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公开(公告)号：CN108359641B
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN201810235163.6
申请日：2018-03-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株稳定表达全猪源抗猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus，PEDV)中和抗体PC10‑IgA的CHO细胞系及其构建方法和应用。所述的细胞系命名为PC10‑IgA‑CHO，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.15293。此外，本发明还提出了一种由所述的CHO细胞系分泌产生的全猪源抗猪流行性腹泻病毒的PC10‑IgA中和抗体，该中和抗体具有中和PEDV病毒的能力，同时可以与感染Vero‑E6细胞的病毒蛋白结合，具有抗PEDV的生物学活性和功能。通过对该细胞系进行培养，可获得大量的具有抗PEDV作用的PC10‑IgA中和抗体，因此，本发明的提出使治疗性抗PEDV IgA抗体大量的获得和使用成为了可能，为PEDV的预防和治疗提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN106381296A
公开(公告)日：2017-02-08
申请号：CN201510816345.9
申请日：2015-11-19
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/873 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供了一种表达多基因抗流感转基因动物的构建方法。该方法在RNA聚合酶Ⅲ型启动子h7SK、hH1、hU6和mU6的控制下，靶向流感病毒基因构建了串联表达的shRNA表达盒，将Mx-RNAis与shRNA表达盒联合构建到表达载体并包装重组慢病毒，制备转基因动物获得表达抗流感基因的转基因动物。实验结果表明转基因动物具有显著抑制猪流感病毒复制的活性。
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公开(公告)号：CN111454908A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN201910048190.7
申请日：2019-01-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明提供一种Tpl2缺陷型MDCK细胞株及其构建方法和应用，涉及生物技术领域，所述MDCK细胞株中Tpl2基因第1外显子第239位～第243位碱基缺失。本发明通过移码突变敲除MDCK细胞株中的Tpl2基因，但该突变对MDCK细胞传代10代后的生长速度和细胞形态无影响；试验表明，本发明提供的Tpl2缺陷型MDCK细胞株可稳定遗传，安全可靠，克服了现有突变MDCK细胞遗传不稳定或不安全的问题。本发明所述Tpl2缺陷型MDCK细胞株接种流感病毒后可用于提高流感病毒产率，相对于常规MDCK细胞培养的上清血凝效价和上清病毒TCID50滴度均有显著提高，克服了现有MDCK细胞培养流感病毒的产量不足问题。
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公开(公告)号：CN101705246A
公开(公告)日：2010-05-12
申请号：CN200710097756.2
申请日：2007-04-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种马传染性贫血病毒(EIAV)基因转移载体、其构建方法及其用途。本发明载体包含：CMV/R/U5启动子、5’非翻译区引导序列、部分5’gag基因编码区序列、中央聚嘌呤序列和EIAV的Rev反应元件、CMVIE/鸡β-actin启动子、报告基因、土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件、多克隆位点、EIAV 3’LTR之前的poly(A)信号、完整的3’LTR以及真核表达载体的部分序列。本发明载体具有慢病毒载体的共有优点，缺少所有野生型病毒辅助基因，并可以携带一个或多个选定基因以传送给靶细胞，能够插入大片段的目标DNA序列，能够使外源基因和报告基因在细胞中高水平的表达。
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公开(公告)号：CN100334108C
公开(公告)日：2007-08-29
申请号：CN200510116853.2
申请日：2005-10-31
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/175 , C12N15/40 , C12N15/63 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种新的重组赤羽病毒核衣壳蛋白、编码该重组蛋白基因以及该重组蛋白的制备方法。本发明重组蛋白具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，编码该重组赤羽病毒核衣壳蛋白基因具有SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。本发明重组蛋白的制备方法包括以下步骤：构建重组赤羽病毒核衣壳蛋白基因原核表达载体；用重组赤羽病毒核衣壳蛋白基因原核表达载体转化大肠杆菌；用IPTG诱导重组核衣壳蛋白表达，回收并纯化所表达的重组核衣壳蛋白。本发明重组赤羽病毒核衣壳蛋白能够在大肠杆菌中高效表达，所表达的重组蛋白具有高免疫学活性和高敏感性，利用该重组赤羽病毒核衣壳蛋白制备成的抗血清，采用间接荧光抗体法可以快速、准确的检测出组织中的赤羽病毒抗原。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1781553A
公开(公告)日：2006-06-07
申请号：CN200410096238.5
申请日：2004-11-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: A61K39/145 , A61K48/00 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种新的H5N1亚型禽流感病毒基因工程亚单位疫苗及其制备方法，本发明疫苗由下述组分组成：SEQ ID No.1所述基因序列用昆虫/杆状病毒表达系统表达后所得的蛋白、SEQ ID No.2所述基因序列用原核表达系统表达后所得的蛋白、免疫佐剂。本发明疫苗免疫鸡后，能激发良好的保护性免疫反应，而没有活病毒的任何危险，不存在基因重组、毒力返强等缺陷，并且能区分免疫者和自然感染者从而不干扰流行病学调查，也不会造成任何环境与生态安全问题。
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公开(公告)号：CN108359641A
公开(公告)日：2018-08-03
申请号：CN201810235163.6
申请日：2018-03-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株稳定表达全猪源抗猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus，PEDV)中和抗体PC10-IgA的CHO细胞系及其构建方法和应用。所述的细胞系命名为PC10-IgA-CHO，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.15293。此外，本发明还提出了一种由所述的CHO细胞系分泌产生的全猪源抗猪流行性腹泻病毒的PC10-IgA中和抗体，该中和抗体具有中和PEDV病毒的能力，同时可以与感染Vero-E6细胞的病毒蛋白结合，具有抗PEDV的生物学活性和功能。通过对该细胞系进行培养，可获得大量的具有抗PEDV作用的PC10-IgA中和抗体，因此，本发明的提出使治疗性抗PEDV IgA抗体大量的获得和使用成为了可能，为PEDV的预防和治疗提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN105002179B
公开(公告)日：2018-07-06
申请号：CN201510412627.2
申请日：2015-07-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/79 , C12N5/10 , A61K48/00 , A61P31/16
Abstract: 本发明提供一种能抑制猪流感病毒的shRNA转基因重组质粒，该质粒含有四个shRNA表达基因，能同时编码四种分别靶向流感病毒PA、PB1、PB2、NP基因保守区域的特异shRNA。该质粒适用于多种转基因技术。使用慢病毒载体将该质粒转入体外培育的MDCK细胞后，经攻毒实验证明，筛选得到的转基因细胞系具有抵抗不同亚型流感病毒感染的能力。将该质粒通过静脉与肌肉注射入4周龄仔猪，然后用H3N2亚型猪流感病毒感染，发现经血液注射组具有更强的抑制流感病毒的复制。为RNAi应用于猪流感病毒的研究以及猪流感的防治积累了必要的实验数据，为转基因猪抗流感研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN106337048A
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201510657886.1
申请日：2015-10-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/11 , C12N15/63 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供了一种通过慢病毒载体法获得的表达Mx-RNAis抗禽流感病毒感染的转基因鸡，实验证明表达Mx-RNAis基因转基因鸡携带的外源基因能够稳定遗传，且该转基因鸡能够显著抑制H5N1禽流感病毒的体内复制。
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公开(公告)号：CN101705246B
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN200710097756.2
申请日：2007-04-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种马传染性贫血病毒(EIAV)基因转移载体、其构建方法及其用途。本发明载体包含：CMV/R/U5启动子、5’非翻译区引导序列、部分5’gag基因编码区序列、中央聚嘌呤序列和EIAV的Rev反应元件、CMVIE/鸡β-actin启动子、报告基因、土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件、多克隆位点、EIAV 3’LTR之前的poly(A)信号、完整的3’LTR以及真核表达载体的部分序列。本发明载体具有慢病毒载体的共有优点，缺少所有野生型病毒辅助基因，并可以携带一个或多个选定基因以传送给靶细胞，能够插入大片段的目标DNA序列，能够使外源基因和报告基因在细胞中高水平的表达。
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