抗欧亚类禽并兼顾Pdm/09进化谱系H1亚型猪流感病毒HA蛋白的中和性单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN118222508A

    公开(公告)日:2024-06-21

    申请号:CN202410370123.8

    申请日:2024-03-29

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了1株抗欧亚类禽并兼顾Pdm/09进化谱系H1亚型猪流感病毒HA蛋白的中和性单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体命名为5F3,保藏编号为CCTCC NO:C2022145。该单克隆抗体靶向HA蛋白,不仅能够特异识别包含G4在内多种基因型的欧亚类禽H1N1亚型猪流感病毒,而且对于2009大流行(Pdm/09)H1N1亚型的猪流感病毒也具有良好反应性,并能结合人源和禽源H1N1亚型流感病毒,显示出针对H1亚型流感病毒的广谱作用特性。本发明的单克隆抗体经鸡胚中和试验和小鼠预防保护性试验证明,具有较强的中和活性,有望应用于H1N1亚型猪流感病毒引起的猪的疾病以及可能的人的感染的诊断和防治。

    一种红细胞膜包覆的禽流感病毒样颗粒纳米疫苗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN116585463A

    公开(公告)日:2023-08-15

    申请号:CN202310213348.8

    申请日:2023-03-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种红细胞膜包覆的禽流感病毒样颗粒纳米疫苗及其制备方法与应用,该纳米疫苗通过红细胞膜包覆重组的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒,所述H7N9亚型禽流感病毒样颗粒同时含有HA蛋白、NA蛋白和M1蛋白。本发明的技术方案通过红细胞膜的包裹使流感病毒样颗粒疫苗可有效躲避生物屏障,进行全身的血液循环,实现纳米疫苗在脾脏中的蓄积,从而提高病毒样颗粒疫苗的生物相容性、在体内的循环时间,并降低机体免疫清除率,显著提升疫苗的体液免疫和细胞免疫效果。本发明为预防H7N9亚型禽流感病毒感染提供了一种新的方法,也为流感病毒新型疫苗的开发奠定了基础。

    一种禽流感病毒样颗粒抗原、疫苗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112079905B

    公开(公告)日:2022-06-14

    申请号:CN202011000033.8

    申请日:2020-09-22

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种禽流感病毒样颗粒抗原、疫苗及其制备方法和应用,将一株基于串联表达H7N9亚型禽流感病毒HA、NA、M1基因的重组杆状病毒转染昆虫细胞自行组装形成禽流感病毒样颗粒抗原;将本发明所制备的病毒样颗粒抗原用于制备疫苗。本发明制备的疫苗免疫鸡群后能够产生较高滴度的HI抗体、中和抗体和IgY抗体,能够提供针对H7N9亚型高致病性禽流感病毒100%的临床保护,并能有效抑制排毒。本发明不依赖于鸡胚,生产成本低、周期短;仅以低剂量一次免疫就可诱导较强的保护能力。本发明为VLP疫苗的工业化生产提供了基础。

    一种重组的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112079904B

    公开(公告)日:2022-06-14

    申请号:CN202011000015.X

    申请日:2020-09-22

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种重组的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒及其制备方法和应用,基于重组杆状病毒昆虫细胞培养系统,分别构建了表达H7N9高致病性禽流感病毒HA蛋白、NA蛋白、M1蛋白的重组杆状病毒。将三株重组杆状病毒共感染悬浮的昆虫细胞,可收获到在细胞内自行组装的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒。经超滤管与不同梯度浓度蔗糖浓缩纯化后,与佐剂混和乳化制备疫苗。制备的疫苗免疫鸡可诱导机体产生特异性抗体,具有免疫原性强、安全性好、遗传稳定性高等优点。以致死剂量的H7N9亚型高致病性禽流感病毒攻击后,能够提供完全的临床保护且显著抑制鸡的排毒。本发明为预防H7N9亚型禽流感病毒感染提供了一种新的方法,也为流感病毒新型疫苗的开发奠定了基础。

    表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒灭活疫苗及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN108888761A

    公开(公告)日:2018-11-27

    申请号:CN201810489385.0

    申请日:2018-05-21

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒疫苗及其制备方法与应用。该疫苗包括:重组杆状病毒rBac-JX148HA,该重组杆状病毒能够表达H7N9禽流感病毒主要免疫抗原HA蛋白,其免疫佐剂为SEPPIC佐剂;其中所述的HA蛋白的核酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明疫苗免疫鸡后,能诱导较高的抗体滴度、提供针对H7N9亚型高致病性禽流感病毒的完全临床保护、有效抑制排毒。该疫苗安全性高,克服了传统的鸡胚生产疫苗具有鸡胚供应不稳定、外源病毒污染、废弃物产量大等缺陷,在H7N9亚型禽流感的防控上具有较好的应用前景,且符合兽用疫苗利用悬浮细胞培养技术进行大规模生产的趋势。

    一株广谱结合多分支H5Nx亚型禽流感病毒HA蛋白的单克隆抗体及应用

    公开(公告)号:CN119241694A

    公开(公告)日:2025-01-03

    申请号:CN202411444167.7

    申请日:2024-10-16

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一株广谱结合多分支H5Nx亚型禽流感病毒HA蛋白的单克隆抗体及应用。所述单克隆抗体命名为1G10,属IgG1亚类,包含重链可变区和轻链可变区,其重链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO.5‑7所示的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3,轻链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO.8‑10所示的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3。所述单克隆抗体在间接免疫荧光试验、蛋白免疫印迹试验及中和试验中均能特异性识别HA蛋白。另外,所述单克隆抗体能够与2.3.2.1d、2.3.4.4b、2.3.4.4d等不同HA基因进化分支的H5N1、H5N6、H5N8等H5Nx亚型禽流感病毒发生特异性血凝抑制反应,表明该1G10单克隆抗体识别的抗原表位是H5亚型禽流感病毒的一个广谱性中和表位。通过鸡胚免疫逃逸试验和序列比对,筛选出1G10单克隆抗体识别的中和抗原表位包含HA蛋白第170和231位氨基酸位点,其突变显著影响抗原性。

    一种禽流感病毒样颗粒抗原、疫苗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112079905A

    公开(公告)日:2020-12-15

    申请号:CN202011000033.8

    申请日:2020-09-22

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种禽流感病毒样颗粒抗原、疫苗及其制备方法和应用,将一株基于串联表达H7N9亚型禽流感病毒HA、NA、M1基因的重组杆状病毒转染昆虫细胞自行组装形成禽流感病毒样颗粒抗原;将本发明所制备的病毒样颗粒抗原用于制备疫苗。本发明制备的疫苗免疫鸡群后能够产生较高滴度的HI抗体、中和抗体和IgY抗体,能够提供针对H7N9亚型高致病性禽流感病毒100%的临床保护,并能有效抑制排毒。本发明不依赖于鸡胚,生产成本低、周期短;仅以低剂量一次免疫就可诱导较强的保护能力。本发明为VLP疫苗的工业化生产提供了基础。

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