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公开(公告)号:CN1736482A
公开(公告)日:2006-02-22
申请号:CN200510041456.3
申请日:2005-08-08
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K39/275 , C12N15/09 , C12N15/86 , A61P31/16
Abstract: 重组鸡痘病毒疫苗rFPV-12LSH5H9及其构建方法、用途,涉及一种重组鸡痘病毒疫苗。先将含H5亚型和含H9亚型AIV HA基因片段置于各自合适的启动子下游,背向串联插入到含FPV复制非必需片段FPV1-2和报告基因的插入鸡痘病毒表达载体p12-18中构建成转移载体p12LSH5H9后,再将转移载体p12LSH5H9转染已感染wt-FPV的鸡胚成纤维细胞,通过同源重组获得共表达H5和H9亚型AIV HA基因的rFPV-12LSH5H9,是一种不受母源抗体干扰的重组鸡痘病毒活疫苗,其方法科学、可靠性强,获得的疫苗稳定性好,纯度高,可用于防治H5亚型、H9亚型禽流感。
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公开(公告)号:CN1616108A
公开(公告)日:2005-05-18
申请号:CN200410064940.3
申请日:2004-10-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 新城疫新型粘膜疫苗及其构建方法,涉及一种新城疫疫苗以及构建的方法,先通过反转录—聚合酶链式RT-PCR反应,扩增出新城疫病毒融合蛋白F基因;再将F基因与质粒pVAX1进行连接反应,构建DNA疫苗pVAX1-F;最后将质粒pVAX1-F转化进减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207中,最终获得DNA长度为4647bp的新城疫病毒DNA疫苗。本发明采用以减毒鼠伤寒沙门氏菌运送新城疫病毒DNA疫苗,构建新城疫新型粘膜疫苗SL7207(pVAX1-F)。通过口服方式(饮水或拌料)对家禽(鸡、鹅、鸽等)直接进行免疫,较传统的新城疫弱毒疫苗安全,且较传统的新城疫油乳剂灭活疫苗使用方便,可克服母源抗体干扰以及油乳剂灭活疫苗不能产生粘膜免疫应答的缺陷,并能提供对新城疫病毒强毒攻击的保护。
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公开(公告)号:CN1546669A
公开(公告)日:2004-11-17
申请号:CN200310112640.3
申请日:2003-12-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种DNA疫苗载体以及构建的方法,将扩增的鼠伤寒沙门氏菌asd用pVUII和PagI双酶切;用pVUII和PagI双酶切质粒pVAX1,去除卡那霉素抗性基因;然后将asd基因与去除卡那霉素抗性基因的载体进行连接,构成长度为3114bp的新型非抗性筛选DNA疫苗载体。本发明采用染色体-质粒平衡致死系统代替抗生素抗性基因来作为DNA疫苗扩增的选择性标记,构建新型非抗性筛选DNA疫苗载体,从而避免了抗生素抗性基因的潜在性危险问题。
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公开(公告)号:CN119080945A
公开(公告)日:2024-12-06
申请号:CN202410492507.7
申请日:2024-04-23
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种用于养禽场H7N9亚型禽流感病毒常态化监测的重组蛋白及其制备方法和应用,本发明将DIVA检测多肽与大肠杆菌硫氧还蛋白(TrxA)进行融合,在原核表达系统中表达重组融合蛋白。此外,利用纯化得到的多肽融合蛋白作为抗原建立了ELISA方法。该方法仅能够与H7N9亚型禽流感病毒感染鸡血清反应。在大肠杆菌中表达、纯化重组蛋白的费用显著低于化学合成多肽,适于在养禽场开展常态化的疫病监测。本发明提供的重组融合蛋白及其检测方法为养禽场开展常态化的H7N9亚型AIV检测提供了廉价、高效的诊断抗原与技术。
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公开(公告)号:CN118222508A
公开(公告)日:2024-06-21
申请号:CN202410370123.8
申请日:2024-03-29
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了1株抗欧亚类禽并兼顾Pdm/09进化谱系H1亚型猪流感病毒HA蛋白的中和性单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体命名为5F3,保藏编号为CCTCC NO:C2022145。该单克隆抗体靶向HA蛋白,不仅能够特异识别包含G4在内多种基因型的欧亚类禽H1N1亚型猪流感病毒,而且对于2009大流行(Pdm/09)H1N1亚型的猪流感病毒也具有良好反应性,并能结合人源和禽源H1N1亚型流感病毒,显示出针对H1亚型流感病毒的广谱作用特性。本发明的单克隆抗体经鸡胚中和试验和小鼠预防保护性试验证明,具有较强的中和活性,有望应用于H1N1亚型猪流感病毒引起的猪的疾病以及可能的人的感染的诊断和防治。
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公开(公告)号:CN116716353A
公开(公告)日:2023-09-08
申请号:CN202310679602.3
申请日:2023-06-09
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/867 , C12N5/10 , C12N15/62 , C12N7/00 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/91 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及表达H9N2亚型禽流感病毒全长NS1基因MDCK细胞系及其构建方法和应用,通过对H9N2AIV NS1基因进行扩增,并用同源重组的方法整合到phage‑bsd载体上构建了phage‑bsd‑NS1‑Flag质粒,用慢病毒感染的方法获得了表达NS1‑Flag蛋白的MDCK多克隆细胞系,在blasticidin抗性筛选及亚克隆后得到表达NS1‑Flag蛋白的MDCK单克隆细胞系2G8D5。所述细胞系能稳定表达NS1‑Flag蛋白,有效抑制干扰素水平,还能提高NS1基因截短减毒活疫苗rTX‑NS1‑128(mut)的滴度,以解决产量低,成本高的问题。
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公开(公告)号:CN116585463A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310213348.8
申请日:2023-03-08
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K39/145 , A61K9/51 , A61K47/46 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种红细胞膜包覆的禽流感病毒样颗粒纳米疫苗及其制备方法与应用,该纳米疫苗通过红细胞膜包覆重组的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒,所述H7N9亚型禽流感病毒样颗粒同时含有HA蛋白、NA蛋白和M1蛋白。本发明的技术方案通过红细胞膜的包裹使流感病毒样颗粒疫苗可有效躲避生物屏障,进行全身的血液循环,实现纳米疫苗在脾脏中的蓄积,从而提高病毒样颗粒疫苗的生物相容性、在体内的循环时间,并降低机体免疫清除率,显著提升疫苗的体液免疫和细胞免疫效果。本发明为预防H7N9亚型禽流感病毒感染提供了一种新的方法,也为流感病毒新型疫苗的开发奠定了基础。
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公开(公告)号:CN112079905B
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN202011000033.8
申请日:2020-09-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/11 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/866 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种禽流感病毒样颗粒抗原、疫苗及其制备方法和应用,将一株基于串联表达H7N9亚型禽流感病毒HA、NA、M1基因的重组杆状病毒转染昆虫细胞自行组装形成禽流感病毒样颗粒抗原;将本发明所制备的病毒样颗粒抗原用于制备疫苗。本发明制备的疫苗免疫鸡群后能够产生较高滴度的HI抗体、中和抗体和IgY抗体,能够提供针对H7N9亚型高致病性禽流感病毒100%的临床保护,并能有效抑制排毒。本发明不依赖于鸡胚,生产成本低、周期短;仅以低剂量一次免疫就可诱导较强的保护能力。本发明为VLP疫苗的工业化生产提供了基础。
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公开(公告)号:CN112079904B
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN202011000015.X
申请日:2020-09-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/11 , C12N15/62 , C12N15/866 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种重组的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒及其制备方法和应用,基于重组杆状病毒昆虫细胞培养系统,分别构建了表达H7N9高致病性禽流感病毒HA蛋白、NA蛋白、M1蛋白的重组杆状病毒。将三株重组杆状病毒共感染悬浮的昆虫细胞,可收获到在细胞内自行组装的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒。经超滤管与不同梯度浓度蔗糖浓缩纯化后,与佐剂混和乳化制备疫苗。制备的疫苗免疫鸡可诱导机体产生特异性抗体,具有免疫原性强、安全性好、遗传稳定性高等优点。以致死剂量的H7N9亚型高致病性禽流感病毒攻击后,能够提供完全的临床保护且显著抑制鸡的排毒。本发明为预防H7N9亚型禽流感病毒感染提供了一种新的方法,也为流感病毒新型疫苗的开发奠定了基础。
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公开(公告)号:CN114230642A
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202111263546.2
申请日:2021-10-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/11 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种区分H7N9亚型禽流感病毒感染与免疫动物的多肽及检测方法,所述多肽序列为KNVPEIPKGRG。本发明用生物信息学方法筛选了一条跨越H7N9亚型AIV HA蛋白裂解位点的多肽,并以该多肽为基础建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)。该方法能够清晰地区分H7N9病毒感染与疫苗免疫动物,达到DIVA的目的。本发明提供的多肽可作为家禽或人H7N9亚型AIV的DIVA监测的新靶标,所建立的诊断方法在疫病防控与公共卫生领域有较好的应用潜力。
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