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公开(公告)号：CN111518167A
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN202010234595.2
申请日：2020-03-30
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种pH响应性抗菌肽及其制备方法和应用。本发明选择天然肽AaeAP2a作为模板。组氨酸残基主要用作pH响应性的正电荷供体，谷氨酸和天冬氨酸残基主要用作pH响应性的“构象开关”，得到了一种pH响应性抗菌肽F5。F5在酸性pH情况下，抗菌活性显著增强，然而在碱性pH情况下，F5表现出弱抗菌活性。该方法提高了抗菌肽对pH的响应性，可以增强抗菌肽在酸性病理情况下的抗菌活性，提高了其成为抗生素替代物的潜力。
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公开(公告)号：CN111484546A
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN202010234840.X
申请日：2020-03-30
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种含天冬酰胺和甘氨酸转角的β发卡抗菌肽及制备方法。本发明抗菌肽WRFNG，其序列如SEQ ID No.1所示。本发明的制备方法以Asn-Gly转角为转角单元，以Trp和Arg的交互作用形成两条β-侧链的相互吸引，根据β-发卡结构的排布原则设计出抗菌肽模板XWYRYZZXWYRY-NH2。X＝R，Y＝F，ZZ＝NG。本抗菌肽在制备治疗革兰氏阳性菌或/和革兰氏阴性菌引起的感染性疾病药物中的应用。本发明的抗菌肽治疗指数达到138.30，较Pro-Gly转角的WRFPG提高了1.58倍，较D-Pro-Gly转角的WRFpG提高了3.55倍，具有成为绿色高效抗生素替代品的发展潜力。
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公开(公告)号：CN111454334A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN202010234824.0
申请日：2020-03-30
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供一种抗酶解的抗菌肽II4II及其制备方法和应用。抗菌肽II4II的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。制备方法：以胰蛋白酶、糜蛋白酶和胃蛋白酶的特异性酶切位点和抗菌肽的基本特征为基础，对序列中的氨基酸进行合理排列，选择Ile作为疏水性氨基酸，得出抗菌肽II4II。该抗菌肽II4II在制备治疗由革兰氏阴性菌或/和革兰氏阳性菌引起的胃肠道感染疾病药物中的应用。本发明的抗菌肽II4II对多种细菌具有较强的抑制作用，而且溶血活性较低，治疗指数达到80.63，而且具有较强的抗酶解能力，在胰蛋白酶或糜蛋白酶或胃蛋白酶处理后抑菌活性保持不变，具有成为抗生素替代品的应用潜力。
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公开(公告)号：CN111454330A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN202010234588.2
申请日：2020-03-30
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种色氨酸和组氨酸跨链交互作用的β-发卡抗菌肽及制备方法。抗菌肽WHFPG，其序列如SEQ ID No.1所示。制备方法利用β-发卡结构的排布原则，以色氨酸和组氨酸的交互作用形成两条β-侧链的相互吸引，以PG转角作为中心转角单元，得出稳定的β-发卡两亲性抗菌肽模板XWYHYPGXWYHY-NH2，X＝R，Y＝F。本抗菌肽在制备治疗革兰氏阳性菌或/和革兰氏阴性菌引起的感染性疾病药物中的应用。本抗菌在中性pH条件和酸性pH条件下都可以发挥作用，在酸性pH条件下可以更强有力的抑制革兰氏阴性菌，治疗指数达到211.68，具有更广泛的临床应用潜力。
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公开(公告)号：CN111423493A
公开(公告)日：2020-07-17
申请号：CN202010234839.7
申请日：2020-03-30
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种棕榈酸化抗酶解抗菌肽及其制备方法和应用。抗菌肽B3C16的序列为C16-GGGK(PRPR)K(PRPR)RPRP，其中C16为棕榈酸，每个赖氨酸的侧链通过酰胺键各链接一个多肽支链PRPR，形成树枝状结构和肽链之间的空间位阻，进一步的使用棕榈酸作为抗菌肽序列的主要疏水性来源，完美规避了所有蛋白酶对疏水性氨基酸的水解，最后使用柔性氨基酸连接体GGG将棕榈酸与分支肽链接，形成完美两亲结构。该抗菌肽对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌等标准菌和耐药菌均有高效的抑制作用，同时具有很低的溶血毒性，高浓度的蛋白酶对B3C16的水解程度很弱。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110438028B
公开(公告)日：2020-05-15
申请号：CN201910548471.9
申请日：2019-06-24
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开一种降解纤维素的民猪源贝莱斯芽孢杆菌GX‑1。保藏在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，保藏日期为2018年11月29日，保藏编号为CCTCC NO:M 2018841，分类命名为Bacillus velezensis GX‑1。本发明的菌株能够产生纤维素酶，可高效降解纤维素，用于纤维素的生物降解。GX‑1菌株所产纤维素酶具有较好的热稳定性，40‑70℃范围内能保持较好的酶活力；菌株GX‑1具有快速生长、产酶量高，对培养条件和产酶条件要求不高，又易于在猪肠道定殖的优势；其对畜牧养殖业和饲料发酵工业的发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN110283253B
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201910629136.1
申请日：2019-07-12
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种猪源衍生杂合抗菌肽MDP‑2及其制备方法和应用，其序列如序列表SEQ ID No.2所示。本发明根据抗菌肽PMAP‑23或PMAP‑36的氨基酸组成特点和分布，将天然抗菌肽进行截短和残基替换，得到猪源衍生肽；将衍生肽与髓样分化蛋白‑2的脂多糖绑定序列相互连接，以进一步增强衍生肽的细菌靶定能力，最后获得氨基酸长度从20至24不等的4条衍生杂合肽；然后合成多肽；进行纯化、鉴定；最后，通过最小抑菌浓度和溶血试验测定衍生抗菌肽的抑菌活性和细胞毒性，筛选具有较理想活性的多肽。本发明的有益效果：该多肽属于天然衍生物，安全性较好，具有广谱抗菌活性和低毒性；制备方法和技术成熟，合成成本低。
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公开(公告)号：CN110283245B
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201910629144.6
申请日：2019-07-12
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种猪髓源PMAP‑23衍生抗菌肽及制备方法和应用，通过对猪髓源PMAP‑23的肽链截取和氨基酸残基替换而衍生得到的抗菌肽，从而通过截取并替换个别氨基酸的方式获得7条不同的衍生肽；然后使用多肽合成仪，进行固相合成法合成多肽；然后将合成多肽使用高效液相色谱进行纯化，并利用电喷射质谱法进行鉴定；最后，通过最小抑菌浓度和溶血试验测定衍生抗菌肽的抑菌活性和细胞毒性，筛选具有较理想活性的多肽，抗菌肽RII‑2，其序列如序列表SEQ No.2所示。该抗菌肽衍生于猪髓源PMAP‑23，属于天然衍生物，安全性较好，具有广谱抗菌活性和低毒性；制备方法和技术成熟，合成成本低。
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公开(公告)号：CN110438139A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910598800.0
申请日：2019-07-04
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明的目的在于提供一种利用毕赤酵母菌表达抗菌肽T9W的方法。编码抗菌肽T9W的DNA序列，如SEQ ID No.1所示，并将该基因序列克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA中，构建重组表达载体pPICZαA-T9W经双酶切及测序验证，验证正确后保存于E.coli Top 10。用电转化方法将质粒转入到毕赤酵母菌X-33感受态细胞中，阳性转化子在诱导剂的作用下，实现抗菌肽的分泌表达。为进一步扩大发酵提供理论依据。本专利选用毕赤酵母作为抗菌肽T9W的表达宿主，完成了T9W的体外表达，本发明有效降低了抗菌肽T9W的生产成本，表达量高达13mg/L，实现了抗菌肽T9W的高效表达，克服了大规模生产中产量过低或化学合成成本过高的问题。
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公开(公告)号：CN110437305A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910659907.1
申请日：2019-07-22
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开一种尾端锚定的α螺旋抗菌肽GW4A及制备方法和应用，抗菌肽GW4A其序列如序列表SEQ ID No.1所示。本发明以肽W4为活性中心，以肽W4为活性中心，在其尾端用丙氨酸进行锚定，在N端用甘氨酸形成帽子结构设计出抗菌肽GW4A。GW4A的治疗指数高达137.69。抗菌肽GW4A对大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡沙门氏菌、金黄色葡萄球等19种革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌菌种有明显的抑制作用，而且具有很低的溶血活性。
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