生产亚麻酸的圆红冬孢酵母及其制备方法

    公开(公告)号:CN106010993B

    公开(公告)日:2019-07-05

    申请号:CN201610408364.2

    申请日:2016-06-12

    Abstract: 本发明公开一种生产α‑亚麻酸的圆红冬孢酵母及其制备方法。本发明通过从多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha)胞内克隆得到活性较高的Δ15脱饱和酶基因,连接至经过改造的植物双元表达载体pCAMBIA1300,转化到根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens LBA4404)胞内并通过共培养将Δ15脱饱和酶基因结合至圆红冬孢酵母的基因组上,实现多形汉逊酵母Δ15脱饱和酶在圆红冬孢酵母胞内的过表达,从而增加α‑亚麻酸在圆红冬孢酵母胞内的产量。

    一种利用里氏木霉作为宿主表达重组蛋白的方法

    公开(公告)号:CN108048479A

    公开(公告)日:2018-05-18

    申请号:CN201711444706.7

    申请日:2017-12-27

    Abstract: 本发明公开了一种利用里氏木霉作为宿主表达重组蛋白的方法。本发明所提供的利用里氏木霉作为宿主表达重组蛋白的方法,包括如下步骤:将含有待表达的目的蛋白的编码基因的表达盒克隆到里氏木霉基因组中cel3c基因的5’UTR区域。本发明实验证明在cbh1基因缺失株中,将cbh1基因的表达骨架整合入位点M29,并与野生菌株比较cbh1基因的表达水平,发现将重组基因插入该位点,可以获得优于cbh1位点的表达水平。本发明进一步丰富完善了利用里氏木霉作为宿主高效表达重组蛋白的技术方案。

    生产亚麻酸的圆红冬孢酵母及其制备方法

    公开(公告)号:CN106010993A

    公开(公告)日:2016-10-12

    申请号:CN201610408364.2

    申请日:2016-06-12

    Abstract: 本发明公开一种生产α‑亚麻酸的圆红冬孢酵母及其制备方法。本发明通过从多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha)胞内克隆得到活性较高的Δ15脱饱和酶基因,连接至经过改造的植物双元表达载体pCAMBIA1300,转化到根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens LBA4404)胞内并通过共培养将Δ15脱饱和酶基因结合至圆红冬孢酵母的基因组上,实现多形汉逊酵母Δ15脱饱和酶在圆红冬孢酵母胞内的过表达,从而增加α‑亚麻酸在圆红冬孢酵母胞内的产量。

    温度敏感型载体pBBR1MCS-2-Ts2及其应用

    公开(公告)号:CN104894154A

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201510340512.7

    申请日:2015-06-18

    Abstract: 本发明公开了温度敏感型载体pBBR1MCS-2-Ts2及其应用。本发明所提供的温度敏感型载体pBBR1MCS-2-Ts2,是将SEQ?ID?No.1的第1557-2526位所示的DNA片段替换为目的基因表达盒,并保持SEQ?ID?No.1的其他核苷酸不变,得到的重组载体;目的基因表达盒编码的蛋白质为将SEQ?ID?No.2所示的蛋白质进行A2)的改造、保持SEQ?ID?No.2的其它氨基酸残基均不变得到的蛋白质:所述A2)为将SEQ?ID?No.2第130位的His突变为Gln。

    利用秸秆水解液发酵生产二十二碳六烯酸的方法

    公开(公告)号:CN103614427B

    公开(公告)日:2015-05-27

    申请号:CN201310571413.0

    申请日:2013-11-13

    Abstract: 本发明公开了一种利用秸秆水解液发酵生产二十二碳六烯酸的方法。该方法包括如下步骤:(1)利用氨气爆破法预处理秸秆粉,得到预处理后的秸秆粉;(2)用纤维素酶、β-半乳糖苷酶和果胶酶酶解所述预处理后的秸秆粉,得到秸秆水解液;(3)向所述秸秆水解液中加入培养基,然后接入裂殖壶菌(Aurantiochytrium)进行发酵培养,获得裂殖壶菌发酵液;(4)用乙醇和正已烷的混合液提取所述裂殖壶菌发酵液,得到提取液;所述提取液经干燥即得二十二碳六烯酸。本发明制备的DHA产量稳定,在不添加外源葡萄糖情况下,采用本发明获得的菌体干重可达58~66g/L,油脂占细胞干重的40.8~53.3%,DHA占油脂干重的42.1~45.3%,DHA产量为10.3~15.4g/L。

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