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公开(公告)号：CN1037009C
公开(公告)日：1998-01-14
申请号：CN91103105.7
申请日：1991-05-17
Applicant: 中国医学科学院医药生物技术研究所
Abstract: 本发明涉及克隆有人肿瘤坏死因子-α基因的变铅青链霉菌的构建方法。本发方法采用基因工程技术，以质粒PIJ486为载体，其中包括通过T4-DNA连接酶将分别用EcoRI-HindⅢ双酶切得到的质粒PHT1TNF cDNA片段和质粒PIJ486片段进行连接，通过转化使其克隆至变铅青链霉菌TK54，挑选转化子，提取重组质粒，得到No7转化子，获得了克隆有人肿瘤坏死因子-α基因的变铅青链霉菌TK54-HT(含有重组质粒PIJT7)，将该克隆菌株进行发酵培养，即可获得肿瘤坏死因子蛋白，其表达水平可达1×107单位/升以上，菌种遗传性稳定。
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公开(公告)号：CN1119677A
公开(公告)日：1996-04-03
申请号：CN94116597.3
申请日：1994-09-29
Applicant: 中国医学科学院医药生物技术研究所
Abstract: 本发明提供了一种含有白介素II基因片段和绿脓毒素基因片段的分子导向药物的核苷酸序列，该序列是将白介素II结合其受体的功能区的基因片段直接与绿脓毒素基因片段融合，本发明还提供含有上述核苷酸序列的重组表达载体，以及含有这种表达载体的大肠杆菌。
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公开(公告)号：CN1037008C
公开(公告)日：1998-01-14
申请号：CN91100023.2
申请日：1991-01-09
Applicant: 中国医学科学院医药生物技术研究所
Abstract: 本发明涉及微生物领域，特别是克隆有丙酰化酶基因的螺旋霉素链霉菌的构建方法。本发明采用基因工程方法，其中包括采用质粒RIJ702为载体对生米卡链霉菌总DNA进行鸟枪克隆，转化至变铅青链霉菌TK54，挑选转化子和提取重组质粒，得到NO.9转化子，将自NO.9转化子提取得到的NO.9重组质粒转化至螺旋霉素链霉菌，挑选克隆有NO.9重组质粒的转化子，得到克隆有丙酰化酶基因的包括NO.61在内的螺旋霉素链霉菌。将该螺旋霉素链霉菌进行发酵即可工业生产丙酰螺旋霉素，丙酰螺旋霉素在总产物中含量在20%以上，菌种遗传性稳定。
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公开(公告)号：CN1055200A
公开(公告)日：1991-10-09
申请号：CN91103105.7
申请日：1991-05-17
Applicant: 中国医学科学院医药生物技术研究所
Abstract: 本发明涉及克隆有人肿瘤坏死因子-α基因的变铅青链霉菌的构建方法。本发明方法采用基因工程技术，以质粒PIJ486为载体，其中包括通过T4-DNA连接酶将分别用EcoRI-HindIII双酶切得到的质粒PHTITNFcDNA片段和质粒PIJ486片段进行连接，通过转化使其克隆至变铅青链霉菌TK54，挑选转化子，提取重组质粒，得到No7转化子，获得了克隆有人肿瘤坏死因子-α基因的变铅青链霉菌TK54-HT(含有重组质粒PIJT7)，将该克隆菌株进行发醇培养，即可获得肿瘤坏死因子蛋白，其表达水平可达1×107单位/升以上，菌种遗传性稳定。
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公开(公告)号：CN1052507A
公开(公告)日：1991-06-26
申请号：CN91100023.2
申请日：1991-01-09
Applicant: 中国医学科学院医药生物技术研究所
Abstract: 本发明涉及微生物领域，特别是克隆有丙酰化酶基因的螺旋霉素链霉菌的构建方法。本发明采用基因工程方法，其中包括采用质粒PIJ702为载体对生米卡链霉菌总DNA进行鸟枪克隆，转化至变铅青链霉菌TK54，挑选转化子和提取重组质粒，得到№9转化子，将自№9转化子提取得到的№9重组质粒转化至螺旋霉素链霉菌，挑选克隆有№9重组质粒的转化子，得到克隆有丙酰化酶基因的包括№61在内的螺旋霉素链霉菌，将该螺旋霉素链霉菌进行发酵即可工业生产丙酰螺旋霉素，丙酰螺旋霉素在总产物中含量在20％以上，菌种遗传性稳定。
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