公开(公告)号：CN101397562A

公开(公告)日：2009-04-01

申请号：CN200710152068.1

申请日：2007-09-28

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

Inventor： 吴东来 ,  刘光亮 ,  王群 ,  肖一红 ,  童铁钢 ,  白宇 ,  张维军 ,  徐树兰 ,  张文龙 ,  殷喆

IPC: C12N15/12 ,  C12N1/21 ,  C07K19/00

Abstract: 本发明公开了一种鸡主要组织相容性复合体/肽四聚体的构建方法及由该方法得到的产品。本发明在大量表达的重组BF2－BSP、重组Chβ2m以及合成多肽的基础上，重折叠获得了BF2/肽单体复合物，进而在此基础上进行生物素化，制备得到了BF2/肽四聚体。本发明BF2/肽四聚体可用以评价IBV感染过程中抗原特异性CTLs效应，此外还可用来筛选BF2－限制的禽类病毒的T细胞表位。在制备BF2/肽四聚体的重折叠过程中，通过置换BF2肽结合槽中的肽段，所制备的BF2四聚体及可用以评价其它禽类病毒抗原特异性CTL效应。本发明为研究IBV的抗原特异性T细胞免疫奠定了基础，为研究IBV感染过程中抗原特异性CTLs的动态变化提供了有力的工具，也为BF2/肽四聚体技术应用于禽类其它病毒性疾病的T细胞免疫及表位筛选等研究工作奠定了基础。

公开(公告)号：CN101696399A

公开(公告)日：2010-04-21

申请号：CN200910180316.2

申请日：2009-10-22

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

Inventor： 吴东来 ,  张维军 ,  刘霓红 ,  白宇 ,  林燕 ,  童铁钢 ,  王群 ,  杨涛

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/70 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  C07K7/06 ,  G01N33/569 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白CTL细胞表位及其应用。本发明将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株M蛋白基因与小鼠泛素基因进行融合并克隆构建DNA疫苗，同时构建了表达M蛋白的WR株牛痘病毒的重组病毒；按照Priming-Boosting策略免疫BALB/c小鼠，然后分离小鼠脾淋巴细胞，用生物信息学方法预测、合成的CTL短肽进行体外培养刺激，借助流式细胞技术与酶联免疫斑点技术鉴定出K93FITSRCRL与F57GYMTFVHF两个CTL表位，PRRSV M蛋白CTL表位的鉴定将为PRRS细胞免疫机制及新型表位肽疫苗的研究奠定一定的理论基础，同时对PRRS防控技术的理论研究具有指导意义。

公开(公告)号：CN101397562B

公开(公告)日：2011-06-15

申请号：CN200710152068.1

申请日：2007-09-28

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

Inventor： 吴东来 ,  刘光亮 ,  王群 ,  肖一红 ,  童铁钢 ,  白宇 ,  张维军 ,  徐树兰 ,  张文龙 ,  殷喆

IPC: C12N15/12 ,  C12N1/21 ,  C07K19/00

Abstract: 本发明公开了一种鸡主要组织相容性复合体/肽四聚体的构建方法及由该方法得到的产品。本发明在大量表达的重组BF2-BSP、重组Chβ2m以及合成多肽的基础上，重折叠获得了BF2/肽单体复合物，进而在此基础上进行生物素化，制备得到了BF2/肽四聚体。本发明BF2/肽四聚体可用以评价IBV感染过程中抗原特异性CTLs效应，此外还可用来筛选BF2-限制的禽类病毒的T细胞表位。在制备BF2/肽四聚体的重折叠过程中，通过置换BF2肽结合槽中的肽段，所制备的BF2四聚体及可用以评价其它禽类病毒抗原特异性CTL效应。本发明为研究IBV的抗原特异性T细胞免疫奠定了基础，为研究IBV感染过程中抗原特异性CTLs的动态变化提供了有力的工具，也为BF2/肽四聚体技术应用于禽类其它病毒性疾病的T细胞免疫及表位筛选等研究工作奠定了基础。