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公开(公告)号:CN102776152B
公开(公告)日:2014-07-09
申请号:CN201210213073.X
申请日:2012-06-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 哈尔滨维科生物技术开发公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒VP7蛋白的单克隆抗体,分泌该抗体的杂交瘤细胞株及应用。本发明以原核表达的BTV-VP7蛋白免疫BALB/c小鼠,分离免疫后小鼠的脾细胞,使其与SP2/0细胞进行融合,用原核表达的BTV-VP7蛋白检测分泌相应单克隆抗体的杂交瘤细胞,并采用有限稀释法对筛选到的杂交瘤细胞进行分离纯化,最终得到一株可以稳定分泌抗BTV-VP7蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并将其所分泌的单克隆抗体命名为BTV-4H7。IFA实验结果显示BTV-4H7可以与1~24型BTV发生特异性反应。利用该单克隆抗体建立的C-ELISA可以快速、准确的检出1~24型BTV感染动物阳性血清。
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公开(公告)号:CN102776152A
公开(公告)日:2012-11-14
申请号:CN201210213073.X
申请日:2012-06-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 哈尔滨维科生物技术开发公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒VP7蛋白的单克隆抗体,分泌该抗体的杂交瘤细胞株及应用。本发明以原核表达的BTV-VP7蛋白免疫BALB/c小鼠,分离免疫后小鼠的脾细胞,使其与SP2/0细胞进行融合,用原核表达的BTV-VP7蛋白检测分泌相应单克隆抗体的杂交瘤细胞,并采用有限稀释法对筛选到的杂交瘤细胞进行分离纯化,最终得到一株可以稳定分泌抗BTV-VP7蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并将其所分泌的单克隆抗体命名为BTV-4H7。IFA实验结果显示BTV-4H7可以与1~24型BTV发生特异性反应。利用该单克隆抗体建立的C-ELISA可以快速、准确的检出1~24型BTV感染动物阳性血清。
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公开(公告)号:CN105238761A
公开(公告)日:2016-01-13
申请号:CN201510677458.5
申请日:2015-10-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K7/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了抗蓝舌病病毒(Bluetongue Virus,BTV)NS1蛋白的群特异性单克隆抗体BTV-NS1-1F11及其识别的B细胞表位和应用。本发明还公开了一株经筛选得到的,能够稳定分泌抗BTV1-24型NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为BTV-NS1-1F11,其微生物保藏号为:CGMCC NO.10208,该杂交瘤细胞株分泌的抗BTV1-24NS1蛋白单克隆抗体与BTV1-24型的NS1蛋白均发生特异性反应。此外,本发明还公开了该单克隆抗体所识别的BTV NS1蛋白特异性B细胞表位。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV NS1蛋白特异性B细胞表位可用于制备鉴别、诊断、预防或治疗BTV感染的试剂,同时为以表位为基础的诊断方法建立和表位标记疫苗的设计奠定基础,并为进一步研究和治疗BTV提供物质储备。
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公开(公告)号:CN103740649B
公开(公告)日:2016-07-06
申请号:CN201310652907.1
申请日:2013-12-06
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K14/14 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒血清16型VP2蛋白单克隆抗体BTV16-2B4及其识别的B细胞表位多肽和应用,属于蓝舌病防治领域。本发明还涉及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株以及由该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体,间接免疫荧光试验显示该单克隆抗体只与BTV16呈现特异性反应,而不与蓝舌病病毒其他血清型,茨城病病毒,中山病病毒产生交叉反应。进一步的,本发明利用截短表达抗原短肽和肽扫描技术鉴定出该抗体所识别的BTV16-VP2蛋白B细胞表位多肽。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV16-VP2蛋白B细胞表位可用于制备成BTV16型特异性鉴别诊断试剂,并为BTV表位标记疫苗的研制奠定了基础。
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公开(公告)号:CN105255837A
公开(公告)日:2016-01-20
申请号:CN201510677372.2
申请日:2015-10-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K7/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)NS3蛋白的单克隆抗体及其识别的B细胞表位和应用。本发明还公开了一株通过筛选得到的,能够稳定分泌所述单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为BTV-NS3-3D8,其微生物保藏号是:CGMCC No.10209,实验证明由该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体能够与BTV1~24型的NS3蛋白发生群特异性反应。此外,本发明还公开了该单克隆抗体所识别的BTV NS3蛋白的特异性B细胞表位。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV NS3蛋白的特异性B细胞表位可用于建立BTV抗原群鉴别诊断方法以及为NS3蛋白结构和功能的基础研究奠定一定的基础。
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公开(公告)号:CN105219733A
公开(公告)日:2016-01-06
申请号:CN201510662588.1
申请日:2015-10-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K7/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了抗蓝舌病病毒(Bluetongue Virus,BTV)12型NS1蛋白的单克隆抗体BTV12-NS1-IF8及其识别的B细胞表位和应用。所述的单克隆抗体是由本发明筛选得到的微生物保藏号为CGMCC No.10207的杂交瘤细胞株分泌产生,实验证明该杂交瘤细胞株分泌的抗BTV12 NS1蛋白单克隆抗体能够与BTV12型NS1蛋白发生特异性反应。此外,本发明还公开了该单克隆抗体所识别的BTV12 NS1蛋白特异性B细胞表位。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV12 NS1蛋白特异性B细胞表位可用于制备鉴别、诊断、预防或治疗BTV12型感染的试剂,同时为以表位为基础的诊断方法建立和表位标记疫苗的设计奠定基础,为进一步研究和治疗BTV12型提供物质储备。
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公开(公告)号:CN101696399A
公开(公告)日:2010-04-21
申请号:CN200910180316.2
申请日:2009-10-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白CTL细胞表位及其应用。本发明将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株M蛋白基因与小鼠泛素基因进行融合并克隆构建DNA疫苗,同时构建了表达M蛋白的WR株牛痘病毒的重组病毒;按照Priming-Boosting策略免疫BALB/c小鼠,然后分离小鼠脾淋巴细胞,用生物信息学方法预测、合成的CTL短肽进行体外培养刺激,借助流式细胞技术与酶联免疫斑点技术鉴定出K93FITSRCRL与F57GYMTFVHF两个CTL表位,PRRSV M蛋白CTL表位的鉴定将为PRRS细胞免疫机制及新型表位肽疫苗的研究奠定一定的理论基础,同时对PRRS防控技术的理论研究具有指导意义。
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公开(公告)号:CN103421746B
公开(公告)日:2015-11-25
申请号:CN201310298414.2
申请日:2013-07-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K7/08 , G01N33/577 , G01N33/68 , A61K39/42 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗东方马脑炎病毒(Eastern equine encephalitis virus,EEEV)E2蛋白的单克隆抗体(EEEV-5E4)及其识别的B细胞表位多肽和应用。本发明还公开了一株能够稳定分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为EEEV-5E4,其微生物保藏号是:CGMCC No.7008,由该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体能够与EEEV E2蛋白发生特异性反应,而与相应阴性对照不发生反应。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的EEEV E2蛋白特异性B细胞表位多肽可用于制备鉴别诊断EEEV/VEEV与其它甲病毒的试剂,为建立EEEV/VEEV与甲病毒属其它病毒的血清学鉴别诊断方法以及进一步研究甲病毒属相关病毒的预防与治疗措施奠定了基础。
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公开(公告)号:CN103305473B
公开(公告)日:2015-01-07
申请号:CN201310241781.9
申请日:2013-06-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K7/06 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种抗蓝舌病病毒血清1型VP2蛋白的单克隆抗体BTV1-4B6及其识别的B细胞表位多肽与应用,属于蓝舌病防治领域。本发明还涉及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株。由本发明的杂交瘤细胞株分泌的抗BTV1-VP2蛋白的单克隆抗体,命名为BTV1-4B6。进一步的,本发明利用截短表达抗原短肽和肽扫描技术鉴定出该抗体所识别的BTV1-VP2蛋白B细胞表位多肽:115AQPLKVGL122,序列比对结果显示该表位多肽是BTV1所特有并保守的B细胞表位多肽。免疫荧光实验结果显示BTV1-4B6可与BTV1发生特异性反应,而与BTV2~24不发生反应。由此说明BTV1-4B6可用于BTV1特异性诊断的研究与应用。
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公开(公告)号:CN103740650A
公开(公告)日:2014-04-23
申请号:CN201310652908.6
申请日:2013-12-06
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K14/14 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒血清16型VP2蛋白单克隆抗体BTV16-3G10及其识别的B细胞表位多肽和应用,属于蓝舌病防治领域。本发明还涉及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株以及由该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体,间接免疫荧光试验显示该单克隆抗体只与BTV16呈现特异性反应,而不与蓝舌病病毒其他血清型,茨城病病毒,中山病病毒产生交叉反应。进一步的,本发明利用截短表达抗原短肽和肽扫描技术鉴定出该抗体所识别的BTV16-VP2蛋白B细胞表位多肽。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV16-VP2蛋白B细胞表位可用于制备成BTV16型特异性鉴别诊断试剂,并为BTV表位标记疫苗的研制奠定了基础。
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