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公开(公告)号：CN118308395B
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202410466807.8
申请日：2024-04-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/74 , C12N15/65 , C12Q1/6897
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种检测革兰氏阴性菌启动子转录活性的报告基因质粒载体、质粒及应用；本发明报告基因质粒载体包括pFA‑Gm和/或pFA‑Kan质粒，pFA‑Gm质粒包括复制子元件、mob元件以及筛选标记庆大霉素抗性基因，pFA‑Gm质粒的多克隆位点区域两侧分别含有大肠杆菌编码核糖体RNA的rrnB基因的终止区T1和T2，pFA‑Gm质粒的多克隆位点的3′端方向含有1×Flag标签；报告基因质粒为将报告基因片段连接到报告基因质粒载体上而得到；本发明通过报告基因质粒实现对革兰氏阴性细菌中基因启动子转录活性的评估，较实时荧光定量PCR技术的成本以及操作难度更低。
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公开(公告)号：CN117987446A
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202410214630.2
申请日：2024-02-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/78 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12N15/31 , C12P17/12 , A01N63/27 , A01P1/00 , A01P3/00 , C12R1/385
Abstract: 本发明公开了一种产吩嗪‑1‑羧酸基因突变工程菌及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明以绿脓菌素产量更高的铜绿假单胞菌菌株CICC20240作为出发菌株，在出发菌株CICC20240中将Pa acpP替换为Ec acpP，同时敲除基因PA0051、PA5332、PA4209和PA4217，构建高PCA的基因工程菌株用于生产发酵。
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公开(公告)号：CN115786229B
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202211697472.8
申请日：2022-12-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于细胞工程技术领域，具体涉及一种用于红球菌基因敲除的重组系统及其应用。包括：Che9c60&61重组酶质粒、Flp重组酶和游离双链DNA敲除盒片段；游离双链DNA敲除盒片段包括：目的基因上下游同源臂序列及在其间插入包含抗性基因的两个同向FRT序列；Flp重组酶质粒的基因序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示。该用于红球菌基因敲除的重组系统可以有效对红球菌进行无痕敲除，庆大霉素抗性丢失效率达到了100％和78.7％；而且本发明基于FRT位点特异性重组酶Flpw方法可有效实现红球菌Rhodococcus ruber R1的高效无痕敲除，为下一轮基因编辑(多基因敲除)回收抗性基因。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117987443A
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202410213407.6
申请日：2024-02-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种以fabL基因作为抗性标记的枯草芽孢杆菌无抗性表达系统及其构建方法与应用，属于生物工程技术领域。本发明构建了一个无抗性标记的枯草芽孢杆菌表达载体pHT254‑L，通过删除抗性基因，插入枯草芽孢杆菌fabL基因作为筛选标记获得，在枯草芽孢杆菌168fabL缺失突变株中使用，功能验证结果表明，该无抗性表达系统能在枯草芽孢杆菌中工作，具有一定应用价值，能够用于食品级安全表达蛋白产品。
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公开(公告)号：CN115948359B
公开(公告)日：2025-01-10
申请号：CN202210917466.2
申请日：2022-08-01
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种蛋白融合标签及其应用。该蛋白融合标签包括如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示序列。该蛋白融合标签可以有效提高目的蛋白的表达量以及提高目的蛋白的水溶性，而且不会影响目的蛋白的活性。
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公开(公告)号：CN115948359A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202210917466.2
申请日：2022-08-01
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种蛋白融合标签及其应用。该蛋白融合标签包括如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示序列。该蛋白融合标签可以有效提高目的蛋白的表达量以及提高目的蛋白的水溶性，而且不会影响目的蛋白的活性。
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公开(公告)号：CN115786229A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211697472.8
申请日：2022-12-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于细胞工程技术领域，具体涉及一种用于红球菌基因敲除的重组系统及其应用。包括：Che9c60&61重组酶质粒、Flp重组酶和游离双链DNA敲除盒片段；游离双链DNA敲除盒片段包括：目的基因上下游同源臂序列及在其间插入包含抗性基因的两个同向FRT序列；Flp重组酶质粒的基因序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示。该用于红球菌基因敲除的重组系统可以有效对红球菌进行无痕敲除，庆大霉素抗性丢失效率达到了100％和78.7％；而且本发明基于FRT位点特异性重组酶Flpw方法可有效实现红球菌Rhodococcus ruber R1的高效无痕敲除，为下一轮基因编辑(多基因敲除)回收抗性基因。
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公开(公告)号：CN118308395A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410466807.8
申请日：2024-04-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/74 , C12N15/65 , C12Q1/6897
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种检测革兰氏阴性菌启动子转录活性的报告基因质粒载体、质粒及应用；本发明报告基因质粒载体包括pFA‑Gm和/或pFA‑Kan质粒，pFA‑Gm质粒包括复制子元件、mob元件以及筛选标记庆大霉素抗性基因，pFA‑Gm质粒的多克隆位点区域两侧分别含有大肠杆菌编码核糖体RNA的rrnB基因的终止区T1和T2，pFA‑Gm质粒的多克隆位点的3′端方向含有1×Flag标签；报告基因质粒为将报告基因片段连接到报告基因质粒载体上而得到；本发明通过报告基因质粒实现对革兰氏阴性细菌中基因启动子转录活性的评估，较实时荧光定量PCR技术的成本以及操作难度更低。
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