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公开(公告)号：CN102776152B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201210213073.X
申请日：2012-06-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 哈尔滨维科生物技术开发公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒VP7蛋白的单克隆抗体，分泌该抗体的杂交瘤细胞株及应用。本发明以原核表达的BTV-VP7蛋白免疫BALB/c小鼠，分离免疫后小鼠的脾细胞，使其与SP2/0细胞进行融合，用原核表达的BTV-VP7蛋白检测分泌相应单克隆抗体的杂交瘤细胞，并采用有限稀释法对筛选到的杂交瘤细胞进行分离纯化，最终得到一株可以稳定分泌抗BTV-VP7蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，并将其所分泌的单克隆抗体命名为BTV-4H7。IFA实验结果显示BTV-4H7可以与1～24型BTV发生特异性反应。利用该单克隆抗体建立的C-ELISA可以快速、准确的检出1～24型BTV感染动物阳性血清。
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公开(公告)号：CN102776152A
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201210213073.X
申请日：2012-06-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 哈尔滨维科生物技术开发公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒VP7蛋白的单克隆抗体，分泌该抗体的杂交瘤细胞株及应用。本发明以原核表达的BTV-VP7蛋白免疫BALB/c小鼠，分离免疫后小鼠的脾细胞，使其与SP2/0细胞进行融合，用原核表达的BTV-VP7蛋白检测分泌相应单克隆抗体的杂交瘤细胞，并采用有限稀释法对筛选到的杂交瘤细胞进行分离纯化，最终得到一株可以稳定分泌抗BTV-VP7蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，并将其所分泌的单克隆抗体命名为BTV-4H7。IFA实验结果显示BTV-4H7可以与1～24型BTV发生特异性反应。利用该单克隆抗体建立的C-ELISA可以快速、准确的检出1～24型BTV感染动物阳性血清。
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公开(公告)号：CN105238761A
公开(公告)日：2016-01-13
申请号：CN201510677458.5
申请日：2015-10-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K7/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了抗蓝舌病病毒(Bluetongue Virus，BTV)NS1蛋白的群特异性单克隆抗体BTV-NS1-1F11及其识别的B细胞表位和应用。本发明还公开了一株经筛选得到的，能够稳定分泌抗BTV1-24型NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为BTV-NS1-1F11，其微生物保藏号为：CGMCC NO.10208，该杂交瘤细胞株分泌的抗BTV1-24NS1蛋白单克隆抗体与BTV1-24型的NS1蛋白均发生特异性反应。此外，本发明还公开了该单克隆抗体所识别的BTV NS1蛋白特异性B细胞表位。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV NS1蛋白特异性B细胞表位可用于制备鉴别、诊断、预防或治疗BTV感染的试剂，同时为以表位为基础的诊断方法建立和表位标记疫苗的设计奠定基础，并为进一步研究和治疗BTV提供物质储备。
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公开(公告)号：CN101397562A
公开(公告)日：2009-04-01
申请号：CN200710152068.1
申请日：2007-09-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种鸡主要组织相容性复合体/肽四聚体的构建方法及由该方法得到的产品。本发明在大量表达的重组BF2－BSP、重组Chβ2m以及合成多肽的基础上，重折叠获得了BF2/肽单体复合物，进而在此基础上进行生物素化，制备得到了BF2/肽四聚体。本发明BF2/肽四聚体可用以评价IBV感染过程中抗原特异性CTLs效应，此外还可用来筛选BF2－限制的禽类病毒的T细胞表位。在制备BF2/肽四聚体的重折叠过程中，通过置换BF2肽结合槽中的肽段，所制备的BF2四聚体及可用以评价其它禽类病毒抗原特异性CTL效应。本发明为研究IBV的抗原特异性T细胞免疫奠定了基础，为研究IBV感染过程中抗原特异性CTLs的动态变化提供了有力的工具，也为BF2/肽四聚体技术应用于禽类其它病毒性疾病的T细胞免疫及表位筛选等研究工作奠定了基础。
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公开(公告)号：CN100334108C
公开(公告)日：2007-08-29
申请号：CN200510116853.2
申请日：2005-10-31
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/175 , C12N15/40 , C12N15/63 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种新的重组赤羽病毒核衣壳蛋白、编码该重组蛋白基因以及该重组蛋白的制备方法。本发明重组蛋白具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，编码该重组赤羽病毒核衣壳蛋白基因具有SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。本发明重组蛋白的制备方法包括以下步骤：构建重组赤羽病毒核衣壳蛋白基因原核表达载体；用重组赤羽病毒核衣壳蛋白基因原核表达载体转化大肠杆菌；用IPTG诱导重组核衣壳蛋白表达，回收并纯化所表达的重组核衣壳蛋白。本发明重组赤羽病毒核衣壳蛋白能够在大肠杆菌中高效表达，所表达的重组蛋白具有高免疫学活性和高敏感性，利用该重组赤羽病毒核衣壳蛋白制备成的抗血清，采用间接荧光抗体法可以快速、准确的检测出组织中的赤羽病毒抗原。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103740649B
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201310652907.1
申请日：2013-12-06
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K14/14 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒血清16型VP2蛋白单克隆抗体BTV16-2B4及其识别的B细胞表位多肽和应用，属于蓝舌病防治领域。本发明还涉及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株以及由该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体，间接免疫荧光试验显示该单克隆抗体只与BTV16呈现特异性反应，而不与蓝舌病病毒其他血清型，茨城病病毒，中山病病毒产生交叉反应。进一步的，本发明利用截短表达抗原短肽和肽扫描技术鉴定出该抗体所识别的BTV16-VP2蛋白B细胞表位多肽。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV16-VP2蛋白B细胞表位可用于制备成BTV16型特异性鉴别诊断试剂，并为BTV表位标记疫苗的研制奠定了基础。
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公开(公告)号：CN105255837A
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201510677372.2
申请日：2015-10-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K7/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)NS3蛋白的单克隆抗体及其识别的B细胞表位和应用。本发明还公开了一株通过筛选得到的，能够稳定分泌所述单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为BTV-NS3-3D8，其微生物保藏号是：CGMCC No.10209，实验证明由该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体能够与BTV1～24型的NS3蛋白发生群特异性反应。此外，本发明还公开了该单克隆抗体所识别的BTV NS3蛋白的特异性B细胞表位。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV NS3蛋白的特异性B细胞表位可用于建立BTV抗原群鉴别诊断方法以及为NS3蛋白结构和功能的基础研究奠定一定的基础。
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公开(公告)号：CN105219733A
公开(公告)日：2016-01-06
申请号：CN201510662588.1
申请日：2015-10-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K7/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了抗蓝舌病病毒(Bluetongue Virus，BTV)12型NS1蛋白的单克隆抗体BTV12-NS1-IF8及其识别的B细胞表位和应用。所述的单克隆抗体是由本发明筛选得到的微生物保藏号为CGMCC No.10207的杂交瘤细胞株分泌产生，实验证明该杂交瘤细胞株分泌的抗BTV12 NS1蛋白单克隆抗体能够与BTV12型NS1蛋白发生特异性反应。此外，本发明还公开了该单克隆抗体所识别的BTV12 NS1蛋白特异性B细胞表位。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV12 NS1蛋白特异性B细胞表位可用于制备鉴别、诊断、预防或治疗BTV12型感染的试剂，同时为以表位为基础的诊断方法建立和表位标记疫苗的设计奠定基础，为进一步研究和治疗BTV12型提供物质储备。
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公开(公告)号：CN101696399A
公开(公告)日：2010-04-21
申请号：CN200910180316.2
申请日：2009-10-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白CTL细胞表位及其应用。本发明将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株M蛋白基因与小鼠泛素基因进行融合并克隆构建DNA疫苗，同时构建了表达M蛋白的WR株牛痘病毒的重组病毒；按照Priming-Boosting策略免疫BALB/c小鼠，然后分离小鼠脾淋巴细胞，用生物信息学方法预测、合成的CTL短肽进行体外培养刺激，借助流式细胞技术与酶联免疫斑点技术鉴定出K93FITSRCRL与F57GYMTFVHF两个CTL表位，PRRSV M蛋白CTL表位的鉴定将为PRRS细胞免疫机制及新型表位肽疫苗的研究奠定一定的理论基础，同时对PRRS防控技术的理论研究具有指导意义。
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公开(公告)号：CN1769294A
公开(公告)日：2006-05-10
申请号：CN200510116853.2
申请日：2005-10-31
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/08 , C12N15/40 , C12N15/63 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种新的重组赤羽病毒核衣壳蛋白、编码该重组蛋白基因以及该重组蛋白的制备方法。本发明重组蛋白具有SEQ ID No：1所示的氨基酸序列，编码该重组赤羽病毒核衣壳蛋白基因具有SEQ ID No：2所示的核苷酸序列。本发明重组蛋白的制备方法包括以下步骤：构建重组赤羽病毒核衣壳蛋白基因原核表达载体；用重组赤羽病毒核衣壳蛋白基因原核表达载体转化大肠杆菌；用IPTG诱导重组核衣壳蛋白表达，回收并纯化所表达的重组核衣壳蛋白。本发明重组赤羽病毒核衣壳蛋白能够在大肠杆菌中高效表达，所表达的重组蛋白具有高免疫学活性和高敏感性，利用该重组赤羽病毒核衣壳蛋白制备成的抗血清，采用间接荧光抗体法可以快速、准确的检测出组织中的赤羽病毒抗原。
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