一种突变体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN114990082A

    公开(公告)日:2022-09-02

    申请号:CN202210738890.0

    申请日:2020-12-30

    Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1上发生下列位点的突变:Q332K;Q332K、G34D;Q332K、S38R;Q332K、Y128R;Q332K、G34D、S38R;Q332K、G34D、Y128R;Q332K、S38R、Y128R;Q332K、G34D、S38R、Y128R。本发明提供的精氨酸氧化酶突变体与野生型精氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的精氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑精氨酸时,仍然表现出优良的催化活性,在L‑精氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。

    一种突变体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN112626044B

    公开(公告)日:2022-08-19

    申请号:CN202011624067.4

    申请日:2020-12-30

    Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为如下(a)或(b):(a)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列的一个氨基酸,且与该序列具有90%以上同源性;或(b)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列的一个氨基酸,且与该序列具有相同的功能。本发明提供的精氨酸氧化酶突变体与野生型精氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的精氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑精氨酸时,仍然表现出优良的的催化活性,在L‑精氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。

    测定Phi29 DNA聚合酶绝对活性的方法

    公开(公告)号:CN117821560A

    公开(公告)日:2024-04-05

    申请号:CN202410037274.1

    申请日:2024-01-10

    Abstract: 本发明公开了一种测定Phi29DNA聚合酶绝对活性的方法,该方法为:采用环状双链DNA为模板,在含有扩增引物和dNTPs的反应体系中,以待测Phi29DNA聚合酶引发延伸复制反应,消耗反应体系中的dNTPs;然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dNTPs中的dATP的剩余量,再根据Phi29DNA聚合酶的绝对活性定义,利用公式计算得到Phi29DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染,具有同时测定Phi29DNA聚合酶聚合活性与链置换活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点,可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。

    邻苯二酚双加氧酶突变体、重组载体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114480311A

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202111180302.8

    申请日:2021-10-11

    Abstract: 本发明公开了一种邻苯二酚双加氧酶突变体、重组载体及其制备方法和应用,该突变型邻苯二酚双加氧酶为如下(a1)或(a2):(a1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有相同功能的多肽;(a2)与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90%同源性的多肽。本发明的突变型邻苯二酚双加氧酶包括单点突变体和组合突变体,与野生型邻苯二酚双加氧酶相比,其单点突变体和组合突变体在40℃下半衰期均更长;尤其是组合突变体,其半衰期大约是野生型的3倍,表现出单点突变体热稳定性的叠加效果。

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