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公开(公告)号:CN107916247A
公开(公告)日:2018-04-17
申请号:CN201711156168.1
申请日:2017-11-20
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种产琥珀酸放线杆菌基因敲除方法。通过构建目的基因左右同源臂;构建带有抗生素筛选标记及负筛选标记的自杀质粒;将目的基因左右同源臂连接自杀质粒,并转入供体菌感受态细胞中,通过抗性平板涂布筛选正确的阳性单克隆并测序验证;将正确的阳性单克隆转入目的菌株产琥珀酸放线杆菌,在抗性平板中筛选发生单交换的阳性单克隆,将发生正确单交换的阳性单克隆进行负筛选得到缺失目的基因的重组菌株。本发明的方法针对产琥珀酸放线杆菌敲除目的基因,其操作过程简单,转化效率高,适用于多基因敲除,且能够实现目的基因的无痕敲除。
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公开(公告)号:CN107012132A
公开(公告)日:2017-08-04
申请号:CN201610891483.8
申请日:2016-10-12
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N9/18 , C12N9/20 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N1/20 , B09C1/10 , A62D3/02 , C12R1/19 , C12R1/01 , A62D101/04
Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及一种芳氧苯氧丙酸类除草剂水解酯酶及其应用。所述水解酯酶具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列,编码所述酶的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。将该芳氧苯氧丙酸类除草剂水解酯酶基因构建重组质粒再导入宿主菌,即获得含有该基因的基因工程菌。所述芳氧苯氧丙酸类除草剂水解酯酶基因可在水解芳氧苯氧丙酸类除草剂、三酰甘油酯和对硝基苯酯等方面应用。利用该基因生产的酶制剂可用于环境的生物修复、食品加工、医药、洗涤等行业,不仅可以解决芳氧苯氧丙酸类除草剂的环境污染问题,还可以取得可观的经济效益。
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公开(公告)号:CN105543294A
公开(公告)日:2016-05-04
申请号:CN201610125654.6
申请日:2016-03-07
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用低活性丁二酸生产菌株转化合成苹果酸的方法。所述方法包括:菌种活化、种子液制备、发酵产丁二酸过程、以及回收菌体细胞,以丁二酸二钠为底物,转化合成苹果酸。所述应用目前尚无报道,与其他生物发酵生产苹果酸工艺相比,本发明的技术方案以回收的低活性的产丁二酸重组大肠杆菌为催化剂,丁二酸钠为底物,有氧转化合成苹果酸,其转化率达到90%以上,提高了细胞的利用效率,有效节约了成本。
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公开(公告)号:CN119101643B
公开(公告)日:2025-03-11
申请号:CN202411357767.X
申请日:2024-09-26
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株利用低劣生物质木质素合成异海绵烯的工程食醚红球菌的构建及应用,以能够降解多种芳香酚类化合物的食醚红球菌为出发菌株,通过代谢工程改造,获得一株木质素衍生芳香酚类化合物利用能力强化的菌株。该菌株能够以低劣生物质木质素为碳源,实现了异海绵烯的合成。菌株合成异海绵烯产量及含量达到18.22 mg/L和12.24 mg/g,相较于菌株N1产量提升了116%,含量提升了265%。本发明为木质素高效合成高值化学品异海绵烯提供一种方法。
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公开(公告)号:CN119101643A
公开(公告)日:2024-12-10
申请号:CN202411357767.X
申请日:2024-09-26
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株利用低劣生物质木质素合成异海绵烯的工程食醚红球菌的构建及应用,以能够降解多种芳香酚类化合物的食醚红球菌为出发菌株,通过代谢工程改造,获得一株木质素衍生芳香酚类化合物利用能力强化的菌株。该菌株能够以低劣生物质木质素为碳源,实现了异海绵烯的合成。菌株合成异海绵烯产量及含量达到18.22 mg/L和12.24 mg/g,相较于菌株N1产量提升了116%,含量提升了265%。本发明为木质素高效合成高值化学品异海绵烯提供一种方法。
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公开(公告)号:CN118146970A
公开(公告)日:2024-06-07
申请号:CN202410357660.9
申请日:2024-03-27
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及产虾青素的重组巴斯德毕赤酵母及其构建方法和应用,所述重组巴斯特毕赤酵母是向巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中导入香叶基香叶基二磷酸合酶CrtE、八氢番茄红素合成酶/番茄红素环化酶CrtYB、八氢番茄红素去饱和酶CrtI、3‑羟基‑3‑甲基戊二酰CoA还原酶tHMGR、β‑胡萝卜素酮醇酶CrtW和β‑胡萝卜素羟化酶CrtZ的表达盒得到。本发明的重组巴斯德毕赤酵母能够发酵生产虾青素,实现了天然产物虾青素在巴斯德毕赤酵母中的高效合成。此外,本发明利用双底物分步培养工艺,大大提高了以甲醇为唯一碳源发酵时重组巴斯德毕赤酵母的虾青素产量,对高价值萜类产物的工业化以及商业化应用具有重大的现实意义和经济价值。
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公开(公告)号:CN117625705A
公开(公告)日:2024-03-01
申请号:CN202311639302.9
申请日:2023-11-30
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于过氧化氢适应性进化提高红球菌麦角硫因产量的方法,菌株N1在摇瓶中可以利用葡萄糖生产麦角硫因14.2mg/L,通过过氧化氢适应性进化后可进一步提高菌株N1的抗氧化能力,食醚红球菌N1可以耐受582mM过氧化氢,麦角硫因产量增加,产量为46.7mg/L,在非重组菌株中,产量最高。
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公开(公告)号:CN117512023A
公开(公告)日:2024-02-06
申请号:CN202311476362.3
申请日:2023-11-08
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种玉米芯水解液发酵生产木糖醇的方法,包括将玉米芯粉碎为颗粒,并将所述颗粒加入到稀硫酸中,在110℃~126℃条件下水解,得到多组分糖液;调节所述多组分糖液的pH为4.0,之后投加活性炭,在30℃条件下脱毒处理,得到玉米芯稀酸水解糖液;将所述玉米芯稀酸水解糖液灭菌后与含有鼠李糖脂的发酵培养基和发酵菌株混匀后,28℃~30℃条件下发酵得到木糖醇。提高了木糖醇的收率。
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公开(公告)号:CN116179402B
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202211095518.9
申请日:2022-09-06
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株类胡萝卜素合成菌株及其应用,所述菌株分类命名为食醚红球菌Rhodococcus aetherivorans),菌株命名为N1,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2022年8月11日,保藏号为:CCTCC NO:M 20221270。菌株N1在摇瓶发酵中利用葡萄糖,红球菌细胞干重达到5.0 g/L,合成类胡萝卜素含量达到6.1 mg/g。菌株N1还能够直接利用未经脱毒的玉米芯水解液作为碳源,合成类胡萝卜素含量达到5.5 mg/g。食醚红球菌N1做为一株具有类胡萝卜素合成能力的细菌菌株,能够利用广泛的糖类碳源及未经脱毒的玉米芯水解液,可为类胡萝卜素的工业化生产提供优良的菌株资源。
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公开(公告)号:CN117384813A
公开(公告)日:2024-01-12
申请号:CN202311321341.4
申请日:2023-10-12
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及依克多因合成菌株及其构建方法和应用,该菌株通过在宿主菌中表达ectABC基因簇获得;所述宿主菌为大肠杆菌(Escherichia coli)MG1655;所述ectABC基因簇的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的菌株能够使用低价氮源高效合成依克多因,依克多因产量高并且所得发酵液中杂质较少。
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