公开(公告)号：CN111394366A

公开(公告)日：2020-07-10

申请号：CN202010153884.X

申请日：2020-03-07

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 陈颖钰 ,  师红铃 ,  郭爱珍 ,  李倩倩 ,  郭佳成 ,  胡长敏 ,  陈焕春

IPC: C12N15/31 ,  C12N1/20 ,  A61K39/04 ,  A61P31/06 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域，涉及牛分枝杆菌卡介苗低侵袭力突变株B2855，突变株B2855含有牛分枝杆菌卡介苗LipQ的突变体基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，突变位点位于基因组2757121位点后，位于为LipQ基因序列的564位点后，是一种新的结构基因和功能基因。本发明的突变株为低侵袭力，高胞内存活能力及高生长速度。突变株B2855保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2018865。本发明分离的突变基因及其突变株可望在牛分枝杆菌致病机理研究、免疫机制研究和制备防制牛结核病疫苗或药物中应用。

公开(公告)号：CN108660144A

公开(公告)日：2018-10-16

申请号：CN201710200623.7

申请日：2017-03-30

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  朱习芳 ,  董亚旗 ,  李茜茜 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈焕春

IPC: C12N15/55 ,  C12N9/16 ,  C12N9/22 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一种牛支原体多功能蛋白基因CDNPase，蛋白基因Mbov_0328是从牛支原体HB0801基因组中克隆获得。根据大肠杆菌对密码子的偏爱性，申请人对Mbov_0328基因进行了修饰，将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG，最终获得由大肠杆菌表达的重组蛋白rCDNPase。本发明克隆的蛋白的编码基因的核苷酸序列是SEQ ID NO:11中1-969位碱基所示的序列，其蛋白质的序列如SEQ ID NO:12所示。本发明的重组蛋白具有磷酸二酯酶和超小片段核酸酶的活性。

公开(公告)号：CN107176977A

公开(公告)日：2017-09-19

申请号：CN201610144587.2

申请日：2016-03-11

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  赵刚 ,  郭雨丝 ,  刘凯 ,  张慧 ,  陈曦 ,  陈颖钰 ,  胡长敏

IPC: C07K14/30 ,  C12N1/21 ,  G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及牛支原体MbovP730蛋白在自然感染和疫苗免疫鉴别中的应用。根据大肠杆菌的密码子偏爱性，对M.bovis HB0801的Mbov_730基因进行克隆，将Mbov_730基因修饰，将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中的色氨酸密码子UGG，进而在大肠杆菌中表达重组的牛支原体MbovP730蛋白。本发明的MbovP730蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示,该蛋白可作为抗原蛋白在制备鉴别诊断牛支原体野毒株感染和疫苗株免疫鉴别试剂盒中的应用。

公开(公告)号：CN107045063A

公开(公告)日：2017-08-15

申请号：CN201610084498.3

申请日：2016-02-06

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 陈颖钰 ,  王洁茹 ,  郭爱珍 ,  任宁宁 ,  葛盼 ,  胡长敏 ,  陈焕春

IPC: G01N33/68

CPC classification number: G01N33/68

Abstract: 本发明属于生化免疫和分析技术领域，具体涉及肺结核相关血清标识蛋白TIMP‐1及其应用。本发明利用细胞因子和全蛋白芯片对宿主蛋白进行筛选，提供了一种可检测肺结核相关血清生物标识蛋白即蛋白基质金属蛋白酶抑制因子TIMP‐1，该抑制因子TIMP‐1的蛋白质序列如SEQ ID NO：1所示。本发明的抑制因子TIMP‐1可在制备肺结核病血清诊断试剂盒中作为标识抗原蛋白应用。

公开(公告)号：CN104726413A

公开(公告)日：2015-06-24

申请号：CN201510054798.2

申请日：2015-02-01

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  赵刚 ,  陈曦 ,  汪乾坤 ,  张慧 ,  郭雨丝 ,  陈颖钰 ,  胡长敏

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/40 ,  G01N33/577 ,  G01N33/573

Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一株牛支原体NADH氧化酶的单克隆抗体。该单克隆抗体是由交瘤细胞株8B7分泌的，所述的NADH氧化酶是一种牛支原体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶，本发明修饰的NOX基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。公开了NOX基因的克隆和表达及纯化步骤，重组蛋白质rNOX单克隆抗体的制备步骤以及免疫荧光检测法的建立和初步应用的步骤及效果。所述的杂交瘤细胞株8B7保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：C2014221，该单克隆抗体能特异性地识别牛支原体。

公开(公告)号：CN103018442B

公开(公告)日：2014-11-19

申请号：CN201110286912.6

申请日：2011-09-23

Applicant: 华中农业大学 ,  武汉科前动物生物制品有限责任公司

Inventor： 何启盖 ,  马丰英 ,  李燕 ,  库旭钢 ,  邹浩勇 ,  陈焕春 ,  郭爱珍 ,  徐高原

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明属于动物病毒学与动物传染病学检测技术领域，具体涉及一种猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测试剂盒及应用。本发明通过基因工程重组技术得到两株表达猪肺炎支原体p46蛋白和p65蛋白的重组的大肠杆菌pGEX-KG-46和pGEX-KG-65。本发明的试剂盒包括以突变后猪肺炎支原体膜蛋白P46和P65基因表达蛋白共同作为抗原包被的酶标板和其他核心试剂。本发明公开了猪肺炎支原体膜蛋白P46和P65基因的克隆，定点突变以及P46和P65蛋白的表达及纯化方法。还公开了猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测方法。本发明制备的间接ELISA抗体检测试剂盒可用于猪肺炎支原体抗体的临床大规模检测和流行病学调查，具有广阔的市场前景。

公开(公告)号：CN103361317A

公开(公告)日：2013-10-23

申请号：CN201210098394.X

申请日：2012-04-06

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  姜勇 ,  陈颖钰 ,  张策 ,  郝丽影 ,  邹新峰 ,  陈焕春

IPC: C12N5/20 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种猕猴IFN-γ的单克隆抗体杂交瘤细胞及制备方法和应用，通过对ConA刺激的猕猴全血血细胞提取RNA，进行RT-PCR，获得总cDNA后对其进行扩增得到猕猴IFN-γ基因，并通过载体体外表达和纯化获得猕猴IFN-γ，用纯化的猕猴IFN-γ免疫小鼠后，分离被免疫的小鼠脾脏B细胞并采用杂交瘤技术获得高效表达猕猴IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞，MmIFN-γ2F6，CCTCCNO：C201235，该猕猴IFN-γ单抗可与猕猴IFN-γ特异性结合，用于探测抗原刺激猕猴全血后上清中的猕猴IFN-γ。该猕猴IFN-γ单抗可以与天然猕猴IFN-γ特异性结合，在用于特异性检测猕猴IFN-γ时敏感度可以达到125pg/ml，达到应用于结核病检测中所要求的敏感度。

公开(公告)号：CN102732473A

公开(公告)日：2012-10-17

申请号：CN201110087938.8

申请日：2011-04-08

Applicant: 华中农业大学 ,  武汉科前动物生物制品有限责任公司

Inventor： 何启盖 ,  马丰英 ,  邹浩勇 ,  陈焕春 ,  郭爱珍 ,  徐高原 ,  吴斌 ,  张灏

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C12N15/31 ,  A61K39/116 ,  A61K39/112 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  C12R1/42 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明属于动物细菌基因工程技术领域，具体涉及一种不含抗性标记表达猪肺炎支原体主要免疫原性膜蛋白的重组猪霍乱沙门氏菌的构建、疫苗制备及应用。本发明得到一株不含抗性标记表达猪肺炎支原体p46蛋白的猪霍乱沙门氏菌C500(pYA-46)，其保藏号为CCTCC NO：M2011106，该重组株缺失了猪霍乱沙门氏菌生长所必需的asd基因，含有能在该重组株中表达asd基因和猪肺炎支原体p46蛋白的质粒。本发明还公开了该重组株制备猪霍乱沙门氏菌和猪支原体肺炎疫苗的方法及其应用。本发明制备的二价疫苗可刺激猪产生抵抗猪霍乱沙门氏菌和猪肺炎支原体的免疫反应，有效防止猪霍乱沙门氏菌和猪肺炎支原体的感染。

公开(公告)号：CN102649948A

公开(公告)日：2012-08-29

申请号：CN201110043444.X

申请日：2011-02-23

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 刘正飞 ,  定明 ,  范强 ,  郭爱珍 ,  高觉婧 ,  陈焕春

IPC: C12N7/01 ,  A61K39/265 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于动物传染病基因工程技术领域。具体涉及一种牛传染性鼻气管炎ΔTK/ΔgE基因缺失标志活疫苗及制备方法。该毒株保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO：V201104。所述的重组牛传染性鼻气管炎病毒毒株缺失了TK和gE基因，插入了EGFP表达盒。制备的牛传染性鼻气管炎ΔTK/ΔgE基因缺失标志活疫苗毒力大大降低，潜伏的病毒也不易被激活，具有很高的安全性。此外，除了被缺失的TK和gE基因，该缺失毒株仍能表达其他所有毒力基因，具有很好的免疫原性。

公开(公告)号：CN101818130B

公开(公告)日：2012-07-25

申请号：CN200910273357.6

申请日：2009-12-24

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  张敏敏 ,  刘正飞 ,  付书林 ,  陈焕春

IPC: C12N7/00 ,  A61K39/265 ,  A61P31/20 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于动物病毒学和动物基因工程技术领域，具体涉及一种gG和TK基因缺失的重组牛传染性鼻气管炎病毒、基因工程疫苗及应用。本发明制备的重组牛传染性鼻气管炎病毒毒株IBRVΔgG/ΔTK保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：V200915，该毒株缺失了gG、TK基因，不含外源基因。本发明的中间毒株即重组牛传染性鼻气管炎病毒GAZH-2009-01，保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：V200910，该毒株缺失了gG、TK基因并含有报告基因EGFP。本发明还公开了重组牛传染性鼻气管炎病毒IBRVΔgG/ΔTK在牛传染性鼻气管炎的基因工程疫苗的制备上应用和防治牛传染性鼻气管炎病毒病上的应用。