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公开(公告)号:CN101067123A
公开(公告)日:2007-11-07
申请号:CN200710021820.9
申请日:2007-04-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体是涉及一种镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因破壁方法。所说的镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因的破壁方法,其特征是,将噬菌体裂解基因克隆进受镁离子调控的表达载体pYS,再转化进宿主菌,然后通过控制Mg2+的浓度使裂解基因在宿主菌内表达。本发明将噬菌体裂解基因克隆进受镁离子调控的表达载体pYS,通过控制Mg2+的浓度可使裂解基因在大肠杆菌内表达,获得了在温和条件下宿主菌的有效自我裂解。
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公开(公告)号:CN1249242C
公开(公告)日:2006-04-05
申请号:CN200310112640.3
申请日:2003-12-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种DNA疫苗载体以及构建的方法,将扩增的鼠伤寒沙门氏菌asd用pVUII和PagI双酶切;用pVUII和PagI双酶切质粒pVAX1,去除卡那霉素抗性基因;然后将asd基因与去除卡那霉素抗性基因的载体进行连接,构成长度为3114bp的新型非抗性筛选DNA疫苗载体。本发明采用染色体-质粒平衡致死系统代替抗生素抗性基因来作为DNA疫苗扩增的选择性标记,构建新型非抗性筛选DNA疫苗载体,从而避免了抗生素抗性基因的潜在性危险问题。
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公开(公告)号:CN100352513C
公开(公告)日:2007-12-05
申请号:CN200410064940.3
申请日:2004-10-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 新城疫粘膜DNA疫苗及其构建方法,涉及一种新城疫疫苗以及构建的方法,先通过反转录-聚合酶链式RT-PCR反应,扩增出新城疫病毒融合蛋白F基因;再将F基因与质粒pVAX1进行连接反应,构建DNA疫苗pVAX1-F;最后将质粒pVAX1-F转化进减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207中,最终获得DNA长度为4647bp的新城疫病毒DNA疫苗。本发明采用以减毒鼠伤寒沙门氏菌运送新城疫病毒DNA疫苗,构建新城疫新型粘膜疫苗SL7207(pVAX1-F)。通过口服方式(饮水或拌料)对家禽(鸡、鹅、鸽等)直接进行免疫,较传统的新城疫弱毒疫苗安全,且较传统的新城疫油乳剂灭活疫苗使用方便,可克服母源抗体干扰以及油乳剂灭活疫苗不能产生粘膜免疫应答的缺陷,并能提供对新城疫病毒强毒攻击的保护。
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公开(公告)号:CN1616108A
公开(公告)日:2005-05-18
申请号:CN200410064940.3
申请日:2004-10-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 新城疫新型粘膜疫苗及其构建方法,涉及一种新城疫疫苗以及构建的方法,先通过反转录—聚合酶链式RT-PCR反应,扩增出新城疫病毒融合蛋白F基因;再将F基因与质粒pVAX1进行连接反应,构建DNA疫苗pVAX1-F;最后将质粒pVAX1-F转化进减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207中,最终获得DNA长度为4647bp的新城疫病毒DNA疫苗。本发明采用以减毒鼠伤寒沙门氏菌运送新城疫病毒DNA疫苗,构建新城疫新型粘膜疫苗SL7207(pVAX1-F)。通过口服方式(饮水或拌料)对家禽(鸡、鹅、鸽等)直接进行免疫,较传统的新城疫弱毒疫苗安全,且较传统的新城疫油乳剂灭活疫苗使用方便,可克服母源抗体干扰以及油乳剂灭活疫苗不能产生粘膜免疫应答的缺陷,并能提供对新城疫病毒强毒攻击的保护。
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公开(公告)号:CN1546669A
公开(公告)日:2004-11-17
申请号:CN200310112640.3
申请日:2003-12-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种DNA疫苗载体以及构建的方法,将扩增的鼠伤寒沙门氏菌asd用pVUII和PagI双酶切;用pVUII和PagI双酶切质粒pVAX1,去除卡那霉素抗性基因;然后将asd基因与去除卡那霉素抗性基因的载体进行连接,构成长度为3114bp的新型非抗性筛选DNA疫苗载体。本发明采用染色体-质粒平衡致死系统代替抗生素抗性基因来作为DNA疫苗扩增的选择性标记,构建新型非抗性筛选DNA疫苗载体,从而避免了抗生素抗性基因的潜在性危险问题。
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公开(公告)号:CN100510058C
公开(公告)日:2009-07-08
申请号:CN200710021820.9
申请日:2007-04-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体是涉及一种镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因破壁方法。所说的镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因的破壁方法,其特征是,将噬菌体裂解基因克隆进受镁离子调控的表达载体pYS,再转化进宿主菌,然后通过控制Mg2+的浓度使裂解基因在宿主菌内表达。本发明将噬菌体裂解基因克隆进受镁离子调控的表达载体pYS,通过控制Mg2+的浓度可使裂解基因在大肠杆菌内表达,获得了在温和条件下宿主菌的有效自我裂解。
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公开(公告)号:CN100497633C
公开(公告)日:2009-06-10
申请号:CN200710020573.0
申请日:2007-03-13
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体是涉及一种受镁离子调控的新型表达载体。所说的镁离子调控的表达载体,其特征在于,该载体为pYS,它含有镁离子运输蛋白基因mgtC/B的启动子序列Pmgt。本发明构建的表达载体受培养基中Mg2+浓度调控,无需外源添加诱导剂;为大肠杆菌原核表达系统的改进和发展提供了新的思路。
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公开(公告)号:CN101045934A
公开(公告)日:2007-10-03
申请号:CN200710020573.0
申请日:2007-03-13
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体是涉及一种受镁离子调控的新型表达载体。所说的镁离子调控的表达载体,其特征在于,该载体为pYS,它含有镁离子运输蛋白基因mgtC/B的启动子序列Pmgt。本发明构建的表达载体受培养基中Mg2+浓度调控,无需外源添加诱导剂;为大肠杆菌原核表达系统的改进和发展提供了新的思路。
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