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公开(公告)号：CN118127101A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202410298474.2
申请日：2024-03-15
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种β‑烟酰胺单核苷酸合成方法，包括：以大肠杆菌为宿主菌建立表达烟酰胺核糖激酶的基因工程菌；诱导表达所述基因工程菌并纯化，获得纯酶液；以烟酰胺核糖为底物，ATP为磷酸供体，并添加所述纯酶液构建β‑烟酰胺单核苷酸的合成体系，合成β‑烟酰胺单核苷酸；所述烟酰胺核糖激酶来源于绣球菌，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的方法在较宽的温度范围下均有良好的合成效果，且使用的酶在弱碱性条件下相比现有NRK酶酶活高，本发明的方法在10min内可将底物烟酰胺核糖氯化物的转化率提高至80%以上，还可进一步联合PPK酶进行共催化，降低了ATP的供应，适合于产业应用。
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公开(公告)号：CN118006701A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410339732.7
申请日：2024-03-25
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12P7/6434 , C12N9/18 , C12N11/04
Abstract: 本发明属于生物工程领域，具体涉及一种磷脂DHA的制备方法，包括如下步骤：步骤一、双亲性离子液体的制备，将表面活性剂溶于有机溶剂中作为反应溶剂。步骤二、磷脂DHA的酶催化。步骤三、磷脂DHA的分离。步骤四：收集丙酮沉淀后的上清液，真空浓缩除去丙酮回收游离DHA和表面活性剂。回收获得的未反应物，再加入大豆卵磷脂，可进入步骤二循环反应。相比于现有技术中使用的复杂的固定化技术和大量的酶，本发明工艺操作简单，在离子液体的作用下使用少量的酶提高了磷脂DHA的掺入率，高效经济。
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公开(公告)号：CN117448407A
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202311273031.X
申请日：2023-09-28
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种联产水解蛋黄肽与磷脂DHA的方法，包括：将蛋黄粉和磷酸缓冲溶液混合后，超声剪切处理，之后加入水解辅助剂，并调节pH为7~10；水解辅助剂为硫酸盐、亚硫酸盐或硫代硫酸盐中的一种或几种；之后添加蛋白酶，经过酶水解反应、灭酶之后，得到粗提物，后分层分离，在上层得到磷脂型DHA，在下层得到水解蛋黄肽。该方法可一步获得水解蛋黄肽和磷脂DHA。所获得的蛋黄肽溶解度100%，小分子肽占比高于95%，水解度大于10％，蛋白质含量大于30g/L，多肽含量大于9g/L，提取蛋黄油率大于75%，磷脂DHA比例大于10%。本发明方法简单，制备的水解蛋黄粉肽段分子质量分布合理，适合人体消化利用，可减少有机试剂提取食品油类物质的危害与浪费，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN116769850A
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202310517104.9
申请日：2023-05-09
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种双阶段调控提高麦角硫因生产效率的方法。将榆黄菇的种子液接种至添加了H2O2的发酵培养基上发酵培养5~7天后，再次向发酵培养基中添加H2O2刺激0.5‑1.5h，之后添加VC，1.5‑2.5h后终止发酵，收集菌体提取麦角硫因。麦角硫因生产效率最高相比原始菌提升了58.81%。本发明的生产方法简单易控，麦角硫因产量高且均在胞内，容易收获，简化了后续提纯工艺，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN113186107B
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202110534410.4
申请日：2021-05-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供了一种麦角硫因生产菌及其应用，其分类命名为贝壳状革耳菌(Panus conchatus)MOL‑506，保藏编号GDMCC No：61611。所述贝壳状革耳菌可高效利用糖蜜和大豆蛋白胨生产麦角硫因，降低了发酵成本，结合发酵过程调控和工艺优化，可高效生产麦角硫因，且整个工艺流程简单方便，生产短，适合工业化生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110846232B
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN201911224153.3
申请日：2019-12-04
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株可高温发酵生产DHA的菌株及其应用，该菌株可在35℃条件下高产二十二碳六烯酸油脂，本发明利用菌种连续驯化技术定向改造菌株，结合发酵控制策略，获取可在高温下快速生长、快速积累DHA的菌株，连续高温驯化后的裂殖壶菌，菌种的生长速度大幅度提升，在正常发酵温度下培养，细胞生长速度提高了75.43％，在高温发酵条件下发酵周期缩短25h，细胞生长速度是原始菌株的2.10倍。另外，该菌株的β‑胡萝卜素产率提高了57.75％。本发明的菌株在高温35℃条件下也可实现DHA的高效生产，减少了在高温地区生产的能耗，降低了发酵成本，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN113186107A
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202110534410.4
申请日：2021-05-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供了一种麦角硫因生产菌及其应用，其分类命名为贝壳状革耳菌(Panus conchatus)MOL‑506，保藏编号GDMCC No：61611。所述贝壳状革耳菌可高效利用糖蜜和大豆蛋白胨生产麦角硫因，降低了发酵成本，结合发酵过程调控和工艺优化，可高效生产麦角硫因，且整个工艺流程简单方便，生产短，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN110846232A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201911224153.3
申请日：2019-12-04
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株可高温发酵生产DHA的菌株及其应用，该菌株可在35℃条件下高产二十二碳六烯酸油脂，本发明利用菌种连续驯化技术定向改造菌株，结合发酵控制策略，获取可在高温下快速生长、快速积累DHA的菌株，连续高温驯化后的裂殖壶菌，菌种的生长速度大幅度提升，在正常发酵温度下培养，细胞生长速度提高了75.43％，在高温发酵条件下发酵周期缩短25h，细胞生长速度是原始菌株的2.10倍。另外，该菌株的β-胡萝卜素产率提高了57.75％。本发明的菌株在高温35℃条件下也可实现DHA的高效生产，减少了在高温地区生产的能耗，降低了发酵成本，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN104974944B
公开(公告)日：2018-05-25
申请号：CN201510417269.4
申请日：2015-07-15
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供一种产DHA的裂殖壶菌基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物化工技术领域。所述产DHA的裂殖壶菌基因工程菌，是在裂殖壶菌基因组中整合有苹果酸酶基因的表达盒的工程菌，所述苹果酸酶基因的表达盒依次含有启动子、苹果酸酶基因和终止子。所述裂殖壶菌基因工程菌的构建方法，包括：构建含有苹果酸酶基因的表达盒的同源重组片段；将所述同源重组片段导入裂殖壶菌进行同源重组，筛选获得所述裂殖壶菌基因工程菌。本发明还提供采用所述裂殖壶菌基因工程菌制备DHA的方法，采用种子培养基培养裂殖壶菌基因工程菌，然后转接入发酵培养基制备DHA。本发明裂殖壶菌基因工程菌能够高产DHA，构建方法简单、效率高、成本较低。
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公开(公告)号：CN105803011A
公开(公告)日：2016-07-27
申请号：CN201610312323.3
申请日：2016-05-11
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: C12P7/6472 , C12M27/02 , C12M29/06
Abstract: 本发明提供一种高产DHA的方法，该方法通过四阶段供养策略实现，且在特制的搅拌式生物反应器中实现。通过该方法培养获得的裂殖壶菌，生物量可达150 – 200 g/L，油脂含量100 – 120 g/L，油脂中DHA含量50% – 60%，底物转化率25% – 30%。
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