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公开(公告)号：CN118064400A
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202410469408.7
申请日：2024-04-18
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 , 济南国科医工科技发展有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的S选择性ω‑转氨酶突变体及其构建方法和应用，该S选择性ω‑转氨酶突变体是通过将如SEQ ID NO.1所示的野生型ω‑转氨酶TbTA氨基酸序列的第263位异亮氨酸突变为丙氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或组氨酸得到的。本发明获得的突变体TbTA‑I263A、TbTA‑I263G催化苯乙酮的酶活相较于野生型提升67.83倍和61.26倍，热稳定性与野生型接近或更好；突变体TbTA‑I263C、TbTA‑I263M、TbTA‑I263V、TbTA‑I263F和TbTA‑I263H酶活分别提升11.85倍、8.76倍、3.56倍、3.49倍和2.55倍。
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公开(公告)号：CN118726295A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202410723933.7
申请日：2024-06-05
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的ω‑转氨酶突变体、其构建方法及应用，该ω‑转氨酶突变体是通过将野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列按如下任意一种突变方式得到的：第263位异亮氨酸突变为丙氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为异亮氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为亮氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为甲硫氨酸。本发明公开的转氨酶突变体催化合成(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺的转化率高、立体选择性高、反应条件温和、工艺简单、绿色环保，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN118460498A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410933065.5
申请日：2024-07-12
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 , 济南国科医工科技发展有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高活性耐热转氨酶突变体及其编码基因、构建方法和应用，该高活性耐热转氨酶突变体是通过将如SEQ ID NO.1所示的野生型转氨酶MhTA氨基酸序列的第61位色氨酸突变为丙氨酸、半胱氨酸、甘氨酸或缬氨酸得到的。本发明获得的5种突变体（W61A、W61C、W61G和W61V）催化前手性酮的活性显著高于突变前的野生型（简称WT），具体表现为：W61A、W61C、W61G和W61V突变体催化5‑甲氧基‑2‑萘满酮的活性分别是野生型的43.03、192.1、25.87和77.48倍。从催化活性提升效果可以看出，本发明公开的转氨酶突变体具有催化合成罗替戈汀手性中间体的应用潜力。
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公开(公告)号：CN117106855A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202311382378.8
申请日：2023-10-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/48
Abstract: 本发明公开了一种测定Taq DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Taq DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后测定dATP的消耗量，再根据预先构建的表征Taq DNA聚合酶的绝对活性与dATP消耗量之间关系的标准曲线f1计算得到Taq DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点，可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118460498B
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202410933065.5
申请日：2024-07-12
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 , 济南国科医工科技发展有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高活性耐热转氨酶突变体及其编码基因、构建方法和应用，该高活性耐热转氨酶突变体是通过将如SEQ ID NO.1所示的野生型转氨酶MhTA氨基酸序列的第61位色氨酸突变为丙氨酸、半胱氨酸、甘氨酸或缬氨酸得到的。本发明获得的5种突变体（W61A、W61C、W61G和W61V）催化前手性酮的活性显著高于突变前的野生型（简称WT），具体表现为：W61A、W61C、W61G和W61V突变体催化5‑甲氧基‑2‑萘满酮的活性分别是野生型的43.03、192.1、25.87和77.48倍。从催化活性提升效果可以看出，本发明公开的转氨酶突变体具有催化合成罗替戈汀手性中间体的应用潜力。
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公开(公告)号：CN118064400B
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410469408.7
申请日：2024-04-18
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 , 济南国科医工科技发展有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的S选择性ω‑转氨酶突变体及其构建方法和应用，该S选择性ω‑转氨酶突变体是通过将如SEQ ID NO.1所示的野生型ω‑转氨酶TbTA氨基酸序列的第263位异亮氨酸突变为丙氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或组氨酸得到的。本发明获得的突变体TbTA‑I263A、TbTA‑I263G催化苯乙酮的酶活相较于野生型提升67.83倍和61.26倍，热稳定性与野生型接近或更好；突变体TbTA‑I263C、TbTA‑I263M、TbTA‑I263V、TbTA‑I263F和TbTA‑I263H酶活分别提升11.85倍、8.76倍、3.56倍、3.49倍和2.55倍。
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公开(公告)号：CN117106855B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311382378.8
申请日：2023-10-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/48
Abstract: 本发明公开了一种测定Taq DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Taq DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后测定dATP的消耗量，再根据预先构建的表征Taq DNA聚合酶的绝对活性与dATP消耗量之间关系的标准曲线f1计算得到Taq DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点，可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。
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公开(公告)号：CN119193763A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411334801.1
申请日：2024-09-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种测定Bst DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Bst DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dATP的消耗量，再通过预先构建的表征Bst DNA聚合酶浓度与dATP消耗量之间关系的标准曲线f2计算得到Bst DNA聚合酶浓度，最后根据Bst DNA聚合酶的绝对活性定义计算得到待测Bst DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有测定Bst DNA聚合酶聚合活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点。
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公开(公告)号：CN118620860A
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410723929.0
申请日：2024-06-05
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在不对称合成普拉替尼药物中间体中的应用，该ω‑转氨酶突变体由野生型ω‑转氨酶通过以下任意一种突变方式得到的：第62位色氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为异亮氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为亮氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为甲硫氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸。本发明公开的转氨酶突变体催化合成(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺的转化率高、立体选择性高，具有实现(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺绿色合成路线工业化的应用前景。
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