公开(公告)号：CN119193763A

公开(公告)日：2024-12-27

申请号：CN202411334801.1

申请日：2024-09-24

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 马富强 ,  王学峰 ,  李长龙 ,  陆泽林 ,  桂萍 ,  陆峰 ,  李晓 ,  景伟

IPC: C12Q1/48 ,  C12Q1/66

Abstract: 本发明公开了一种测定Bst DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Bst DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dATP的消耗量，再通过预先构建的表征Bst DNA聚合酶浓度与dATP消耗量之间关系的标准曲线f2计算得到Bst DNA聚合酶浓度，最后根据Bst DNA聚合酶的绝对活性定义计算得到待测Bst DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有测定Bst DNA聚合酶聚合活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点。

公开(公告)号：CN117821560A

公开(公告)日：2024-04-05

申请号：CN202410037274.1

申请日：2024-01-10

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 王学峰 ,  景伟 ,  江晶洁 ,  桂萍 ,  李晓 ,  李长龙 ,  郭振 ,  李金泽 ,  周连群 ,  马富强

IPC: C12Q1/48 ,  C12Q1/66

Abstract: 本发明公开了一种测定Phi29DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：采用环状双链DNA为模板，在含有扩增引物和dNTPs的反应体系中，以待测Phi29DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dNTPs中的dATP的剩余量，再根据Phi29DNA聚合酶的绝对活性定义，利用公式计算得到Phi29DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有同时测定Phi29DNA聚合酶聚合活性与链置换活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点，可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。