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公开(公告)号：CN102911959A
公开(公告)日：2013-02-06
申请号：CN201210436667.7
申请日：2012-11-05
Applicant: 东南大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/113
Abstract: 本发明是一种用于抑制基因表达的微核糖核酸载体构建方法，该方法首先利用设计好的反向互补的双链DNA序列的作为模板，经过退火处理后，将退火的双链模板通过T4连接酶连接到质粒载体上，然后再转化到感受态的大肠杆菌DH5α中，通过抗性筛选、酶切鉴定、测序鉴定等获得我们所要表达的miRNA。与现有的其他技术相比，该系统能在各种培养的细胞中有效、持久地表达miRNA，无任何致病作用。本发明的方法不仅所需设备简单、操作便利，适合各种不同种类的miRNA的表达，而且易于对所需miRNA进行大量的制备，不仅可用于体外实验，实现对基因表达的调控。而且可望用于种癌症、心血管疾病等的新型生物制剂进行开发。
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