公开(公告)号：CN101967485A

公开(公告)日：2011-02-09

申请号：CN201010274258.2

申请日：2010-09-07

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 任桂萍 ,  李德山 ,  高华山 ,  刘铭瑶 ,  王文飞

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/63 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C07K14/50

Abstract: 本发明公开了人FGF21突变基因及制备重组人FGF21蛋白方法。本发明将人FGF21基因进行突变，突变后碱基序列为SEQ IDNO.1所示，突变后的基因在原核细胞中的表达量有显著提高。本发明还提供了一种提高人FGF21蛋白表达量的方法，包括：将6×His标签基因、SUMO标签基因、羟胺切割位点基因和人FGF21突变基因依次连接在一起后得到SEQ ID NO.3所示基因；将其与表达载体相连接，得到重组表达载体；将其转化宿主细胞；培养，诱导重组蛋白表达，收集并纯化所表达的蛋白，羟胺切割，再纯化，即得。本发明方法具有特异性好、稳定性高、能在较宽范围的反应环境体系中保持切割活性、制备成本低等优点。