、凋亡、细胞炎症、病毒感染等方面的具体作用机制。本发明获得的细胞株能够显著增强乙型脑炎病毒毒株的感染。