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公开(公告)号：CN115216478B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202210618518.6
申请日：2022-06-01
Applicant: 华南农业大学
Inventor： 陈爱华 , 梁昭平 , 冯赛祥 , 江金飞 , 梁铭治 , 桑运芬 , 周梦若 , 赵一珊 , 孙娟 , 张广文 , 许斯祺 , 谢倩梅 , 代绘琳 , 刘宇彤 , 林敏 , 秦苗苗
Abstract: 本发明公开一种禽多杀性巴氏杆菌内毒素减毒灭活疫苗菌株的构建方法及应用。本发明通过构建表达LpxE基因的重组质粒，进行电击转化到禽多杀性巴氏杆菌中，成功获得内毒素减毒菌株。本发明采用优化后的LpxE基因特异性的去除也野生型菌株上部分类脂A1位上的磷酸基团，成功改造巴氏杆菌；且内毒素致凝活性显著高于野生型菌株，表明脂多糖结构改造后内毒素毒性下降；同时，能使细胞因子IL‑6，TNF‑α和趋化因子CXCL2的含量显著下降，减少MH‑S细胞促炎因子的产生。采用内毒素减毒菌株制备的灭活疫苗与野生型菌株灭活疫苗相比，保护效率更高，安全性也更好，能更好地应用于禽多杀性巴氏杆菌病的防治中。
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公开(公告)号：CN115747126A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211015993.0
申请日：2022-08-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生产微菌素J25的枯草芽孢杆菌重组整合工程菌株、构建方法及应用，属于微生物技术、药物和基因工程领域，本发明通过对mcjABCD基因序列和表达原件的优化，使得MccJ25可以在枯草芽孢杆菌中成功表达，并将mcjABCD基因同时整合至枯草芽孢杆菌基因组两个位点中，得到一株可以高效生产MccJ25的枯草芽孢杆菌W25AS2工程菌株，该菌可以在无抗性、无诱导、双位点共表达且无芽孢生成的条件下，对MccJ25具有较高的表达水平，并且表达产物对于肠炎沙门氏菌具有良好的杀菌活性，为MccJ25的生产应用开发了新的应用模式。
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公开(公告)号：CN118147030A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410321892.9
申请日：2024-03-20
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/117 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种提高禽用CpG产量的方法。本发明提供了一种大豆蛋白胨的应用量范围为16～30g/L，酵母粉的应用量范围为8～20g/L，甘油为8～25g/L的培养基。使用该培养基培养CpG合成工程菌，可以有效提高CpG的产量。此外，通过将溶氧量维持在30％，通过采取指数流法加补料策略进行高密度发酵，以及30℃到42℃的变温培养策略，进一步的提高了CpG的产量，最高能达到853mg/L的最高质粒产量，平均质粒产量达到538mg/L。对比摇瓶培养的质粒产量，本发明的发酵工艺将质粒产量提高了50～100倍。
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公开(公告)号：CN119185524A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411150185.4
申请日：2024-08-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12N1/19 , A61K39/385 , A61P31/16 , A61K39/39 , A61P37/04 , C12R1/84
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域，具体公开了一种免疫原性复合物，包含：含有H7N9禽流感病毒的HA蛋白的抗原和含有载体蛋白的纳米颗粒载体；所述载体蛋白为Ferritin蛋白；所述纳米颗粒载体与所述抗原之间通过SpyCatcher‑SpyTag共价连接。本发明提供的含有H7N9禽流感病毒的HA蛋白和Ferritin蛋白的免疫原性复合物，该免疫原性复合物的抗原特性显著增强，可以诱导更高滴度的中和抗体。将其制备成疫苗，通过免疫验证实验，证明由免疫原性复合物制备得到的疫苗能有效提高抗原蛋白对机体的体液免疫和细胞免疫效果，为防控H7N9亚型高致病性禽流感的流行提供了新的方案。
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公开(公告)号：CN115747126B
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202211015993.0
申请日：2022-08-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生产微菌素J25的枯草芽孢杆菌重组整合工程菌株、构建方法及应用，属于微生物技术、药物和基因工程领域，本发明通过对mcjABCD基因序列和表达原件的优化，使得MccJ25可以在枯草芽孢杆菌中成功表达，并将mcjABCD基因同时整合至枯草芽孢杆菌基因组两个位点中，得到一株可以高效生产MccJ25的枯草芽孢杆菌W25AS2工程菌株，该菌可以在无抗性、无诱导、双位点共表达且无芽孢生成的条件下，对MccJ25具有较高的表达水平，并且表达产物对于肠炎沙门氏菌具有良好的杀菌活性，为MccJ25的生产应用开发了新的应用模式。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114634945B
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202210452692.8
申请日：2022-04-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N1/21 , C07K14/255 , C12N15/31 , A61K38/16 , A61K35/74 , A61P31/04 , A23K20/147 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种MccY重组整合工程菌及其构建方法与应用。该MccY重组整合工程菌的构建方法包括如下步骤：(1)将sgRNA片段(SEQ ID NO.2)与T载体连接，得到pHsgRNA质粒；(2)将pCas9质粒转化大肠杆菌，并制成感受态细胞；然后将优化后的MccY的修复片段(SEQ ID NO.1)和pHsgRNA质粒转入感受态细胞中，经鉴定、培养、连续传代筛选消除双质粒的菌株，得到所述的MccY重组整合工程菌。本发明中构建得到的MccY重组整合工程菌无质粒无抗性基因，无需诱导剂，能够持续高效地分泌表达MccY，对鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、宋内志贺氏菌、痢疾志贺氏菌等有明显的抑制效果。
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公开(公告)号：CN115216478A
公开(公告)日：2022-10-21
申请号：CN202210618518.6
申请日：2022-06-01
Applicant: 华南农业大学
Inventor： 陈爱华 , 梁昭平 , 冯赛祥 , 江金飞 , 梁铭治 , 桑运芬 , 周梦若 , 赵一珊 , 孙娟 , 张广文 , 许斯祺 , 谢倩梅 , 代绘琳 , 刘宇彤 , 林敏 , 秦苗苗
Abstract: 本发明公开一种禽多杀性巴氏杆菌内毒素减毒灭活疫苗菌株的构建方法及应用。本发明通过构建表达LpxE基因的重组质粒，进行电击转化到禽多杀性巴氏杆菌中，成功获得内毒素减毒菌株。本发明采用优化后的LpxE基因特异性的去除也野生型菌株上部分类脂A1位上的磷酸基团，成功改造巴氏杆菌；且内毒素致凝活性显著高于野生型菌株，表明脂多糖结构改造后内毒素毒性下降；同时，能使细胞因子IL‑6，TNF‑α和趋化因子CXCL2的含量显著下降，减少MH‑S细胞促炎因子的产生。采用内毒素减毒菌株制备的灭活疫苗与野生型菌株灭活疫苗相比，保护效率更高，安全性也更好，能更好地应用于禽多杀性巴氏杆菌病的防治中。
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公开(公告)号：CN114645008A
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202210276737.0
申请日：2022-03-21
Applicant: 华南农业大学 , 广东永顺生物制药股份有限公司
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种微菌素J25重组整合工程菌及其构建方法与应用。本发明利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将微菌素J25的全基因重组整合进了大肠杆菌MG1655的基因组中，而非质粒整合，使微菌素J25基因稳定存在于工程菌基因组中，构建得到微菌素J25重组整合工程菌。与现有的表达微菌素J25的重组菌株相比，该微菌素J25重组整合工程菌为基因组定向重组菌，非质粒整合，没有质粒横向转移的风险和危害，无任何标记基因，使用时不会对环境产生污染，无需任何诱导剂的参与，可稳定持续地表达微菌素J25并对沙门氏菌有明显的防控效果。
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公开(公告)号：CN114634945A
公开(公告)日：2022-06-17
申请号：CN202210452692.8
申请日：2022-04-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N1/21 , C07K14/255 , C12N15/31 , A61K38/16 , A61K35/74 , A61P31/04 , A23K20/147 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种MccY重组整合工程菌及其构建方法与应用。该MccY重组整合工程菌的构建方法包括如下步骤：(1)将sgRNA片段(SEQ ID NO.2)与T载体连接，得到pHsgRNA质粒；(2)将pCas9质粒转化大肠杆菌，并制成感受态细胞；然后将优化后的MccY的修复片段(SEQ ID NO.1)和pHsgRNA质粒转入感受态细胞中，经鉴定、培养、连续传代筛选消除双质粒的菌株，得到所述的MccY重组整合工程菌。本发明中构建得到的MccY重组整合工程菌无质粒无抗性基因，无需诱导剂，能够持续高效地分泌表达MccY，对鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、宋内志贺氏菌、痢疾志贺氏菌等有明显的抑制效果。
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公开(公告)号：CN117487832A
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202311404387.2
申请日：2023-10-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种禽用CpG生物合成质粒的构建与佐剂活性检测方法。具体公开了一种禽用CpG生物合成质粒，所述禽用CpG生物合成质粒包括CpG基序和Kan抗性基因。本发明构建和纯化得到一种含CpG基序的质粒，其单独使用或与其他佐剂联合使用可以有效增强抗原免疫原性。
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