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公开(公告)号:CN117248042A
公开(公告)日:2023-12-19
申请号:CN202311140058.1
申请日:2023-09-06
Applicant: 上海市质量监督检验技术研究院
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/225
Abstract: 本发明公开了一种乳制品中副干酪乳杆菌活菌数字PCR定量检测方法,使用以下引物和探针序列:正向引物cad A‑F:CCGGGTGCATTGGTGATT和CCTGGTGCATTGGTGATT的混合物;反向引物cad A‑R:CACATCCCCGCCTTTGATC;探针cad A‑P:CGCCCCCGTCAGCAATGTTGTC。本发明的乳制品中副干酪乳杆菌ddPCR定量检测方法具有良好的特异性,同其他常见乳酸菌和食源性致病菌均无交叉反应,最低定量限为9拷贝/20μL。采用本发明的引物和探针组用于检测时,样品中菌浓度在105CFU/g~107CFU/g范围内的变异系数CV均小于25%,满足国际上对核酸定量方法的验证要求,具有良好的重复性。
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公开(公告)号:CN117165699A
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202311140241.1
申请日:2023-09-06
Applicant: 上海市质量监督检验技术研究院
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/225
Abstract: 本发明公开了一种乳制品中鼠李糖乳杆菌活菌数字PCR定量检测方法,使用以下引物和探针序列:正向引物LRCDS17F:TCTTGGCAGTGGCGTCACT;反向引物LRCDS17R:AAATCGAAGCAGCTAACACTGAAGT;探针LRCDS17P:TTTCGCCATTCTTTGCATCAATCTGCTT。本发明的乳制品中鼠李糖乳杆菌活菌数字PCR定量检测方法对于鼠李糖乳杆菌具有良好的特异性,与其他常见乳酸菌及食源性致病菌检测均无交叉反应,且ddPCR定量检测结果与GB 4789.35计数结果无显著统计学差异,适用于添加鼠李糖乳杆菌的乳制品中鼠李糖乳杆菌的快速定量检测。
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公开(公告)号:CN116926219A
公开(公告)日:2023-10-24
申请号:CN202311140124.5
申请日:2023-09-06
Applicant: 上海市质量监督检验技术研究院
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/23
Abstract: 本发明公开了一种乳制品中嗜酸乳杆菌活菌数字PCR定量检测方法,使用以下引物和探针序列:正向引物NCFM P F2:TGCCGCCCTTGTAGTCTTTA;反向引物NCFM P R2:GGCAACTTGATCGCTTTACT;探针NCFM P2:TCGCATTAGTGTGCAACCCATCTGGA。本发明的乳制品中嗜酸乳杆菌ddPCR定量检测方法具有良好的特异性,同其他常见乳酸菌和食源性致病菌均无交叉反应。采用本发明的引物和探针组用于检测时,在整个定量检测动态范围内,针对嗜酸乳杆菌polA基因的测定结果变异系数CV均小于25%,满足国际上对核酸定量方法的验证要求,具有良好的重复性。
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公开(公告)号:CN114277161A
公开(公告)日:2022-04-05
申请号:CN202011040182.7
申请日:2020-09-28
Applicant: 上海市质量监督检验技术研究院 , 上海昂朴生物科技有限公司 , 泰州昂朴医学检验有限公司
Abstract: 本发明提供了一种基于高通量测序技术快速获得杀菌型乳制品中益生菌耐药基因的方法,其是先提取杀菌型乳制品的DNA,然后通过高通量测序技术结合生物信息学方法分析杀菌型乳制品中益生菌携带的耐药基因。本发明的基于高通量测序技术快速获得杀菌型乳制品中益生菌耐药基因的方法,可以对杀菌型乳制品中乳酸菌耐药菌基因进行了高效快速的筛选,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN110373349A
公开(公告)日:2019-10-25
申请号:CN201910571273.4
申请日:2019-06-28
Applicant: 上海市质量监督检验技术研究院
Abstract: 本发明公开了一种产维生素B12的菌株,该菌株的保藏号为GDMCC No.60674。本发明还公开了所述的产维生素B12的菌株GDMCC No.60674用于生产微生素B12的应用。所述的产维生素B12的菌株GDMCC No.60674通过液体静置培养可以发酵生产维生素B12,且该菌株属于Lysinibacillus属,而目前没有Lysinibacillus属产维生素B12的报道,因此菌株GDMCC No.60674具有良好的工业化应用价值。
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公开(公告)号:CN112795673A
公开(公告)日:2021-05-14
申请号:CN202110181076.9
申请日:2021-02-09
Applicant: 上海市质量监督检验技术研究院
Abstract: 本发明公开了一种食品中克罗诺杆菌属的CRISPR检测方法,包括:步骤一、以待测样品的DNA为模板进行PCR扩增,获得PCR扩增产物;用于PCR扩增的反应体系中含有扩增克罗诺杆菌属成分的特异性引物对;步骤二、将PCR扩增产物加入CRISPR反应体系进行CRISPR反应,CRISPR反应体系包括Cas12b蛋白、Cas12b‑tracrRNA、crRNA和探针;步骤三、检测CRISPR反应荧光强度变化,根据曲线判读待检测样品中是否存在克罗诺杆菌属核酸。本发明还公开了一种用于检测食品中克罗诺杆菌属的CRISPR试剂盒及其应用。采用本发明的CRISPR检测方法,可以提高克罗诺杆菌属检测特异性。
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公开(公告)号:CN118600054A
公开(公告)日:2024-09-06
申请号:CN202410757160.4
申请日:2024-06-13
Applicant: 上海市质量监督检验技术研究院
Abstract: 本发明公开了一种发酵乳中活性益生菌的三重数字PCR定量检测方法,所述活性益生菌为嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、和动物双歧杆菌,所述三重数字PCR定量检测方法使用的引物和探针序列为:嗜酸乳杆菌的引物和探针序列如SEQ ID NO.1‑3所示;鼠李糖乳杆菌的引物和探针序列如SEQ ID NO.4‑6所示;动物双歧杆菌的引物和探针序列如SEQ ID NO.7‑9所示。本发明的三重数字PCR定量检测方法所使用的引物和探针对于这三种活性益生菌具有很好的特异性,相互之间无交叉反应,并且灵敏度高、重复性好。
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公开(公告)号:CN112795673B
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202110181076.9
申请日:2021-02-09
Applicant: 上海市质量监督检验技术研究院
Abstract: 本发明公开了一种食品中克罗诺杆菌属的CRISPR检测方法,包括:步骤一、以待测样品的DNA为模板进行PCR扩增,获得PCR扩增产物;用于PCR扩增的反应体系中含有扩增克罗诺杆菌属成分的特异性引物对;步骤二、将PCR扩增产物加入CRISPR反应体系进行CRISPR反应,CRISPR反应体系包括Cas12b蛋白、Cas12b‑tracrRNA、crRNA和探针;步骤三、检测CRISPR反应荧光强度变化,根据曲线判读待检测样品中是否存在克罗诺杆菌属核酸。本发明还公开了一种用于检测食品中克罗诺杆菌属的CRISPR试剂盒及其应用。采用本发明的CRISPR检测方法,可以提高克罗诺杆菌属检测特异性。
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公开(公告)号:CN110373349B
公开(公告)日:2020-03-27
申请号:CN201910571273.4
申请日:2019-06-28
Applicant: 上海市质量监督检验技术研究院
Abstract: 本发明公开了一种产维生素B12的菌株,该菌株的保藏号为GDMCC No.60674。本发明还公开了所述的产维生素B12的菌株GDMCC No.60674用于生产微生素B12的应用。所述的产维生素B12的菌株GDMCC No.60674通过液体静置培养可以发酵生产维生素B12,且该菌株属于Lysinibacillus属,而目前没有Lysinibacillus属产维生素B12的报道,因此菌株GDMCC No.60674具有良好的工业化应用价值。
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