公开(公告)号：CN107142278A

公开(公告)日：2017-09-08

申请号：CN201710554321.X

申请日：2017-07-10

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 尹杰超 ,  李德山 ,  王文飞 ,  袁清艳 ,  郑琦 ,  黄涛

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C07K14/755 ,  A61K38/37 ,  A61P7/04

CPC classification number: C12N15/85 ,  A61K38/37 ,  C07K14/755 ,  C12N5/0682 ,  C12N2510/02 ,  C12N2800/107 ,  C12N2800/22

Abstract: 本发明属于生物制药领域，涉及人凝血因子Ⅷ重链FⅧH和轻链FⅧL基因表达载体的构建、哺乳动物细胞的转染、FⅧH和FⅧL高效表达细胞株的筛选和鉴定、B区缺失的成熟人凝血因子Ⅷ的制备、活性检定及在药学上的应用。本发明涉及一种新型B区缺失FⅧ因子的制备方法。通过人工合成方法获得适于在CHO细胞系中表达的重链FⅧH基因和轻链FⅧL基因。两者分别由CMV启动子启动，表达单元中含有增强表达的SV40Enhancer和Intron，引入GS基因和EGFP基因便于对高表达细胞株进行筛选克隆。将两个基因的表达产物混合以后，其混合物具备天然FⅧ因子的凝血活性。