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公开(公告)号:CN119639711A
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202311196220.1
申请日:2023-09-15
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体提供了热稳定性提高的逆转录酶UCRT vL突变体,该逆转录酶UCRT vL突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体,与野生型逆转录酶UCRT vL相比,突变体在65℃下半衰期更长;三突变体效果更好,其半衰期大约是野生型逆转录酶UCRT的3倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的逆转录酶UCRT vL突变体热稳定性更好,在较高温度下用于RNA逆转录为cDNA时,表现出较高的热稳定性,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN119639710A
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202311195991.9
申请日:2023-09-15
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体提供了热稳定性提高的UCRT VI耐热型逆转录酶突变体,这种突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体,与野生型UCRT VI耐热型逆转录酶相比,突变体在65℃下半衰期更长;双突变体效果更好,其半衰期大约是野生型DNA聚合酶的3倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的UCRT耐热型逆转录酶突变体热稳定性更好,在较高温度下逆转录合成DNA时,表现出较高的热稳定性,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN114990082A
公开(公告)日:2022-09-02
申请号:CN202210738890.0
申请日:2020-12-30
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1上发生下列位点的突变:Q332K;Q332K、G34D;Q332K、S38R;Q332K、Y128R;Q332K、G34D、S38R;Q332K、G34D、Y128R;Q332K、S38R、Y128R;Q332K、G34D、S38R、Y128R。本发明提供的精氨酸氧化酶突变体与野生型精氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的精氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑精氨酸时,仍然表现出优良的催化活性,在L‑精氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。
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公开(公告)号:CN112626044B
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202011624067.4
申请日:2020-12-30
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为如下(a)或(b):(a)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列的一个氨基酸,且与该序列具有90%以上同源性;或(b)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列的一个氨基酸,且与该序列具有相同的功能。本发明提供的精氨酸氧化酶突变体与野生型精氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的精氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑精氨酸时,仍然表现出优良的的催化活性,在L‑精氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。
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公开(公告)号:CN112359032A
公开(公告)日:2021-02-12
申请号:CN202011250781.1
申请日:2020-11-11
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明涉及一种突变型酯酶及其应用、重组载体及其制备方法和应用、重组工程菌及其应用。该突变型酯酶包括:(a)、由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的多肽;或(b)、与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90%同源性的多肽。上述突变型酯酶的热稳定性较好。
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公开(公告)号:CN114480342B
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202111180303.2
申请日:2021-10-11
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种突变型PET水解酶、重组载体、重组工程菌及其应用,突变型PET水解酶为如下(a1)或(a2):(a1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有相同功能的多肽;(a2)与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90%同源性的多肽。本发明的突变型PET水解酶包括单点突变体和组合突变体,与野生型PET水解酶相比,其单点突变体和组合突变体在60℃下半衰期均更长;尤其是组合突变体,其半衰期大约是野生型的2倍,表现出单点突变体热稳定性的叠加效果。
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公开(公告)号:CN117821560A
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202410037274.1
申请日:2024-01-10
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种测定Phi29DNA聚合酶绝对活性的方法,该方法为:采用环状双链DNA为模板,在含有扩增引物和dNTPs的反应体系中,以待测Phi29DNA聚合酶引发延伸复制反应,消耗反应体系中的dNTPs;然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dNTPs中的dATP的剩余量,再根据Phi29DNA聚合酶的绝对活性定义,利用公式计算得到Phi29DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染,具有同时测定Phi29DNA聚合酶聚合活性与链置换活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点,可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。
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公开(公告)号:CN114480311A
公开(公告)日:2022-05-13
申请号:CN202111180302.8
申请日:2021-10-11
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种邻苯二酚双加氧酶突变体、重组载体及其制备方法和应用,该突变型邻苯二酚双加氧酶为如下(a1)或(a2):(a1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有相同功能的多肽;(a2)与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90%同源性的多肽。本发明的突变型邻苯二酚双加氧酶包括单点突变体和组合突变体,与野生型邻苯二酚双加氧酶相比,其单点突变体和组合突变体在40℃下半衰期均更长;尤其是组合突变体,其半衰期大约是野生型的3倍,表现出单点突变体热稳定性的叠加效果。
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公开(公告)号:CN113249349A
公开(公告)日:2021-08-13
申请号:CN202110690363.2
申请日:2021-06-22
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种突变型醇脱氢酶、重组载体及其制备方法和应用,所述突变型醇脱氢酶是在SEQ ID No.2所示的氨基酸序列上进行突变,突变位点选自T105N、G137S、A165E、S180D中的一种或一种以上的组合。本发明的突变型醇脱氢酶包括单点突变体和组合突变体,与野生型醇脱氢酶相比,本发明的单点突变体和组合突变体的酶活力均得到了提高;尤其是组合突变体,其活性提高了6倍,表现出单点突变体叠加效果;本发明的突变型醇脱氢酶具有优良的催化活性,能够用于催化醛/酮化合物还原,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN120005845A
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202510481713.2
申请日:2025-04-17
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的辣根过氧化物酶突变体其构建方法及应用,该辣根过氧化物酶突变体通过将如SEQ ID NO.1所示的野生型辣根过氧化物酶氨基酸序列的第40位组氨酸突变为色氨酸得到。本发明通过定点突变技术将来源于辣根植物的辣根过氧化物酶(PDB:1HCH)氨基酸序列的第40位组氨酸突变为色氨酸,获得的突变体(H40W)催化过氧化氢和ADHP生成试卤灵的活性显著高于野生型,可以看出,本发明公开的辣根过氧化物酶催化ADHP活性高,具有较大的应用潜力。
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