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公开(公告)号：CN115216478B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202210618518.6
申请日：2022-06-01
Applicant: 华南农业大学
Inventor： 陈爱华 , 梁昭平 , 冯赛祥 , 江金飞 , 梁铭治 , 桑运芬 , 周梦若 , 赵一珊 , 孙娟 , 张广文 , 许斯祺 , 谢倩梅 , 代绘琳 , 刘宇彤 , 林敏 , 秦苗苗
Abstract: 本发明公开一种禽多杀性巴氏杆菌内毒素减毒灭活疫苗菌株的构建方法及应用。本发明通过构建表达LpxE基因的重组质粒，进行电击转化到禽多杀性巴氏杆菌中，成功获得内毒素减毒菌株。本发明采用优化后的LpxE基因特异性的去除也野生型菌株上部分类脂A1位上的磷酸基团，成功改造巴氏杆菌；且内毒素致凝活性显著高于野生型菌株，表明脂多糖结构改造后内毒素毒性下降；同时，能使细胞因子IL‑6，TNF‑α和趋化因子CXCL2的含量显著下降，减少MH‑S细胞促炎因子的产生。采用内毒素减毒菌株制备的灭活疫苗与野生型菌株灭活疫苗相比，保护效率更高，安全性也更好，能更好地应用于禽多杀性巴氏杆菌病的防治中。
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公开(公告)号：CN117535212A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202210941651.5
申请日：2022-08-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/31 , C12N15/52 , C12N15/56 , C07K14/24 , A61K35/742 , A61P31/04 , A23K10/18 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一株具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株及其构建方法与应用。该枯草芽孢杆菌工程菌株是通过将优化的mcyABCD基因和mcjABCD基因分别插入宿主枯草芽孢杆菌的Amye和SigF位点，获得的可同时生产微菌素Y和微菌素J25的枯草芽孢杆菌WYA25S工程菌株；其中，优化的mcyABCD基因序列如SEQ ID NO.1所示，优化的mcjABCD基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明中的枯草芽孢杆菌WYA25S工程菌株在正常生长(无诱导，无抗性)的情况下，对沙门氏菌等菌株具有抑菌作用，且在生长过程中不产生芽孢，具有生长可控性和菌株安全性，其应用前景好。
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公开(公告)号：CN114836460B
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202210553568.0
申请日：2022-05-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种表达微菌素Y的枯草芽孢杆菌工程菌株及其制备和应用，属于基因工程技术和生物技术领域，本发明首先将mcyA和mcyBCD的基因序列调整为相同方向，并且用SD和起始密码子序列相连获取mcyABCD改造基因，然后以PHT43作为载体，通过枯草芽孢杆菌对改造后的mcyABCD基因进行表达并成功表达MccY，其表达产物具有良好的鼠伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌的杀菌活性，为MccY在养殖业生产实践中的应用提供了更经济便捷的模式。
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公开(公告)号：CN115747126A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211015993.0
申请日：2022-08-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生产微菌素J25的枯草芽孢杆菌重组整合工程菌株、构建方法及应用，属于微生物技术、药物和基因工程领域，本发明通过对mcjABCD基因序列和表达原件的优化，使得MccJ25可以在枯草芽孢杆菌中成功表达，并将mcjABCD基因同时整合至枯草芽孢杆菌基因组两个位点中，得到一株可以高效生产MccJ25的枯草芽孢杆菌W25AS2工程菌株，该菌可以在无抗性、无诱导、双位点共表达且无芽孢生成的条件下，对MccJ25具有较高的表达水平，并且表达产物对于肠炎沙门氏菌具有良好的杀菌活性，为MccJ25的生产应用开发了新的应用模式。
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公开(公告)号：CN114574412B
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202210149824.X
申请日：2022-02-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/31 , C12P21/02 , C07K14/245 , A61K35/742 , A61K38/16 , A61P31/04 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种表达MccJ25的枯草芽孢杆菌工程菌及其构建方法与应用。该工程菌通过将套索肽MccJ25改造后的mcjABCD序列克隆到枯草芽孢杆菌上构建得到；其中，mcjABCD序列如SEQ ID NO.1所示。本发明中构建的枯草芽孢杆菌工程菌能够成功表达MccJ25，且由于枯草芽孢杆菌属于食品级益生菌，可以避免内毒素的影响，因此，可将其作为生产MccJ25的益生菌使用；同时，该工程菌还对肠炎沙门氏菌等具有较强的抑制作用，可用在抗菌产品方面，以提升MccJ25的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114574412A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202210149824.X
申请日：2022-02-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/31 , C12P21/02 , C07K14/245 , A61K35/742 , A61K38/16 , A61P31/04 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种表达MccJ25的枯草芽孢杆菌工程菌及其构建方法与应用。该工程菌通过将套索肽MccJ25改造后的mcjABCD序列克隆到枯草芽孢杆菌上构建得到；其中，mcjABCD序列如SEQ ID NO.1所示。本发明中构建的枯草芽孢杆菌工程菌能够成功表达MccJ25，且由于枯草芽孢杆菌属于食品级益生菌，可以避免内毒素的影响，因此，可将其作为生产MccJ25的益生菌使用；同时，该工程菌还对肠炎沙门氏菌等具有较强的抑制作用，可用在抗菌产品方面，以提升MccJ25的应用价值。
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公开(公告)号：CN117625501A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202211048959.3
申请日：2022-08-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株高效生产微菌素Y的枯草芽孢杆菌重组整合工程菌株。本发明通过对mcyABCD基因序列和表达原件的改造，并将其同时插入至枯草芽孢杆菌基因组Amye和SigF两个基因中，得到高效生产MccY的枯草芽孢杆菌工程菌株。本发明同时插入Amye和SigF基因，能够使MccY的共表达量上升，相比单个基因或者质粒表达量显著提升；其表达产物对鼠伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌具有良好的杀伤性。同时得到的工程菌株不会产生芽孢，减少芽孢污染，在高温下可以失活，更有利于灭活菌。本发明提供的工程菌株可以低成本，能更安全的生产MccY，能够通过活菌或灭活菌的方式直接添加，作为良好的治疗细菌性疾病产品。
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公开(公告)号：CN114990035A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210365852.5
申请日：2022-04-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/65 , C12N15/31 , A61K35/742 , A61K8/99 , A61Q19/00 , A23L33/135 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一株枯草芽孢杆菌BS168感受态工程菌株及其应用，该枯草芽孢杆菌BS168‑PxylA‑comK重组菌株在Amye位点中插入有PxylA‑comK基因，且不含有抗性标签。本发明中的枯草芽孢杆菌BS168‑PxylA‑comK重组菌株相比BS168野生菌株具有更强的质粒转化效果，能够兼容各类不同的位点重组，且由于其改造程度低，因此，可作为一种优良工程菌株的原始菌株使用。而且该菌株的改造成本低，具有极高的应用前景。
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公开(公告)号：CN115747126B
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202211015993.0
申请日：2022-08-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生产微菌素J25的枯草芽孢杆菌重组整合工程菌株、构建方法及应用，属于微生物技术、药物和基因工程领域，本发明通过对mcjABCD基因序列和表达原件的优化，使得MccJ25可以在枯草芽孢杆菌中成功表达，并将mcjABCD基因同时整合至枯草芽孢杆菌基因组两个位点中，得到一株可以高效生产MccJ25的枯草芽孢杆菌W25AS2工程菌株，该菌可以在无抗性、无诱导、双位点共表达且无芽孢生成的条件下，对MccJ25具有较高的表达水平，并且表达产物对于肠炎沙门氏菌具有良好的杀菌活性，为MccJ25的生产应用开发了新的应用模式。
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公开(公告)号：CN117625666A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202211020042.2
申请日：2022-08-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种多杀性巴氏杆菌无抗性标记基因整合菌株的构建方法及其应用。本发明将点突变基因pheSm与温度敏感复制子Ts‑ori、卡那霉素抗性基因kan及大肠杆菌ColE1复制子构建得到温度敏感质粒pHYF01；接着通过无痕重组将质粒pHYF01与靶基因hptC的上、下同源臂片段连接构建得到重组质粒pHYF02；然后将重组质粒pHYF02电击转化禽多杀性巴氏杆菌，经卡那霉素筛选获得hptC重组菌株；再利用卡那霉素抗性筛选获得单交换菌株，利用四氯苯丙氨酸抗性筛选得到双交换菌株，即所述多杀性巴氏杆菌无抗性标记基因整合菌株。该整合菌株毒力显著降低，可用于开发禽多杀性巴氏杆菌疫苗。
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