灰略红链霉菌果胶裂解酶编码基因及其外源表达和应用

    公开(公告)号:CN106636046A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201610729000.4

    申请日:2016-08-25

    Abstract: 本发明公开一种克隆自灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)的新型果胶裂解酶编码基因、体外表达方法及其酶学特征。本发明通过将果胶裂解酶基因序列连接到表达载体上,进而得到诱导合成果胶裂解酶的转基因重组大肠杆菌。本发明克服现有技术中由于果胶裂解酶在生物体内酶表达量和活性较低导致的应用范围和效果严重受限等不足,实现其体外的高效表达。此外,本发明通过添加可溶性聚组氨酸标签,不仅提高了该重组果胶裂解酶的活性和表达量,而且便于表达产物的后续纯化;测定结果表明,该果胶裂解酶是一种碱性、耐高温裂解酶,对多种重金属离子及酶活性抑制剂具有较强的耐受能力。本发明为新型果胶裂解酶制剂的开发与制备奠定了重要的基础。

    生物发酵一体化有机肥制备方法

    公开(公告)号:CN105924246A

    公开(公告)日:2016-09-07

    申请号:CN201610256609.4

    申请日:2016-04-25

    CPC classification number: Y02W30/43 C05C9/00 C05F17/00 C05F11/00 C05F11/08

    Abstract: 一种生物发酵一体化有机肥制备方法,通过将用于秸秆降解的复合菌剂预发酵后添加入堆肥,通过有氧发酵的方式实现有机肥制备;该复合菌剂,由作为载体的麦麸和复合菌组成,其中菌液的成分为:复合菌Ⅰ、复合菌Ⅱ、复合菌Ⅲ、辅助复合菌以及水。本发明全程高通氧,保证生物发酵的好氧环境;发酵添加的菌种均为抗逆性能力较强的微生物,在常温条件下具有较长的活性周期,为连续发酵的开展提供了重要的理论基础;采用可明显缩短秸秆降解发酵周期,使发酵周期缩短至10天内。因此,本发明能够最大程度的提高有机肥的生产速度,缩减生产成本,为秸秆生物有机肥的发酵生产奠定了基础。

    一种灰略红链霉菌耐高温中性蛋白酶及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN106636041A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201610711601.2

    申请日:2016-08-23

    Abstract: 本发明公开了一种灰略红链霉菌耐高温中性蛋白酶及其编码基因和应用。该蛋白酶基因从灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)克隆得到,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,上述编码的耐高温中性蛋白酶,其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。本发明通过在重组蛋白C端添加聚组氨酸标签(HIS6·Tag),保证了蛋白活性的同时,也便于蛋白酶的纯化。本发明的蛋白酶具有较宽的适用温度和pH范围,特别是在较高温度55℃下能表现出很好的酶活性;且对多种金属离子及酶活性抑制剂(EDTA、DTT、SDS和NaN3)均有较强的耐受能力。

    一种灰略红链霉菌果胶酯酶及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN106636035A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201610711425.2

    申请日:2016-08-23

    Abstract: 本发明公开了一种灰略红链霉菌果胶酯酶及其编码基因和应用。该果胶酯酶基因从灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)克隆得到,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1或其密码子优化后的SEQ ID NO.2所示,上述编码的果胶酯酶,其氨基酸序列为SEQ ID NO.3,以及该果胶酯酶及其编码基因在降解果胶中的应用。本发明通过对目的蛋白添加可溶性标签和目的蛋白的周外空间表达,保证了蛋白生物活性的同时便于后续蛋白的纯化。该酶是一种碱性、耐高温的果胶水解酶,该酶对多种金属离子及酶活性抑制剂均有很强的耐受能力,因此在实际的生产和应用中具有重要的意义。

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