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公开(公告)号:CN114574611B
公开(公告)日:2023-09-15
申请号:CN202210086609.X
申请日:2022-01-25
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种根据牛无绿藻cob基因设计的PCR检测引物,其核苷酸序列如下:cob‑5‑F:CTAGTTATTCAAGTCCTCG;cob‑5‑R:AATTACTGTAGCACCCC,所述牛无绿藻cob基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,本发明还公开了所述的PCR检测引物在牛无绿藻非诊断目的检测中的应用。本发明通过对牛无绿藻cob基因的PCR引物进行筛选,得到一对灵敏度高且特异性强的引物,将该引物结合荧光定量PCR技术,能够直接对牛奶样品中的牛无绿藻进行定性以及定量测定,在早期快速诊断牛无绿藻性乳腺炎方面具有明显的优势。
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公开(公告)号:CN114774340B
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202210415743.X
申请日:2022-04-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一株牛支原体基因突变株,属于动物传染病防治技术领域,该菌株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.210,保藏在中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号为CCTCC NO:M 2022260,发生突变的基因是核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的Mbov_0703基因。该突变株黏附牛肺上皮细胞的能力和诱导牛肺巨噬细胞炎性反应的能力降低,而且生物膜形成能力降低,从而毒力致弱和抗逆性能下降,在牛支原体致病和免疫防制领域具有应用前景。
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公开(公告)号:CN113512559B
公开(公告)日:2022-11-11
申请号:CN202110467490.6
申请日:2021-04-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及动物传染病防治技术领域。本发明提供了牛支原体Mbov_0701突变基因及其突变株和应用。所述基因突变株在Mbov_0701基因的701核苷酸位点后出现插入突变,在与牛胚胎肺细胞共培养时,表现出显著生长缺陷表型,在PPLO固体培养基上表现为小菌落形态。Mbov_0701基因编码蛋白是一种核酸外切酶MbovP701,本申请的基因突变株可应用于牛支原体代谢生理、致病和防治药物制备等领域。
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公开(公告)号:CN115044686A
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN202210508577.8
申请日:2022-05-11
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种同时检测牛呼吸疾病综合征七种病原体的实时荧光定量PCR引物对和探针组合,该套引物探针能够特异性的扩增出牛支原体的oppD/F基因、牛多杀性巴氏杆菌的ompH基因、牛溶血曼氏杆菌的GCP基因、牛传染性鼻气管炎病毒的gB基因、牛合胞体病毒的N基因、牛副流感病毒3型a基因型的N基因、牛副流感病毒3型c基因型的N基因,可同时用于上述七种病原体的检测以提高检测效率。
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公开(公告)号:CN114774588A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202210550478.6
申请日:2022-05-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开一套用于同时检测牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛轮状病毒(Bovine Rotavirus,BRV)和牛冠状病毒(Bovine Coronavirus,BCV)的三重实时荧光定量PCR(Multiplex real‑time fluorescence quantitative PCR)引物和探针组合,所述引物和探针特异性针对BVDV病毒的5’UTR基因片段、BRV病毒的VP6基因片段、BCV病毒的N基因片段,核苷酸序列如SEQ ID No.1‑9所示。本发明只需要将样品进行一次PCR扩增即可实现对三种病毒的定性或定量检测,具有操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性好等优点。
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公开(公告)号:CN111778177B
公开(公告)日:2021-09-21
申请号:CN202010490087.0
申请日:2020-06-02
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体Mbov_0274基因突变株,属于动物传染病防治技术领域,所述突变株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.202,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2020084,所述Mbov_0274基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。本发明通过qRT‑PCR检测T9.202株刺激BoMac细胞表达IL‑8的能力,结果显示牛支原体菌株T9.202诱导BoMac细胞表达细胞因子的能力下降,可望在牛支原体免疫防治领域发挥重要作用。
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公开(公告)号:CN111394366B
公开(公告)日:2021-07-30
申请号:CN202010153884.X
申请日:2020-03-07
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域,涉及牛分枝杆菌卡介苗低侵袭力突变株B2855,突变株B2855含有牛分枝杆菌卡介苗LipQ的突变体基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,突变位点位于基因组2757121位点后,位于为LipQ基因序列的564位点后,是一种新的结构基因和功能基因。本发明的突变株为低侵袭力,高胞内存活能力及高生长速度。突变株B2855保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2018865。本发明分离的突变基因及其突变株可望在牛分枝杆菌致病机理研究、免疫机制研究和制备防制牛结核病疫苗或药物中应用。
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公开(公告)号:CN113061581A
公开(公告)日:2021-07-02
申请号:CN202110301274.4
申请日:2021-03-22
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N7/00 , A61K39/265 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域,具体涉及一种山羊源牛疱疹病毒1型毒株BoHV‑1/Goat/CHN/HB01/2016。该毒株分离自腹泻山羊的粪便,在体外MDBK细胞中,通过病毒毒价、一步生长曲线、噬斑大小等结果,证明该毒株的复制能力减弱。病毒的基因组全长133,971bp,GC含量高达71%,通过gC片段的比对分析,该病毒属于BoHV‑1.1亚型,其中在gB、gK、gM、VP8蛋白中存在特异性突变,可能与毒株的致病力相关。该毒株攻毒牛后,通过临床症状评分、鼻腔排毒和肺脏组织病理变化,表明毒株致病力减弱。本发明为研究BoHV‑1的致病力和跨物种传播机制奠定重要基础,同时也为临床上的疫苗研制提供了重要材料。
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公开(公告)号:CN109750054B
公开(公告)日:2021-07-02
申请号:CN201910129071.4
申请日:2019-02-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域,具体涉及牛支原体蛋白基因MbovGdpP及其应用。Mbov_0276根据牛支原体HB0801基因组序列人工合成获得。针对大肠杆菌对密码子的偏爱性,对Mbov_0276基因进行了修饰:将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG,得到大肠杆菌重组蛋白rMbovGdpP。Mbov_0276基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。突变株T6.290出现生长缺陷表型,在PPLO培养基上呈小菌落形态,对EBL细胞黏附减少,对盐离子的敏感性升高。该突变株可望在牛支原体致病机理和制备免疫防制药物中应用。
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公开(公告)号:CN111850002A
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN202010571850.2
申请日:2020-06-22
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了牛支原体分泌蛋白MbovP570在制备牛支原体诊断试剂、药物或疫苗中的应用,属于动物传染病防治技术领域。所述牛支原体分泌蛋白MbovP570具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列,试验证明,所述牛支原体分泌蛋白MbovP570具有抗原性,可以与牛支原体阳性血清反应而不与牛支原体阴性血清反应,而且该蛋白可以诱导牛巨噬细胞高表达IL-8、IL-12,而IL-8可以激活中性粒细胞,IL-12可以激活NK细胞和T细胞。因此认为MbovP570可以激活宿主免疫系统,在研发新药和疫苗方面具有重要潜力。
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