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公开(公告)号：CN103421732B
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201310039113.8
申请日：2013-01-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , A61K39/116 , A61K39/112 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/42 , C12R1/21
Abstract: 发明名称：表达副猪嗜血杆菌表面抗原的猪霍乱沙门氏菌减毒疫苗本发明属于动物细菌性疾病基因工程疫苗领域，具体涉及一种无抗性标记表达副猪嗜血杆菌表面抗原基因HbpB的重组猪霍乱沙门氏菌减毒疫苗株的构建、疫苗制备及应用。获得一株无抗性标记的表达副猪嗜血杆菌表面抗原HbpB的重组猪霍乱沙门氏菌asd-C500/pYA-HbpB(保藏号为CCTCC NO：M2013052)。该重组菌缺失了猪霍乱沙门氏菌基因组上的asd基因，含有能在该菌株中表达asd基因和副猪嗜血杆菌外膜抗原HbpB基因的重组质粒pYA-HbpB。还公开了重组菌株asd-C500/pYA-HbpB的构建方法与相应弱毒疫苗的制备方法，及在制备猪霍乱沙门氏菌-副猪嗜血杆菌疫苗中的应用。
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公开(公告)号：CN103421731A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310039080.7
申请日：2013-01-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/63 , C12N15/31 , A61K39/116 , A61K39/112 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明属于动物细菌性疾病基因工程疫苗技术领域，具体涉及一种无抗性标记表达副猪嗜血杆菌表面抗原基因hps06257的重组副猪嗜血杆菌减毒沙门氏菌苗的菌株构建、疫苗制备及应用。获得一株无抗性标记的表达副猪嗜血杆菌表面抗原HPS06257的重组猪霍乱沙门氏菌asd- C500/pYA-06257(保藏号为CCTCC NO：M2013054)。该重组菌缺失了猪霍乱沙门氏菌基因组上的asd基因，含有能在该菌株中表达asd基因和副猪嗜血杆菌外膜抗原HPS06257基因的重组质粒pYA-06257。还公开了重组菌株asd- C500/pYA-06257的构建方法与相应副猪嗜血杆菌减毒沙门氏菌苗的制备方法，以及在制备副猪嗜血杆菌减毒沙门氏菌苗中的应用。
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公开(公告)号：CN103421733B
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201310040712.1
申请日：2013-01-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/63 , C12N15/31 , A61K39/116 , A61K39/112 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明属于动物细菌性疾病基因工程疫苗技术领域，具体涉及一种无抗性标记表达副猪嗜血杆菌表面抗原基因HbpB的重组猪霍乱沙门氏菌减毒疫苗的菌株构建、疫苗制备以及应用。获得一株无抗性标记的表达副猪嗜血杆菌表面抗原PalA的猪霍乱沙门氏菌asd-C500/pYA-PalA(保藏号为CCTCC NO：M2013053)。该重组菌缺失了猪霍乱沙门氏菌基因组上的asd基因，含有能在该菌株中表达asd基因和副猪嗜血杆菌外膜抗原PalA基因的重组质粒pYA-PalA。还公开了猪霍乱沙门氏菌asd-C500/pYA-PalA的构建方法与相应弱毒疫苗的制备方法，及在制备猪霍乱沙门氏菌-副猪嗜血杆菌疫苗中的应用。
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公开(公告)号：CN103421731B
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201310039080.7
申请日：2013-01-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/63 , C12N15/31 , A61K39/116 , A61K39/112 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明属于动物细菌性疾病基因工程疫苗技术领域，具体涉及一种无抗性标记表达副猪嗜血杆菌表面抗原基因hps06257的重组副猪嗜血杆菌减毒沙门氏菌苗的菌株构建、疫苗制备及应用。获得一株无抗性标记的表达副猪嗜血杆菌表面抗原HPS06257的重组猪霍乱沙门氏菌asd- C500/pYA-06257(保藏号为CCTCC NO：M2013054)。该重组菌缺失了猪霍乱沙门氏菌基因组上的asd基因，含有能在该菌株中表达asd基因和副猪嗜血杆菌外膜抗原HPS06257基因的重组质粒pYA-06257。还公开了重组菌株asd- C500/pYA-06257的构建方法与相应副猪嗜血杆菌减毒沙门氏菌苗的制备方法，以及在制备副猪嗜血杆菌减毒沙门氏菌苗中的应用。
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公开(公告)号：CN104560888A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201310496992.7
申请日：2013-10-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种H9N2亚型禽流感病毒的大规模培养方法，本方法中H9N2病毒在MDCK适应快速，适应后病毒HA效价为28；以7.5L反应器为种细胞罐，cytodex1为载体培养MDCK细胞为种子细胞，放大到40L固定床篮式搅拌系统反应器的大规模培养，收获血凝效价（HA）可以达到210H9N2病毒80L。本方法生产的病毒效价高、产量大，方法易于标准化，适用于所有的H9亚型流感病毒，解决了目前H9N2禽流感病毒在MDCK细胞上培养病毒滴度不能满足疫苗生产的难题。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102732487B
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201210193365.1
申请日：2012-06-13
Applicant: 武汉科前动物生物制品有限责任公司 , 华中农业大学 , 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明一种生物反应器大规模培养的方法，其步骤：（1）重组H5N1禽流感病毒在MDCK细胞上适应；（2）病毒株作为反应器大规模培养病毒种子批制备，种子批病毒代次≥F6；血凝效价≥28；EID50≥107.5；（3）以聚酯片为载体培养MDCK细胞，以聚酯片为载体，反应器为篮式固定床，每克载体投放细胞；培养基为新生牛血清DMEM；（4）培养的MDCK细胞接种病毒，病毒稀释液清洗细胞，病毒接种；吸附后更换细胞维持液；（5）MDCK细胞维持和病毒增殖，搅拌，更换细胞维持液；（6）监测血凝效价收获病毒，收获反应器培养体积病毒液。方法易行，操作简便，适应后病毒HA效价>27，解决了目前重组H5亚型禽流感病毒在MDCK细胞上培养病毒滴度不能满足疫苗生产的难题。
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公开(公告)号：CN102732487A
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201210193365.1
申请日：2012-06-13
Applicant: 武汉科前动物生物制品有限责任公司 , 华中农业大学 , 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明一种生物反应器大规模培养的方法,其步骤:（1）重组H5N1禽流感病毒在MDCK细胞上适应；（2）病毒株作为反应器大规模培养病毒种子批制备，种子批病毒代次≥F6；血凝效价≥28；EID50≥107.5；（3）以聚酯片为载体培养MDCK细胞，以聚酯片为载体，反应器为篮式固定床，每克载体投放细胞；培养基为新生牛血清DMEM；（4）培养的MDCK细胞接种病毒，病毒稀释液清洗细胞，病毒接种；吸附后更换细胞维持液；（5）MDCK细胞维持和病毒增殖，搅拌，更换细胞维持液；（6）监测血凝效价收获病毒，收获反应器培养体积病毒液。方法易行，操作简便，适应后病毒HA效价>27，解决了目前重组H5亚型禽流感病毒在MDCK细胞上培养病毒滴度不能满足疫苗生产的难题。
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公开(公告)号：CN102864157B
公开(公告)日：2014-03-05
申请号：CN201110197503.9
申请日：2011-07-05
Applicant: 华中农业大学 , 武汉科前动物生物制品有限责任公司
IPC: C12N15/31 , C12N1/21 , C12N15/63 , C07K14/285 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于动物传染病亚单位疫苗制备技术领域，具体涉及一种副猪嗜血杆菌保护性抗原的制备及应用。本发明克隆了一种副猪嗜血杆菌外膜蛋白Hbp B基因，其核苷酸序列如SEQID NO：1所示，该基因编码的序列如SEQ ID NO：2所示。构建了一种重组大肠杆菌(Escherichia coli) BL21/pET-28a-Hbp B(保藏号为CCTCC NO：M 2011228)，它包含序列表SEQID NO：1所述的基因。申请人还得到一种副猪嗜血杆菌的抗原蛋白：它是由SEQ ID NO：1所述的基因转化大肠杆菌所表达的。本发明还公开了该重组大肠杆菌的制备方法与应用。本发明制备的副猪嗜血杆菌亚单位疫苗具有良好的安全性，其免疫保护效果达到83％。
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公开(公告)号：CN103421733A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310040712.1
申请日：2013-01-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/63 , C12N15/31 , A61K39/116 , A61K39/112 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明属于动物细菌性疾病基因工程疫苗技术领域，具体涉及一种无抗性标记表达副猪嗜血杆菌表面抗原基因HbpB的重组猪霍乱沙门氏菌减毒疫苗的菌株构建、疫苗制备以及应用。获得一株无抗性标记的表达副猪嗜血杆菌表面抗原PalA的猪霍乱沙门氏菌asd-C500/pYA-PalA(保藏号为CCTCC NO：M2013053)。该重组菌缺失了猪霍乱沙门氏菌基因组上的asd基因，含有能在该菌株中表达asd基因和副猪嗜血杆菌外膜抗原PalA基因的重组质粒pYA-PalA。还公开了猪霍乱沙门氏菌asd-C500/pYA-PalA的构建方法与相应弱毒疫苗的制备方法，及在制备猪霍乱沙门氏菌-副猪嗜血杆菌疫苗中的应用。
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公开(公告)号：CN103421732A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310039113.8
申请日：2013-01-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , A61K39/116 , A61K39/112 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/42 , C12R1/21
Abstract: 本发明属于动物细菌性疾病基因工程疫苗领域，具体涉及一种无抗性标记表达副猪嗜血杆菌表面抗原基因HbpB的重组猪霍乱沙门氏菌减毒疫苗株的构建、疫苗制备及应用。获得一株无抗性标记的表达副猪嗜血杆菌表面抗原HbpB的重组猪霍乱沙门氏菌asd-C500/pYA-HbpB(保藏号为CCTCC NO：M2013052)。该重组菌缺失了猪霍乱沙门氏菌基因组上的asd基因，含有能在该菌株中表达asd基因和副猪嗜血杆菌外膜抗原HbpB基因的重组质粒pYA-HbpB。还公开了重组菌株asd-C500/pYA-HbpB的构建方法与相应弱毒疫苗的制备方法，及在制备猪霍乱沙门氏菌-副猪嗜血杆菌疫苗中的应用。
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