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公开(公告)号:CN118581113A
公开(公告)日:2024-09-03
申请号:CN202410767292.5
申请日:2024-06-14
Applicant: 兰州大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明涉及生物领域,特别是涉及一种牛种布鲁氏菌arsR2基因缺失菌株构建方法及其应用。本发明提出了一个与布鲁氏菌毒力相关的arsR2基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。实验证明arsR2基因缺失不影响布鲁氏菌的生长。与亲本株和回补株相比,布鲁氏菌株ΔarsR2在RAW264.7细胞中存在极显著减少现象。感染小鼠3周后,布鲁氏菌株ΔarsR2感染小鼠脾重与亲本株和回补株相比呈现显著降低的趋势。本发明还提供一株减毒的布鲁氏菌ΔarsR2,能够用于制备布鲁氏菌减毒活疫苗。本发明为布鲁氏菌新疫苗的研发提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN119823239A
公开(公告)日:2025-04-15
申请号:CN202510026325.5
申请日:2025-01-08
Applicant: 兰州大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种新型抗菌肽CR24的筛选合成及其抗菌应用。发明所筛选的新型抗菌肽CR24挖掘于绵羊肠道共生菌海内氏芽孢杆菌B1(Bacillus haynesii strain B1)全基因组,并通过人工合成得到。实验表明,本发明所述的抗菌肽CR24为一种新型抗菌肽,含有极低的细胞毒性和溶血活性,不产生耐药性,安全性优异。抗菌肽CR24对多种病原菌具有广谱抗菌活性,可通过损伤金葡菌细胞膜发挥杀菌活性,体内应用可促进金葡菌感染导致的皮肤伤口愈合。总之,本发明提供的抗菌肽CR24是一种分子量小、易于人工合成、抗菌活性强、安全无毒的新型抗菌肽,可用于制备饲料添加剂、抗感染药物和食品保鲜剂等,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN119955653A
公开(公告)日:2025-05-09
申请号:CN202510025453.8
申请日:2025-01-08
Applicant: 兰州大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开一株海内氏芽孢杆菌及其抗菌和免疫调节中的应用。发明所提供的海内氏芽孢杆菌B1分离于健康绵羊的肠道粪便中。该菌株为海内氏芽孢杆菌的一个新菌株,命名为海内氏芽孢杆菌B1(Bacillus haynesii strain B1),保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏号为:CCTCC M20242179。本发明筛选到的海内氏芽孢杆菌B1,生长良好,具有较强自聚集能力和表面疏水性,对绝大部分抗生素敏感,可产生广谱抗菌物质,此外还具有免疫调节能力,具有一定的安全性和广阔的应用前景,为开发新型饲料添加剂和抗菌药物提供了一种潜在的优良菌种资源。
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公开(公告)号:CN119662505A
公开(公告)日:2025-03-21
申请号:CN202411878199.8
申请日:2024-12-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , C12N15/31 , C07K14/195 , A61K39/102 , A61K39/39 , A61P31/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了一种无抗性标记的猪霍乱沙门氏菌三基因缺失株(保藏号为CCTCC M 20242059)。该菌株先后缺失了毒力调节基因crp、介导二氨基庚二酸(DAP)合成的重要营养代谢基因asd、介导编码甘露糖‑6‑磷酸异构酶的重要碳代谢基因manA。本发明采用自杀载体以及SacB反向遗传构建猪霍乱沙门氏菌基因缺失突变株,得到无抗性的三基因缺失突变株。该三基因缺失突变株遗传背景清晰、无抗性标记,对小鼠的安全性和免疫保护性较好,能够帮助小鼠抵抗高致死剂量的猪霍乱沙门氏菌的攻击,由于缺失株中asd基因完全无痕缺失,将平衡致死系统质粒pya3493‑ApxIAN电转进入,重组菌株不仅能在无DAP的培养基中生长,还能够稳定表达外源蛋白ApxIAN,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN119552903A
公开(公告)日:2025-03-04
申请号:CN202411487655.6
申请日:2024-10-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于但不限于基因工程技术技术领域,公开了一种布鲁氏菌效应蛋白BspE基因缺失株的构建方法及应用,利用同源重组及SacB反向筛选技术构建BspE基因缺失株,以牛种布鲁氏菌A19疫苗株菌液为模板,PCR扩增得到BspE基因上、下游同源臂,将胶回收的BspE基因上、下游同源臂进行融合PCR扩增,将获得的融合片段与pUC19‑SacB质粒进行连接、转化,获得重组质粒pUC19‑ΔBspE。将该质粒电转化至牛种布鲁氏菌A19感受态细胞,经卡那抗性及蔗糖压力筛选,PCR鉴定及测序,所得阳性转化子即为牛种布鲁氏菌BspE缺失株,该缺失疫苗毒株提高了抗菌细胞因子及特异性布鲁氏菌抗体IgG的水平,是一种新型的布鲁氏菌候选减毒疫苗毒株,具有较好的市场前景。
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公开(公告)号:CN119700948A
公开(公告)日:2025-03-28
申请号:CN202411618287.4
申请日:2024-11-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于医药技术领域,尤其涉及一种新型结核病亚单位疫苗及其制备方法和应用,包括:S1,牛分枝杆菌减毒株的培养;S2,牛分枝杆菌减毒株细胞壁的提取;S3,牛分枝杆菌减毒株细胞壁的鉴定;S4,细胞壁和锰佐剂亚单位疫苗的制备;S5,亚单位疫苗滴鼻免疫小鼠;S6,小鼠攻毒保护实验。本发明通过提取牛分枝杆菌减毒株的细胞壁成分,并以其为抗原,与锰佐剂(MnJ(α)和MnJ(β))组合制备了两种新型结核病亚单位疫苗命名为CW‑MnJ(α)和CW‑MnJ(β)。小鼠免疫保护实验证明,小鼠滴鼻免疫CW‑MnJ(α)和CW‑MnJ(β)可显著减少肺脏和脾脏细菌载量,并且,免疫CW‑MnJ(α)的小鼠脾脏细菌载量与阳性对照组(BCG免疫组)相比显著减少,这表明本发明制备的CW‑MnJ(α)和CW‑MnJ(β)两种亚单位疫苗具有非常好的免疫保护效果。
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公开(公告)号:CN119552991A
公开(公告)日:2025-03-04
申请号:CN202411928515.8
申请日:2024-12-25
Applicant: 新疆农业大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种用于检测猪呼吸道疾病的多重PCR检测引物组合及试剂盒,涉及生物检测技术领域。所述多重PCR检测引物组合能够同时检测猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、猪链球菌3种猪呼吸道主要致病细菌,且对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、奇异变形杆菌、副猪嗜血杆菌基因组的扩增结果为阴性,具有较高的特异性。同时对猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、猪链球菌的最低检量仅为10pg/μL,敏感性佳。因此,本申请多重PCR检测引物组合具有经济快捷、高效、特异性强、敏感性好的特点,可用于快速检测猪呼吸道主要致病菌。
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公开(公告)号:CN119432770A
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202510003341.2
申请日:2025-01-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种特异性结合产气荚膜梭菌(C.p)β2毒素重组蛋白的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及应用。本发明提供了特异性结合β2毒素蛋白的单克隆抗体和分泌这种单克隆抗体的保藏编号为CCTCC NO:C2024312的杂交瘤细胞株CPB2‑2A4,单克隆抗体仅与C.p β2毒素蛋白发生反应,而不与其他感染牛羊的病原体发生交叉反应,具有极高的特异性;试剂盒利用竞争ELISA技术,以与C.p β2毒素重组蛋白特异性结合的鼠单克隆抗体作为竞争抗体,可检测多种动物来源血清中C.p β2毒素抗体,避免了样本来源的种属限制。另外,试剂盒重复性良好。试剂盒操作时技术要求比较宽松,可在生产中广泛推广使用,应用于C.p流行病学调查和疫苗免疫水平监测。
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公开(公告)号:CN119876040A
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202510065662.5
申请日:2025-01-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , C07K14/23 , C07K1/22 , C12N15/70 , C12N15/31 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于细胞工程技术领域,公开了一种新的特异性结合Bp26重组蛋白的优势单克隆抗体及应用,表位的序列为ASPDMAILNL,为布鲁氏菌Bp26蛋白的最优势表位,针对其分泌特异性结合Bp26重组蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株6E8于2025年1月7日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C202543。针对布鲁氏菌Bp26重组蛋白的单克隆抗体能与Bp26蛋白特异性结合,具有较好的阻断效果。检测布鲁氏菌血清抗体的阻断ELISA方法以Bp26重组蛋白为抗原、特异性结合布鲁氏菌重组蛋白的单克隆抗体为检测抗体建立而成。本发明的阻断ELISA抗体检测方法比用于检测布鲁氏菌血清抗体的间接血凝试剂盒具有更高的特异性和敏感性。
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公开(公告)号:CN120005012A
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202510108031.7
申请日:2025-01-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/12 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供特异性结合布鲁氏菌LPS的单克隆抗体,所述单克隆抗体具有3个轻链互补决定区以及3个重链互补决定区;所述轻链互补决定区的氨基酸序列分别为:序列表SEQ ID NO.1中第24位至40位氨基酸,序列表SEQ ID NO.1中第56位至62位氨基酸,序列表SEQ ID NO.1中第95位至102位氨基酸;所述重链互补决定区的氨基酸序列分别为:序列表SEQ ID NO.3中第31位至37位氨基酸,序列表SEQ ID NO.3中第52位至67位氨基酸,序列表SEQ ID NO.3中第100位至113位氨基酸。本发明还公开了其制备方法及其在定量检测布鲁氏菌LPS抗体水平中的应用。
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