公开(公告)号：CN108048473A

公开(公告)日：2018-05-18

申请号：CN201711086961.9

申请日：2017-11-07

Applicant: 复旦大学

Inventor： 吕红 ,  刘洋 ,  周峻岗 ,  余垚

IPC: C12N15/55 ,  C12N9/18 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供了一种阿魏酸酯酶基因，其来源于中国牦牛瘤胃微生物，具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，编码如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。本发明还提供了含有该基因的马克斯克鲁维酵母重组表达载体及基因工程菌株，并提供了制备阿魏酸酯酶的方法和制得的阿魏酸酯酶的用途。将阿魏酸酯酶在马克斯克鲁维酵母表达系统中重组表达，经高密度发酵48小时后胞内和胞外的阿魏酸酯酶的活力分别为686.35U/mL和346.34U/mL。马克斯克鲁维酵母重组表达的阿魏酸酯酶可释放玉米麸皮中的阿魏酸。利用本发明获得的阿魏酸酯酶，可用于食品加工、饲料添加、生物医药、纤维素物质生物转化、生物能源等领域。

公开(公告)号：CN105087403B

公开(公告)日：2018-04-03

申请号：CN201510540030.6

申请日：2015-08-28

Applicant: 复旦大学

Inventor： 吕红 ,  周峻岗 ,  余垚 ,  袁汉英 ,  李育阳

IPC: C12N1/16 ,  C12N9/24

Abstract: 本发明提供了一种马克思克鲁维酵母菌，其保藏号为CGMCC No.10621，本发明还提供了所述马克思克鲁维酵母菌的应用。相比于ATCC8585、ATCC26548等现有克鲁维酵母，本发明马克思克鲁维酵母菌具有更高的分泌蛋白的能力和更高的生物量，可用于生产酶制剂，并且可以用来构建重组蛋白表达系统。

公开(公告)号：CN105132452A

公开(公告)日：2015-12-09

申请号：CN201510562498.5

申请日：2015-09-07

Applicant: 复旦大学

Inventor： 吕红 ,  余垚 ,  袁汉英 ,  周峻岗 ,  李育阳

IPC: C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供了一种在马克斯克鲁维酵母营养缺陷型菌株中表达融合了组氨酸标签的外源基因的重组载体、及其制备方法和应用，所述重组载体按照顺序包括氨苄抗性基因、PKD1载体序列、菊粉酶启动子、多克隆位点、菊粉酶终止子、营养基因启动子、营养基因开放阅读框；还包括多聚组氨酸标签，所述多聚组氨酸标签位于多克隆位点的C端或N端。本发明构建的重组载体，可用于构建转化子，来实现外源基因的表达。

公开(公告)号：CN105087403A

公开(公告)日：2015-11-25

申请号：CN201510540030.6

申请日：2015-08-28

Applicant: 复旦大学

Inventor： 吕红 ,  周峻岗 ,  余垚 ,  袁汉英 ,  李育阳

IPC: C12N1/16 ,  C12N9/24

Abstract: 本发明提供了一种马克思克鲁维酵母菌，其保藏号为CGMCC No.10621，本发明还提供了所述马克思克鲁维酵母菌的应用。相比于ATCC8585、ATCC26548等现有克鲁维酵母，本发明马克思克鲁维酵母菌具有更高的分泌蛋白的能力和更高的生物量，可用于生产酶制剂，并且可以用来构建重组蛋白表达系统。

公开(公告)号：CN101063089B

公开(公告)日：2012-09-05

申请号：CN200710040392.4

申请日：2007-04-30

Applicant: 复旦大学

Inventor： 吕红 ,  李育阳 ,  袁汉英

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/56 ,  C12N9/24

Abstract: 本发明属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将菊粉外切酶基因克隆到真核表达载体pUKDS上，并转化鹰嘴豆克鲁维酵母Y179U，形成表达菊粉外切酶的克鲁维酵母基因工程菌株。发酵时，取上述基因工程菌株在常温常压下发酵2-8天，然后去除菌体，即得；发酵液初始菌浓度为OD600＝0.2-1.6；发酵液pH值为5.5-8.0；发酵液中含有0.5-2％的酵母粉和浓度不低于2％的碳源。用本发明的方法生产的菊粉外切酶，活性可达2500u/ml以上，发酵产量高，发酵周期短，发酵成本低，适用于推广至大规模工业化生产。

公开(公告)号：CN101906406A

公开(公告)日：2010-12-08

申请号：CN201010208945.4

申请日：2010-06-24

Applicant: 复旦大学

Inventor： 吕红 ,  常磊 ,  周峻岗

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/63 ,  C12P19/14

Abstract: 本发明属生物工程技术领域，具体为一种具有内切葡聚糖酶/木聚糖酶活性的双功能酶(RuCelA)及其制备方法与应用。RuCelA来源于中国牦牛瘤胃未培养微生物，RuCelA对磷酸纤维素、滤纸具有一定的活性。RuCelA不仅可以水解多聚糖，也可以水解三糖得到单糖；同时RuCelA与木糖苷酶具有协同降解木聚糖的协同作用；利用RuCelA还可以实现对预处理过的木质纤维素的单酶降解。本发明的双功能酶RuCelA可广泛应用于纤维素的降解，包括纤维素生物转化、化工、纺织、食品、生物能源、饲料添加、医药工业方面应用等。

公开(公告)号：CN101781670A

公开(公告)日：2010-07-21

申请号：CN200910045395.6

申请日：2009-01-15

Applicant: 复旦大学

Inventor： 吕红 ,  乐科易 ,  潘贤 ,  袁汉英

IPC: C12P21/02 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明属于遗传工程和发酵工程领域，是利用含有外源蛋白编码序列的鹰嘴豆孢克鲁维酵母基因工程菌高效制备外源蛋白的发酵工艺。发酵时，取上述基因工程菌株发酵2-6天，然后去除菌体，即得；发酵液初始菌浓度OD值为0.4-0.6，在发酵过程中维持葡萄糖浓度为0.5-1％；在发酵过程的12h-18h连续补加12％酵母粉，补加酵母粉的总量为发酵体积的3-5％(质量体积比)；发酵过程中调节发酵液pH值为5.0-5.5。用本发明方法可以大规模制备外源蛋白，蛋白活性高，发酵产量高，发酵周期短，发酵成本低，适用于推广至大规模工业化生产。