公开(公告)号：CN119639709A

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202311195956.7

申请日：2023-09-15

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 马富强 ,  陈骁 ,  陆泽林 ,  江晶洁 ,  桂萍 ,  王学峰 ,  罗成坤 ,  唐玉国

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体提供了热稳定性提高的逆转录酶UCRT v6突变体，该逆转录酶UCRT v6突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体，与野生型逆转录酶UCRT v6相比，突变体在65℃下半衰期更长；三突变体效果更好，其半衰期大约是野生型逆转录酶UCRT v6的5倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的逆转录酶UCRT v6突变体热稳定性更好，在较高温度下用于RNA逆转录为cDNA时，表现出较高的热稳定性，具有较大的应用潜力。

公开(公告)号：CN117106855A

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202311382378.8

申请日：2023-10-24

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 王学峰 ,  景伟 ,  马富强 ,  江晶洁 ,  桂萍 ,  李晓 ,  陆泽林 ,  罗成坤 ,  陆峰

IPC: C12Q1/48

Abstract: 本发明公开了一种测定Taq DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Taq DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后测定dATP的消耗量，再根据预先构建的表征Taq DNA聚合酶的绝对活性与dATP消耗量之间关系的标准曲线f1计算得到Taq DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点，可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。

公开(公告)号：CN119639710A

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202311195991.9

申请日：2023-09-15

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 马富强 ,  景伟 ,  王学峰 ,  江晶洁 ,  桂萍 ,  罗成坤 ,  陆泽林

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体提供了热稳定性提高的UCRT VI耐热型逆转录酶突变体，这种突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体，与野生型UCRT VI耐热型逆转录酶相比，突变体在65℃下半衰期更长；双突变体效果更好，其半衰期大约是野生型DNA聚合酶的3倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的UCRT耐热型逆转录酶突变体热稳定性更好，在较高温度下逆转录合成DNA时，表现出较高的热稳定性，具有较大的应用潜力。

公开(公告)号：CN119639713A

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202311196639.7

申请日：2023-09-15

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 陆泽林 ,  马富强 ,  王学峰 ,  桂萍 ,  江晶洁 ,  罗成坤 ,  李晓

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体提供了热稳定性提高的逆转录酶UCRT vZ突变体，逆转录酶UCRT vZ突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体，与野生型逆转录酶UCRT vZ相比，突变体在65℃下半衰期更长；双突变体效果更好，其半衰期大约是野生型逆转录酶UCRT vZ的4倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的逆转录酶UCRT vZ突变体热稳定性更好，在较高温度下用于RNA逆转录为cDNA时，表现出较高的热稳定性，具有较大的应用潜力。

公开(公告)号：CN119639712A

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202311196238.1

申请日：2023-09-15

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 景伟 ,  王学峰 ,  江晶洁 ,  桂萍 ,  马富强 ,  罗成坤 ,  陆泽林

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体提供了热稳定性提高的UCRT耐热型逆转录酶突变体，突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体，与野生型UCRT III耐热型逆转录酶相比，突变体在65℃下半衰期更长；双突变体效果更好，其半衰期大约是野生型DNA聚合酶的4倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的UCRT耐热型逆转录酶突变体热稳定性更好，在较高温度下逆转录合成DNA时，表现出较高的热稳定性，具有较大的应用潜力。

公开(公告)号：CN117106855B

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202311382378.8

申请日：2023-10-24

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 王学峰 ,  景伟 ,  马富强 ,  江晶洁 ,  桂萍 ,  李晓 ,  陆泽林 ,  罗成坤 ,  陆峰

IPC: C12Q1/48

Abstract: 本发明公开了一种测定Taq DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Taq DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后测定dATP的消耗量，再根据预先构建的表征Taq DNA聚合酶的绝对活性与dATP消耗量之间关系的标准曲线f1计算得到Taq DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点，可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。