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公开(公告)号：CN111235082B
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN202010077232.2
申请日：2019-02-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防治领域，涉及黏附能力降低的牛支原体基因缺失的突变株。蛋白基因Mbov_0503从牛支原体HB0801基因组中克隆获得。根据大肠杆菌对密码子的偏爱性，对Mbov_0503基因进行了修饰，将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG，获得重组蛋白Mbov0503。本发明克隆的蛋白基因的序列如SEQ ID NO:13所示，编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:14所示。本发明的突变株从突变体库筛选的黏附缺陷株。该突变株对宿主EBL细胞的黏附能力，对MDBK细胞的跨膜传播能力及对细胞间紧密连接的破坏能力较野生株显著下降。可在牛支原体致病和防控中应用。
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公开(公告)号：CN110305878B
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN201910305619.6
申请日：2019-04-16
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域，涉及一种牛分枝杆菌卡介苗低黏附力及低侵袭力突变株B2909，该突变株含有牛分枝杆菌卡介苗FadD18的突变体基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，突变位点位于基因组3925305位点后，位于为FadD18基因序列的581位点后，是一种新结构基因和功能基因。本发明的突变株为低黏附力，低侵袭力，高生长速度，与野生菌株无形态学差异。突变株B2909保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2018866。本发明的突变基因及其突变株可望在牛分枝杆菌致病机理研究、免疫机制研究和制备防制牛结核病疫苗或药物中应用。
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公开(公告)号：CN112322763A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011394942.4
申请日：2020-12-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一套用于鉴定大肠杆菌F17菌毛黏附素基因的环介导等温扩增(LAMP)引物，以及基于该引物所建立的荧光定量LAMP检测方法。所述引物包括2条外引物、2条内引物及2条环引物，核苷酸序列如SEQ ID No.2‑7所示。本发明用于大肠杆菌F17黏附素基因即F17抗原型的鉴定，具有方法灵敏度高、特异性强，操作简单快速等优点。
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公开(公告)号：CN112301041A
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN202011073306.1
申请日：2020-10-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/31 , C12N15/10 , C07K14/30 , C07K16/12 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了牛支原体Mbov_0461基因及其编码的蛋白，属于动物传染病防治与生物技术领域。申请人以牛支原体(M.bovis)HB0801株为模板，设计引物，克隆和表达了Mbov_0461基因编码的蛋白P21，验证其具有免疫原性和反应原性，此外，该蛋白还可黏附胚胎牛肺上皮细胞(EBL)以及与纤连蛋白(Fn)结合，确定该蛋白是一种黏附蛋白，并且抗重组蛋白P21(rP21)的多克隆抗体能明显抑制M.bovis黏附EBL细胞，黏附功能与细菌毒力相关，因此M.bovis P21蛋白也是一种毒力相关蛋白。鉴于以上特性，P21蛋白有望成为M.bovis疫苗、诊断和治疗制剂研发的重要候选靶标。
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公开(公告)号：CN107304231B
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN201610237578.8
申请日：2016-04-18
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N1/21 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于微生物基因工程技术领域，具体涉及一种结核分枝杆菌融合蛋白及应用。利用软件预测三基因的B细胞结合位点的序列，通过Linker将结核分枝杆菌Rv0222，Rv2657c和Rv1509三个基因的B细胞结合位点序列串联，获得融合基因，其序列如SEQ ID NO：11所示。该融合基因包含在原核表达质粒中，含有该重组质粒的大肠杆菌保藏在CCTCC，保藏编号为CCTCC NO：M2016159。本发明还公开了该融合基因编码蛋白在制备检测活动性肺结核血清诊断试剂盒中作为诊断标识抗原蛋白的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111748507A
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN202010490088.5
申请日：2020-06-02
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体Mbov_0475基因突变株，属于动物传染病防治技术领域，所述突变株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.55，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2020082，所述Mbov_0475基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。该菌株具有诱导巨噬细胞增殖和提高巨噬细胞活力的作用，鉴于牛巨噬细胞是宿主抵抗病原感染的重要免疫细胞，该突变株可望在牛支原体免疫防治领域发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN111705026A
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN202010491009.2
申请日：2020-06-02
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体Mbov_0280基因突变株，属于动物传染病防治技术领域，所述突变株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.297，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2020085，所述Mbov_0280基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。该菌株相比野生菌株HB0801诱导宿主巨噬细胞凋亡的能力减弱，鉴于牛巨噬细胞作为宿主抵抗病原感染的重要免疫细胞，该突变株具有更低的毒力，同时有助于机体抵抗牛支原体感染，从而可望在牛支原体免疫防治领域发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN107043770B
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN201610084076.6
申请日：2016-02-05
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , C12Q1/6883
Abstract: 本发明属于动物生化免疫技术领域，具体涉及一组结核病相关的外周血淋巴细胞miRNA及其应用。本发明的外周血淋巴细胞hsa‑miRNA可以作为早期检测外周血淋巴细胞miRNA。所述外周血miRNA为联合使用。相关外周血hsa‑miRNA序列分别如下所述：1)hsa‑miR‑374b‑5p miRNA的序列如SEQ ID NO:1所示；2)hsa‑miR‑625‑3p的序列如SEQ ID NO:2所示；3)hsa‑miR‑362‑5p的序列如SEQ ID NO:3所示。本发明还公开了扩增上述hsa‑miRNA的三条引物序列。本发明的hsa‑miRNA可以作为早期检测人结核病的标志物使用。
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公开(公告)号：CN110763843A
公开(公告)日：2020-02-07
申请号：CN201911075572.5
申请日：2019-11-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/58 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体双抗夹心ELISA检测试剂盒，该试剂盒包括包被有牛支原体多克隆抗体的酶标板、辣根过氧化物酶标记的抗牛支原体MbovP579蛋白的单克隆抗体，所述单克隆抗体是由杂交瘤细胞株1A2分泌的，所述杂交瘤细胞株1A2保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2018219。本发明实现了针对牛支原体抗原的特异性检测，且能够检出牛支原体的敏感度为108CFU/mL。通过对样本进行预增菌处理，含低至1CFU/mL的牛支原体样本均可以达到检测敏感度标准。与现有技术相比，本发明具有操作简便、人员技术水平要求低、主观因素误差小、设备简单等优点，可以快速实现大批量样品的检测分析。
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公开(公告)号：CN110483625A
公开(公告)日：2019-11-22
申请号：CN201910537338.3
申请日：2019-06-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体假想蛋白MbovP732，该蛋白具有如序列表SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，编码所述蛋白的基因，具有如序列表SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。该蛋白具有反应原性和免疫原性，能特异性地与牛支原体野毒株反应，而不能与疫苗株反应，因此可用于鉴别牛支原体野毒株感染与疫苗株免疫。
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