公开(公告)号：CN119662505A

公开(公告)日：2025-03-21

申请号：CN202411878199.8

申请日：2024-12-19

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 付磊 ,  储岳峰 ,  韩瑞 ,  尤留超 ,  陶政宇

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C12N15/31 ,  C07K14/195 ,  A61K39/102 ,  A61K39/39 ,  A61P31/04 ,  C12R1/42

Abstract: 本发明公开了一种无抗性标记的猪霍乱沙门氏菌三基因缺失株(保藏号为CCTCC M 20242059)。该菌株先后缺失了毒力调节基因crp、介导二氨基庚二酸(DAP)合成的重要营养代谢基因asd、介导编码甘露糖‑6‑磷酸异构酶的重要碳代谢基因manA。本发明采用自杀载体以及SacB反向遗传构建猪霍乱沙门氏菌基因缺失突变株，得到无抗性的三基因缺失突变株。该三基因缺失突变株遗传背景清晰、无抗性标记，对小鼠的安全性和免疫保护性较好，能够帮助小鼠抵抗高致死剂量的猪霍乱沙门氏菌的攻击，由于缺失株中asd基因完全无痕缺失，将平衡致死系统质粒pya3493‑ApxIAN电转进入，重组菌株不仅能在无DAP的培养基中生长，还能够稳定表达外源蛋白ApxIAN，具有广阔的应用前景。