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公开(公告)号：CN103601805B
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201310609880.8
申请日：2013-11-27
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开一种人FGF21单克隆抗体的轻链和重链的可变区，单克隆抗体轻链可变区氨基酸序列如Seq NO.1所示，重链可变区氨基酸序列如Seq NO.2所示。本发明通过原核表达人源FGF21蛋白免疫BALB/C小鼠，制备小鼠抗人FGF21的单克隆抗体，并筛选出具有高亲和力的抗人FGF21的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，克隆该单克隆抗体的轻重链可变区基因，获得该单克隆抗体轻重链可变区基因的基因序列与氨基酸序列。可变区的氨基酸序列及编码这些氨基酸的基因序列在针对FGF21及类似物治疗内分泌等代谢疾病药物研发方面具有重大作用，也可用于构建各种基因工程抗体。
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公开(公告)号：CN102603886B
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201210031800.0
申请日：2012-02-14
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K14/50 , C12N15/12 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12N15/70 , A61K38/18 , A61P3/10 , A61P3/06 , A61P3/00
Abstract: 本发明公开了突变的成纤维细胞生长因子（FGF-21）及其在治疗内分泌疾病中的用途。本发明突变的成纤维细胞生长因子-21的氨基酸序列为SEQIDNO:2所示，其编码基因序列为SEQIDNO:1所示。本发明以野生型FGF-21为模板，通过下游引物引入两个精氨酸（Arg），PCR后获得突变体，主要利用Arg的强碱性以及它在生理条件下带正电荷，不仅上调FGF-21的等电点，还帮助FGF-21结合到细胞膜表面。动物学试验结果表明，本发明突变的FGF-21能够更加有效降低动物体内的血糖水平，此外，本发明突变体在降低血糖水平方面还具有起效快、药效持续时间长等优点。本发明突变的FGF-21可作为药物治疗糖尿病，代谢综合症或脂代谢紊乱等内分泌疾病。
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公开(公告)号：CN118546232B
公开(公告)日：2025-02-11
申请号：CN202410992761.3
申请日：2024-07-24
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明涉及一种植物源重组IL‑37a蛋白及其制备方法和应用，属于生物医药技术领域。为解决现有表达系统无法实现IL‑37a蛋白高产量、低成本生产的问题，本发明提供了一种植物源重组IL‑37a蛋白及其制备方法和应用。本发明基于IL‑37a蛋白设计了IL‑37a突变单体重组序列，并在IL‑37a突变单体重组序列基础上与三种蛋白质标签CTB、CPP、TEV和2种信号肽SP1和SP2设计了三种重组IL‑37a蛋白编码基因，并借助植物生物反应器烟草生产出植物源重组IL‑37a蛋白，1g烟草叶片可提取4mg总蛋白，纯化后目的蛋白含量约为0.2mg，实现了重组IL‑37a蛋白的高产量、低成本生产。
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公开(公告)号：CN118662623A
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202410992788.2
申请日：2024-07-24
Applicant: 东北农业大学
IPC: A61K39/125 , A61P31/14 , C07K19/00 , C12N15/82 , C07K1/22
Abstract: 本发明涉及一种植物源口服免疫的手足口病疫苗及其制备方法，属于生物医药技术领域。为解决市面上缺少更易于为儿童接种免疫的针对CA16病毒的疫苗及同时针对CA16病毒与EV71病毒的二价疫苗的问题，本发明提供了一种植物源口服免疫的手足口病疫苗及其制备方法。本发明基于手足口病最常见的两种致病病毒EV71病毒和CA16病毒的抗原决定簇与三种口服疫苗免疫佐剂CTB、VHH和CPP设计了六种重组抗原基因，并借助植物生物反应器生产出可经由黏膜直接吸收的植物源重组抗原蛋白。在口服条件下六种植物源重组抗原蛋白均能够诱导小鼠体内的黏膜免疫和体液免疫反应，具备口服疫苗的免疫原性，进而获得了六种口服免疫的手足口病疫苗。
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公开(公告)号：CN101967485A
公开(公告)日：2011-02-09
申请号：CN201010274258.2
申请日：2010-09-07
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了人FGF21突变基因及制备重组人FGF21蛋白方法。本发明将人FGF21基因进行突变，突变后碱基序列为SEQ IDNO.1所示，突变后的基因在原核细胞中的表达量有显著提高。本发明还提供了一种提高人FGF21蛋白表达量的方法，包括：将6×His标签基因、SUMO标签基因、羟胺切割位点基因和人FGF21突变基因依次连接在一起后得到SEQ ID NO.3所示基因；将其与表达载体相连接，得到重组表达载体；将其转化宿主细胞；培养，诱导重组蛋白表达，收集并纯化所表达的蛋白，羟胺切割，再纯化，即得。本发明方法具有特异性好、稳定性高、能在较宽范围的反应环境体系中保持切割活性、制备成本低等优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102603886A
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201210031800.0
申请日：2012-02-14
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K14/50 , C12N15/12 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12N15/70 , A61K38/18 , A61P3/10 , A61P3/06 , A61P3/00
Abstract: 本发明公开了突变的成纤维细胞生长因子（FGF-21）及其在治疗内分泌疾病中的用途。本发明突变的成纤维细胞生长因子-21的氨基酸序列为SEQIDNO:2所示，其编码基因序列为SEQIDNO:1所示。本发明以野生型FGF-21为模板，通过下游引物引入两个精氨酸（Arg），PCR后获得突变体，主要利用Arg的强碱性以及它在生理条件下带正电荷，不仅上调FGF-21的等电点，还帮助FGF-21结合到细胞膜表面。动物学试验结果表明，本发明突变的FGF-21能够更加有效降低动物体内的血糖水平，此外，本发明突变体在降低血糖水平方面还具有起效快、药效持续时间长等优点。本发明突变的FGF-21可作为药物治疗糖尿病，代谢综合症或脂代谢紊乱等内分泌疾病。
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公开(公告)号：CN118662625A
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202410992807.1
申请日：2024-07-24
Applicant: 东北农业大学
IPC: A61K39/215 , A61P31/14 , C07K19/00 , C12N15/82 , C07K1/22
Abstract: 本发明涉及一种植物源新冠病毒鼻喷疫苗及其制备方法，属于生物医药技术领域。为解决现有新冠病毒疫苗针对Omicron变异株不具备特异性及疫苗生产方法成本高、效率低的问题，本发明提供了一种植物源新冠病毒鼻喷疫苗及其制备方法。本发明基于新冠病毒Omicron变异株S‑RBD蛋白与N‑NTD蛋白序列与三种融合蛋白元件植物信号肽SP、细胞穿膜肽CPP和霍乱毒素B亚基CTB优化设计了六种重组抗原基因，借助植物生物反应器生产出可经由黏膜直接吸收的重组抗原蛋白，进而获得了六种针对新冠病毒Omicron变异株的鼻喷疫苗。试验证实六种重组抗原蛋白经鼻给药均能够诱导小鼠体内的体液免疫反应，具备鼻喷疫苗的免疫原性。
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公开(公告)号：CN118546232A
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202410992761.3
申请日：2024-07-24
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明涉及一种植物源重组IL‑37a蛋白及其制备方法和应用，属于生物医药技术领域。为解决现有表达系统无法实现IL‑37a蛋白高产量、低成本生产的问题，本发明提供了一种植物源重组IL‑37a蛋白及其制备方法和应用。本发明基于IL‑37a蛋白设计了IL‑37a突变单体重组序列，并在IL‑37a突变单体重组序列基础上与三种蛋白质标签CTB、CPP、TEV和2种信号肽SP1和SP2设计了三种重组IL‑37a蛋白编码基因，并借助植物生物反应器烟草生产出植物源重组IL‑37a蛋白，1g烟草叶片可提取4mg总蛋白，纯化后目的蛋白含量约为0.2mg，实现了重组IL‑37a蛋白的高产量、低成本生产。
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公开(公告)号：CN107142278A
公开(公告)日：2017-09-08
申请号：CN201710554321.X
申请日：2017-07-10
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C07K14/755 , A61K38/37 , A61P7/04
CPC classification number: C12N15/85 , A61K38/37 , C07K14/755 , C12N5/0682 , C12N2510/02 , C12N2800/107 , C12N2800/22
Abstract: 本发明属于生物制药领域，涉及人凝血因子Ⅷ重链FⅧH和轻链FⅧL基因表达载体的构建、哺乳动物细胞的转染、FⅧH和FⅧL高效表达细胞株的筛选和鉴定、B区缺失的成熟人凝血因子Ⅷ的制备、活性检定及在药学上的应用。本发明涉及一种新型B区缺失FⅧ因子的制备方法。通过人工合成方法获得适于在CHO细胞系中表达的重链FⅧH基因和轻链FⅧL基因。两者分别由CMV启动子启动，表达单元中含有增强表达的SV40Enhancer和Intron，引入GS基因和EGFP基因便于对高表达细胞株进行筛选克隆。将两个基因的表达产物混合以后，其混合物具备天然FⅧ因子的凝血活性。
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公开(公告)号：CN103923207B
公开(公告)日：2016-03-09
申请号：CN201410150150.0
申请日：2014-04-08
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种FGF-21突变体蛋白的制备及其在治疗非酒精性脂肪肝中的应用。本发明成纤维细胞生长因子-21突变体的氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示，其编码基因序列为SEQ ID NO：1所示。本发明在获得了FGF-21突变体基因后，在宿主细胞中高效可溶性地表达了FGF-21突变体蛋白，经过一系列的蛋白纯化步骤获得了FGF-21突变体蛋白。动物学试验结果表明，本发明的FGF-21突变体能够更加有效降低非酒精性脂肪肝模型动物体内的血脂水平，改善肝脏内脂肪堆积且能显著改善肝脏功能。本发明的FGF-21突变体可用于制备非酒精性脂肪肝药物。
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