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公开(公告)号：CN110257405B
公开(公告)日：2020-10-27
申请号：CN201910541509.X
申请日：2019-06-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体乙醇脱氢酶基因，具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列，本发明还公开了一种牛支原体乙醇脱氢酶基因编码的蛋白，具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，属于动物传染病防治与生物技术领域。本发明的重组蛋白具有乙醇脱氢酶活性，能够黏附牛肺上皮细胞系细胞(EBL)，能与牛纤连蛋白(Fn)结合，同时还具有良好的免疫原性和反应原性，是牛支原体的一种毒力相关蛋白，在牛支原体致病机制研究、疫苗和诊断试剂研发中具有较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN111394366A
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN202010153884.X
申请日：2020-03-07
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域，涉及牛分枝杆菌卡介苗低侵袭力突变株B2855，突变株B2855含有牛分枝杆菌卡介苗LipQ的突变体基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，突变位点位于基因组2757121位点后，位于为LipQ基因序列的564位点后，是一种新的结构基因和功能基因。本发明的突变株为低侵袭力，高胞内存活能力及高生长速度。突变株B2855保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2018865。本发明分离的突变基因及其突变株可望在牛分枝杆菌致病机理研究、免疫机制研究和制备防制牛结核病疫苗或药物中应用。
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公开(公告)号：CN108660144A
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201710200623.7
申请日：2017-03-30
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一种牛支原体多功能蛋白基因CDNPase，蛋白基因Mbov_0328是从牛支原体HB0801基因组中克隆获得。根据大肠杆菌对密码子的偏爱性，申请人对Mbov_0328基因进行了修饰，将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG，最终获得由大肠杆菌表达的重组蛋白rCDNPase。本发明克隆的蛋白的编码基因的核苷酸序列是SEQ ID NO:11中1-969位碱基所示的序列，其蛋白质的序列如SEQ ID NO:12所示。本发明的重组蛋白具有磷酸二酯酶和超小片段核酸酶的活性。
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公开(公告)号：CN107176977A
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201610144587.2
申请日：2016-03-11
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/30 , C12N1/21 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及牛支原体MbovP730蛋白在自然感染和疫苗免疫鉴别中的应用。根据大肠杆菌的密码子偏爱性，对M.bovis HB0801的Mbov_730基因进行克隆，将Mbov_730基因修饰，将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中的色氨酸密码子UGG，进而在大肠杆菌中表达重组的牛支原体MbovP730蛋白。本发明的MbovP730蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示,该蛋白可作为抗原蛋白在制备鉴别诊断牛支原体野毒株感染和疫苗株免疫鉴别试剂盒中的应用。
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公开(公告)号：CN107045063A
公开(公告)日：2017-08-15
申请号：CN201610084498.3
申请日：2016-02-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/68
CPC classification number: G01N33/68
Abstract: 本发明属于生化免疫和分析技术领域，具体涉及肺结核相关血清标识蛋白TIMP‐1及其应用。本发明利用细胞因子和全蛋白芯片对宿主蛋白进行筛选，提供了一种可检测肺结核相关血清生物标识蛋白即蛋白基质金属蛋白酶抑制因子TIMP‐1，该抑制因子TIMP‐1的蛋白质序列如SEQ ID NO：1所示。本发明的抑制因子TIMP‐1可在制备肺结核病血清诊断试剂盒中作为标识抗原蛋白应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104726413A
公开(公告)日：2015-06-24
申请号：CN201510054798.2
申请日：2015-02-01
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/573
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一株牛支原体NADH氧化酶的单克隆抗体。该单克隆抗体是由交瘤细胞株8B7分泌的，所述的NADH氧化酶是一种牛支原体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶，本发明修饰的NOX基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。公开了NOX基因的克隆和表达及纯化步骤，重组蛋白质rNOX单克隆抗体的制备步骤以及免疫荧光检测法的建立和初步应用的步骤及效果。所述的杂交瘤细胞株8B7保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：C2014221，该单克隆抗体能特异性地识别牛支原体。
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公开(公告)号：CN103361317A
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201210098394.X
申请日：2012-04-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , G01N33/68 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种猕猴IFN-γ的单克隆抗体杂交瘤细胞及制备方法和应用，通过对ConA刺激的猕猴全血血细胞提取RNA，进行RT-PCR，获得总cDNA后对其进行扩增得到猕猴IFN-γ基因，并通过载体体外表达和纯化获得猕猴IFN-γ，用纯化的猕猴IFN-γ免疫小鼠后，分离被免疫的小鼠脾脏B细胞并采用杂交瘤技术获得高效表达猕猴IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞，MmIFN-γ2F6，CCTCCNO：C201235，该猕猴IFN-γ单抗可与猕猴IFN-γ特异性结合，用于探测抗原刺激猕猴全血后上清中的猕猴IFN-γ。该猕猴IFN-γ单抗可以与天然猕猴IFN-γ特异性结合，在用于特异性检测猕猴IFN-γ时敏感度可以达到125pg/ml，达到应用于结核病检测中所要求的敏感度。
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公开(公告)号：CN101538578A
公开(公告)日：2009-09-23
申请号：CN200910060913.1
申请日：2009-03-02
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于微生物基因工程技术领域。具体涉及一种三基因融合的重组牛结核特异性抗原蛋白其及制备方法。该牛结核特异性融合抗原蛋白的基因，具有如序列表SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列和氨基酸序列。公开了一株能够表达牛结核特异性融合抗原蛋白的重组大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a－RCE，其保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M208244。进一步本发明公开了这种三基因融合抗原蛋白的制备方法。
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公开(公告)号：CN1995332A
公开(公告)日：2007-07-11
申请号：CN200610166551.0
申请日：2006-12-30
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/31 , G01N33/544 , G01N33/532 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于动物细菌学与动物传染病学技术领域。具体涉及一种检测牛结核抗体的免疫胶体金试纸条及其制备方法。本发明的试纸条是由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬组装而成。在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；所述的结合垫上包被有MPB83蛋白－胶体金标记物；所述的硝酸纤维素膜上分别包被有由纯化的MPB70蛋白构成的检测线和由纯化的兔抗MPB83蛋白IgG构成的质控线。本发明还公开了牛分枝杆菌特异性抗原MPB83的制备。用于试纸条的特异性抗原之一的重组大肠杆菌Escherichia coli BL21/pET28a－MPB83保藏在CCTCC，保藏编号：CCTCC NO：M206142。本发明的试纸条具有特异性强，灵敏度高，可应用于牛结核抗体的检测。
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公开(公告)号：CN120005883A
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202510094685.9
申请日：2025-01-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛分枝杆菌（Mycobacterium bovis,M.bovis）非编码小RNA，属于生物领域。所述非编码小RNA核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，研究发现，ncBCG201过表达BCG菌株在碳饥饿培养条件下的存活能力明显增强，在膜压力培养条件下的存活能力明显下降，过表达菌株在对数生长期表现出更慢的生长速度，且生物被膜成膜能力显著降低。以上结果表明，本发明提供的非编码小RNA能降低牛分枝杆菌的致病性和抗性，在制备牛结核病疫苗方面具有很好的应用前景。
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