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公开(公告)号:CN106636297B
公开(公告)日:2020-05-08
申请号:CN201611245679.6
申请日:2016-12-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种高效、快速的筛选脂肪酸合成抑制剂的方法。利用产油微生物作为一个有效的工具从植物提取物、天然产物以及各种化合物中筛选出新型的脂肪酸合成抑制剂。用液体方法培养产油微生物,将培养活化的菌种及其培养液等量加入微孔板中。在相应微孔中加入颜色指示剂来观测脂质的合成情况,运用图像分析软件来分析图片。本发明用已知的脂肪酸合成抑制剂(C75,Cerulenin)作为对照组。同时可测量蛋白量以及生物量确保所筛选的抑制剂对菌体的正常生长影响很小。脂肪酸合成抑制剂的寻找对于治疗脂肪相关疾病如肥胖、癌症具有一定的帮助,本发明为筛选脂肪酸合成抑制剂提供了一个快速有效的新方法。
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公开(公告)号:CN105925496B
公开(公告)日:2019-06-18
申请号:CN201610396579.7
申请日:2016-06-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种重组解脂亚罗酵母CCFM‑JU277‑9菌株全细胞催化剂的制备方法,该方法包括确定菌体收集时间、确定培养基中油酸浓度、确定培养细胞时间与透性化处理等步骤。本发明方法通过表面活性剂与冻融处理能够增加细胞壁和细胞膜的通透性,减少膜对底物和产物的传质阻力,提高脂肪酸底物和产物进出菌体的速率,从而显著提高重组解脂亚罗酵母全细胞催化生成t10,c12‑CLA的转化效率,非常明显地提高t10,c12‑CLA的产量。
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公开(公告)号:CN106636297A
公开(公告)日:2017-05-10
申请号:CN201611245679.6
申请日:2016-12-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种高效、快速的筛选脂肪酸合成抑制剂的方法。利用产油微生物作为一个有效的工具从植物提取物、天然产物以及各种化合物中筛选出新型的脂肪酸合成抑制剂。用液体方法培养产油微生物,将培养活化的菌种及其培养液等量加入微孔板中。在相应微孔中加入颜色指示剂来观测脂质的合成情况,运用图像分析软件来分析图片。本发明用已知的脂肪酸合成抑制剂(C75,Cerulenin)作为对照组。同时可测量蛋白量以及生物量确保所筛选的抑制剂对菌体的正常生长影响很小。脂肪酸合成抑制剂的寻找对于治疗脂肪相关疾病如肥胖、癌症具有一定的帮助,本发明为筛选脂肪酸合成抑制剂提供了一个快速有效的新方法。
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公开(公告)号:CN104090102B
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201410266137.1
申请日:2014-06-13
Applicant: 江南大学
IPC: G01N33/573
Abstract: 本发明涉及一种冷冻鱼糜中微生物谷氨酰胺转胺酶ELISA检测方法。本发明方法以抗MTG兔多抗为包被抗体,抗MTG鼠单抗为检测抗体,再结合HRP标记的抗IgG1二抗,构成双抗体夹心ELISA检测方法,对冷冻鱼糜中是否添加MTG进行定量检测。本发明方法检测限为20ng/mL,该检测方法在0.6mg/mL~10mg/mL范围内OD450值与MTG浓度的log值呈线性关系,冷冻鱼糜样品添加回收率为94%以上,板内变异系数为1.12%~4.02%,板间变异系数为5.43%~6.87%。本发明方法灵敏度高,样品前处理简便,适用于冷冻鱼糜中MTG的定量检测,防止冷冻鱼糜原料掺假。
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公开(公告)号:CN105647822A
公开(公告)日:2016-06-08
申请号:CN201610184669.X
申请日:2016-03-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一株异源表达来源于寄生疫霉ω-3脱饱和酶基因的重组高山被孢霉菌株MA-oPpFADS17-4,并提供了构建所述重组高山被孢霉菌株的方法。本发明采用高山被孢尿嘧啶营养缺陷型菌株为材料,运用根瘤土壤杆菌介导的遗传操作技术,得到一株常温高产EPA的重组菌株,其EPA的产量达到1197.3mg/L,占总脂肪酸(TFA)含量的31.5%,对AA的转化率达77.6%。本申请对产油真菌高山被孢霉的基础理论研究及产品开发具有重要意义。
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公开(公告)号:CN103571762B
公开(公告)日:2015-08-12
申请号:CN201310524221.4
申请日:2013-10-30
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/80 , C12N9/0006 , C12P7/6463 , C12Y101/01038 , C12Y101/0104
Abstract: 本发明涉及一种高山被孢霉(Mortierella alpina ATCC 32222)的重组基因表达系统及应用。本发明采用高山被孢霉ATCC 32222尿嘧啶营养缺陷型菌株为材料,运用根癌土壤杆菌介导的遗传操作技术进行基因操作,构建了一套高山被孢霉重组基因表达系统。并运用这套系统操作,得到多株高产多不饱和脂肪酸高山被孢霉菌株,对产油真菌高山被孢霉ATCC 32222的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN103725723B
公开(公告)日:2015-07-22
申请号:CN201410020846.1
申请日:2014-01-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种使用重组耶氏解脂酵母菌株CCFM-JU277-9生产含有共轭亚油酸的脂肪酸甲酯的方法,该方法包括平板活化培养、种子培养、发酵培养、由菌体提取脂肪与由发酵上清液提取脂肪等步骤。使用较廉价的红花籽油代替昂贵的游离LA作为发酵用底物,既能提高t10,c12-CLA的产量,又能很大程度降低发酵成本,因此,本发明使用重组耶氏解脂酵母菌株CCFM-JU277-9生产含有共轭亚油酸的脂肪酸甲酯的方法具有非常好的应用前景。
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公开(公告)号:CN103571762A
公开(公告)日:2014-02-12
申请号:CN201310524221.4
申请日:2013-10-30
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/80 , C12N9/0006 , C12P7/6463 , C12Y101/01038 , C12Y101/0104
Abstract: 本发明涉及一种高山被孢霉(Mortierella alpina ATCC 32222)的重组基因表达系统及应用。本发明采用高山被孢霉ATCC 32222尿嘧啶营养缺陷型菌株为材料,运用根癌土壤杆菌介导的遗传操作技术进行基因操作,构建了一套高山被孢霉重组基因表达系统。并运用这套系统操作,得到多株高产多不饱和脂肪酸高山被孢霉菌株,对产油真菌高山被孢霉ATCC 32222的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN103276007A
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201310245544.X
申请日:2013-06-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种在枯草芽孢杆菌中实现外源蛋白质分泌表达的新策略。以非经典分泌蛋白质Eno,YceD和YvgN作为转运信号实现了外源蛋白质BgaB的分泌表达,但在YceD引导下,BgaB的分泌量很低。在PdhA和KatA情况下,虽然在细胞内检测到很高的融合蛋白质的量,在细胞外没有检测到相应的蛋白质和BgaB的活性,说明PdhA和KatA并不能实现BgaB的分泌表达。当GapA作为融合蛋白质时,胞内和胞外均没有检测到融合蛋白质,可能是融合蛋白质在细胞内并没有表达。本实验的方法对于实现外源蛋白质在枯草芽孢杆菌中的分泌表达提供了新的可能。
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