一种焦测序定量检测甲基化的方法

    公开(公告)号:CN105219851B

    公开(公告)日:2018-05-25

    申请号:CN201510621381.X

    申请日:2015-09-25

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 肖鹏峰 陈玲

    Abstract: 本发明公开了一种焦测序定量检测甲基化的方法。该方法将基因组DNA经亚硫酸氢盐转化后的PCR产物按照特定两核苷酸快速通过DNA模板序列中“A”、“G”、“T”区域,而dGTP加入测定DNA模板序列中“C”含量方式进行焦测序,连续记录每个测序反应得到信息:即得到两核苷酸合成数目的编码和dGTP合成数目信息,通过设定已确定的目标区域序列中所有GC位点中碱基C均不同程度的转化成T,再利用dGTP合成数目信息,实现目标区域序列中各甲基化位点的定量分析。本发明能够大幅度提高测序长度,拓宽了传统焦测序的分析范围,适合单样本PCR产物、以及混合样本PCR产物序列的甲基化定量分析。

    一种含通用碱基寡核苷酸序列及其在DNA杂交分析中的应用

    公开(公告)号:CN103484458A

    公开(公告)日:2014-01-01

    申请号:CN201310469720.8

    申请日:2013-10-10

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种含通用碱基寡核苷酸序列及其在DNA杂交分析中的应用。所述含通用碱基寡核苷酸序列包括基本碱基和通用碱基,所述基本碱基与目标序列完全互补,其中包括与目标序列SNV位点对应的基本碱基;所述通用碱基不能对应目标序列SNV位点,位于与目标序列SNV位点对应的基本碱基的一侧或两侧;所述基本碱基为A、G、C、T,所述通用碱基是与A、G、C、T都能形成氢键配对的核苷。本发明的最大优点是实现了DNA序列中单碱基错配的有效分析。

    一种用于抑制基因表达的微核糖核酸载体构建方法

    公开(公告)号:CN102911959A

    公开(公告)日:2013-02-06

    申请号:CN201210436667.7

    申请日:2012-11-05

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明是一种用于抑制基因表达的微核糖核酸载体构建方法,该方法首先利用设计好的反向互补的双链DNA序列的作为模板,经过退火处理后,将退火的双链模板通过T4连接酶连接到质粒载体上,然后再转化到感受态的大肠杆菌DH5α中,通过抗性筛选、酶切鉴定、测序鉴定等获得我们所要表达的miRNA。与现有的其他技术相比,该系统能在各种培养的细胞中有效、持久地表达miRNA,无任何致病作用。本发明的方法不仅所需设备简单、操作便利,适合各种不同种类的miRNA的表达,而且易于对所需miRNA进行大量的制备,不仅可用于体外实验,实现对基因表达的调控。而且可望用于种癌症、心血管疾病等的新型生物制剂进行开发。

    一种BNP兔单克隆抗体的制备方法
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116375863A

    公开(公告)日:2023-07-04

    申请号:CN202310478167.8

    申请日:2023-04-28

    Abstract: 本发明涉及一种BNP兔单克隆抗体的制备方法,包括如下步骤:通过抗原对免疫调节剂脂质体处理后的兔子进行免疫;取免疫后兔子的脾脏细胞分离出的B细胞与骨髓瘤细胞进行融合;筛选产生抗BNP抗体的优势兔鼠杂交瘤细胞株;根据筛选出的优势兔鼠杂交瘤细胞株为模板对抗体中重链、轻链可变区进行RT‑PCR扩增,得到多个重链、轻链可变区基因;将重链、轻链可变区基因分别通过同源重组克隆到含恒定区基因的pcDNA‑R1表达载体中,转染到HEK293T细胞中进行表达,得BNP兔单克隆抗体。利用兔抗体形成过程中的基因转换特性,将免疫调节剂脂质体用于早期兔免疫细胞分化成熟过程,促进兔免疫系统初始B细胞的分化,产生更多样化的B细胞,在后期免疫反应过程中获得高质量的抗体。

    基于分析PCR副产物焦磷酸的病原微生物快速检测方法

    公开(公告)号:CN106701966B

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN201710042607.X

    申请日:2017-01-20

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于分析PCR副产物焦磷酸的病原微生物快速检测方法,包括如下步骤:(1)检索病原微生物特征核酸序列片段;(2)针对该特征核酸序列片段,设计一对特异的PCR引物;(3)提取待检测样本微生物基因组,并用特异的PCR引物进行PCR扩增;(4)分析PCR扩增中焦磷酸;(5)根据分析结果判定PCR反应是否发生与发生的多少,确定样本中是否含有该病原微生物及其DNA浓度。本发明的方法可以准确的检测出样本中是否含有该病原微生物及其含量;该检测分析方法灵敏度高,检测快,操作流程简单,容易实施,能对大样本实施快速分析。

    一种高折射率角膜接触镜材料及其应用

    公开(公告)号:CN111154028A

    公开(公告)日:2020-05-15

    申请号:CN202010009396.1

    申请日:2020-01-06

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种高折射率角膜接触镜材料以及应用,该材料包括以下重量份比例的原料:具有取代芳环结构的可聚合乙烯基单体:18~52份,亲水单体:21~80份,交联剂:0.1~1份,自由基引发剂:0.1~1份。利用本发明角膜接触镜材料制成的角膜接触镜,具有良好的伸长率和回弹性,以及较好的机械强度,同时具有高折射率和光学透明。同时,利用该材料制备角膜接触镜,制作方法简单,无需溶剂,提高人眼佩戴的安全性。

    一种焦测序定量检测甲基化的方法

    公开(公告)号:CN105219851A

    公开(公告)日:2016-01-06

    申请号:CN201510621381.X

    申请日:2015-09-25

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 肖鹏峰 陈玲

    CPC classification number: C12Q1/6869 C12Q2563/131 C12Q2563/143 C12Q2565/301

    Abstract: 本发明公开了一种焦测序定量检测甲基化的方法。该方法将基因组DNA经亚硫酸氢盐转化后的PCR产物按照特定两核苷酸快速通过DNA模板序列中“A”、“G”、“T”区域,而dGTP加入测定DNA模板序列中“C”含量方式进行焦测序,连续记录每个测序反应得到信息:即得到两核苷酸合成数目的编码和dGTP合成数目信息,通过设定已确定的目标区域序列中所有GC位点中碱基C均不同程度的转化成T,再利用dGTP合成数目信息,实现目标区域序列中各甲基化位点的定量分析。本发明能够大幅度提高测序长度,拓宽了传统焦测序的分析范围,适合单样本PCR产物、以及混合样本PCR产物序列的甲基化定量分析。

    基于分析PCR副产物焦磷酸的病原微生物快速检测方法

    公开(公告)号:CN106701966A

    公开(公告)日:2017-05-24

    申请号:CN201710042607.X

    申请日:2017-01-20

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于分析PCR副产物焦磷酸的病原微生物快速检测方法,包括如下步骤:(1)检索病原微生物特征核酸序列片段;(2)针对该特征核酸序列片段,设计一对特异的PCR引物;(3)提取待检测样本微生物基因组,并用特异的PCR引物进行PCR扩增;(4)分析PCR扩增中焦磷酸;(5)根据分析结果判定PCR反应是否发生与发生的多少,确定样本中是否含有该病原微生物及其DNA浓度。本发明的方法可以准确的检测出样本中是否含有该病原微生物及其含量;该检测分析方法灵敏度高,检测快,操作流程简单,容易实施,能对大样本实施快速分析。

    一种评价PEG化纳米药物的检测试剂盒及其使用方法

    公开(公告)号:CN107929755A

    公开(公告)日:2018-04-20

    申请号:CN201711429364.1

    申请日:2017-12-26

    Applicant: 东南大学

    CPC classification number: A61K49/126 A61K49/186

    Abstract: 本发明公开了一种用于评价PEG化纳米药物的磁共振检测试剂盒及其使用方法,该试剂盒包括三种水动力尺寸的磁性氧化铁纳米探针冻干粉和复溶水溶液;以油酸修饰的磁性Fe3O4纳米颗粒和双亲性磷脂-PEG为油相,在水存在的情况下通过旋转蒸发的方式直接合成表面修饰PEG的水溶性磁性纳米探针并进行冻干;将冻干粉复溶后经小鼠尾静脉注射,对小鼠肿瘤部位进行T2加权磁共振成像,根据肿瘤部位的图像增强强度TNR值判断肿瘤血管的EPR效果,从而预测PEG化纳米药物在肿瘤中的分布,为药物设计与研发提供指导。

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