一种检测革兰氏阴性细菌启动子转录活性的报告基因质粒载体、质粒及应用

    公开(公告)号:CN118308395B

    公开(公告)日:2025-03-18

    申请号:CN202410466807.8

    申请日:2024-04-18

    Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种检测革兰氏阴性菌启动子转录活性的报告基因质粒载体、质粒及应用;本发明报告基因质粒载体包括pFA‑Gm和/或pFA‑Kan质粒,pFA‑Gm质粒包括复制子元件、mob元件以及筛选标记庆大霉素抗性基因,pFA‑Gm质粒的多克隆位点区域两侧分别含有大肠杆菌编码核糖体RNA的rrnB基因的终止区T1和T2,pFA‑Gm质粒的多克隆位点的3′端方向含有1×Flag标签;报告基因质粒为将报告基因片段连接到报告基因质粒载体上而得到;本发明通过报告基因质粒实现对革兰氏阴性细菌中基因启动子转录活性的评估,较实时荧光定量PCR技术的成本以及操作难度更低。

    一种提高禽用CpG产量的方法
    9.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118147030A

    公开(公告)日:2024-06-07

    申请号:CN202410321892.9

    申请日:2024-03-20

    Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种提高禽用CpG产量的方法。本发明提供了一种大豆蛋白胨的应用量范围为16~30g/L,酵母粉的应用量范围为8~20g/L,甘油为8~25g/L的培养基。使用该培养基培养CpG合成工程菌,可以有效提高CpG的产量。此外,通过将溶氧量维持在30%,通过采取指数流法加补料策略进行高密度发酵,以及30℃到42℃的变温培养策略,进一步的提高了CpG的产量,最高能达到853mg/L的最高质粒产量,平均质粒产量达到538mg/L。对比摇瓶培养的质粒产量,本发明的发酵工艺将质粒产量提高了50~100倍。

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