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公开(公告)号：CN111254104A
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN202010070793.X
申请日：2020-01-21
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了一种基因工程化大肠杆菌及吲哚-3-乙酸的制备方法。本发明的基因工程化大肠杆菌中含有色氨酸脱羧酶基因、二胺氧化酶基因和吲哚-3-乙醛脱氢酶基因，且所述的基因工程化大肠杆菌能够产生具有活性的色氨酸脱羧酶、具有活性的二胺氧化酶和具有活性的吲哚-3-乙醛脱氢酶。本发明的基因工程化大肠杆菌能够将色氨酸转化为吲哚-3-乙酸。
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公开(公告)号：CN108070609A
公开(公告)日：2018-05-25
申请号：CN201711446635.4
申请日：2017-12-27
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了一种利用里氏木霉作为宿主表达重组蛋白的方法。本发明所提供的利用里氏木霉作为宿主表达重组蛋白的方法，包括如下步骤：将含有待表达的目的蛋白的编码基因的表达盒克隆到里氏木霉基因组中位于Protein ID为68606的基因和Protein ID为68608的基因之间的非编码区。本发明实验证明在cbh1基因缺失株中，将cbh1基因的表达骨架整合入位点ND1，并与野生菌株比较cbh1基因的表达水平，发现将重组基因插入该位点，可以获得与cbh1位点相当的表达水平。本发明进一步丰富完善了利用里氏木霉作为宿主高效表达重组蛋白的技术方案。
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公开(公告)号：CN119709816A
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202411651404.7
申请日：2024-11-19
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了一种粗糙脉孢霉过氧化氢酶基因的重组表达质粒、重组里氏木霉工程菌及其构建方法与应用，所述重组表达质粒包含粗糙脉孢霉过氧化氢酶基因cat‑3，且依次包含所需替换的cel3c基因上游的2000bp序列、pry4筛选标记、cdna1启动子与cbh1信号肽、过氧化氢酶基因cat‑3、cbh2基因终止子和所需替换的cel3c基因下游的2000bp序列。本发明的重组里氏木霉工程菌通过将重组表达质粒转化至里氏木霉中，筛选得到。本发明通过在里氏木霉cel3c位点异源表达粗糙脉孢霉过氧化氢酶基因cat‑3来提高β‑葡萄糖苷酶，弥补了里氏木霉发酵生产纤维素酶时存在的不足，本发明的重组里氏木霉工程菌对β‑葡萄糖苷酶‑1的表达量高，且其表达株具有良好的稳定性和蛋白分泌能力。
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公开(公告)号：CN118581069A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410648467.0
申请日：2024-08-06
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了一种改造的纤维二糖水解酶CBHI，编码所述改造的纤维二糖水解酶CBHI的基因，包含所述基因的重组细胞，包含所述基因的表达盒，包含所述基因的重组载体，包含所述重组载体的重组里氏木霉菌及其制备方法，以及改造的纤维二糖水解酶CBHI在提高里氏木霉合成和分泌纤维素酶及蛋白中的应用。本发明的纤维二糖水解酶CBHI的酶活和比活高，具有更强的活性和更高的水解纤维素的能力，本发明还将嗜热毛壳菌CBHI的催化结构域、连接肽替换为原始里氏木霉CBHI的催化结构域、连接肽，得到了胞外蛋白和纤维素酶分泌量明显增加的里氏木霉重组菌株，为构建纤维素酶分泌量增加的里氏木霉宿主菌和工程菌提供了技术基础，且本发明的操作简单，成本较低。
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公开(公告)号：CN118345109A
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202410632374.9
申请日：2024-05-21
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了一种扩展青霉碱性脂肪酶基因的重组表达载体、重组工程菌株及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域；本发明将来源于扩展青霉的碱性脂肪酶基因pel通过同源重组方式整合到里氏木霉中纤维二糖水解酶基因cbh1位点上，构建得到异源碱性脂肪酶重组表达载体pPcdna1‑pelc；同时本发明结合电转化里氏木霉菌株以及同核体筛选，获得能够异源表达脂肪酶的里氏木霉转化子，即含有扩展青霉碱性脂肪酶基因的重组工程菌株；所述重组工程菌株通过诱导可以实现碱性脂肪酶在里氏木霉中的高效分泌表达，与扩展青霉生产的碱性脂肪酶相比，重组碱性脂肪酶不仅具有理想的酶活性，而且稳定性与纯度均有提升，可广泛应用于工业生产中，进一步扩展碱性脂肪酶的应用场景。
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公开(公告)号：CN115975819B
公开(公告)日：2024-06-11
申请号：CN202211455319.4
申请日：2022-11-21
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明提供了一株糠醛耐受的里氏木霉突变菌株及其应用，该菌保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(简称CGMCC)，保藏编号为：CGMCC No.40402，保藏日期为2022年10月31号。为解除糠醛对微生物生长、发酵的抑制作用，本发明以完全可育的里氏木霉CBS系列菌株为出发菌株，通过两轮ARTP诱变筛选获得了耐受8mM糠醛的突变株DF20。
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公开(公告)号：CN111254105B
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN202010073498.X
申请日：2020-01-22
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了一种基因工程大肠杆菌及制备方法和吲哚‑3‑乙酸的生产方法。本发明的基因工程大肠杆菌包含色氨酸‑2‑单加氧酶iaaM基因和酰胺酶ami1基因，且所述色氨酸‑2‑单加氧酶iaaM基因和酰胺酶ami1基因能够在所述大肠杆菌的胞内表达，形成具有活性的色氨酸‑2‑单加氧酶iaaM和具有活性的酰胺酶ami1。本发明可以获得生产吲哚‑3‑乙酸的基因工程大肠杆菌。
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公开(公告)号：CN112481235B
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN202011342021.3
申请日：2020-11-25
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了Trdrs2蛋白及其相关生物材料在调控里氏木霉合成和分泌蛋白能力中的应用。本发明将里氏木霉出发菌株中的Trdrs2基因敲除后得到了胞外蛋白分泌量明显增加的Trdrs2基因敲除株。说明Trdrs2是与里氏木霉(Trichoderma reesei)胞外蛋白分泌量相关的一个调控基因，敲除Trdrs2基因可提高里氏木霉合成和分泌蛋白的能力。本发明为构建胞外蛋白分泌量增加的里氏木霉宿主菌和工程菌提供了技术基础。
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公开(公告)号：CN111254105A
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN202010073498.X
申请日：2020-01-22
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了一种基因工程大肠杆菌及制备方法和吲哚-3-乙酸的生产方法。本发明的基因工程大肠杆菌包含色氨酸-2-单加氧酶iaaM基因和酰胺酶ami1基因，且所述色氨酸-2-单加氧酶iaaM基因和酰胺酶ami1基因能够在所述大肠杆菌的胞内表达，形成具有活性的色氨酸-2-单加氧酶iaaM和具有活性的酰胺酶ami1。本发明可以获得生产吲哚-3-乙酸的基因工程大肠杆菌。
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公开(公告)号：CN118345108A
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202410604961.7
申请日：2024-05-15
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了，pla‑7基因在调控粗糙脉孢霉菌丝形态的应用，属于基因工程技术领域，pla‑7基因的缺失在粗糙脉孢霉菌中提供促进胞外蛋白产量提高和调控菌丝生长形态的功能，pla‑7基因核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示，pla‑7基因编码的蛋白如SEQ ID NO：5所示，本发明通过敲除pla‑7基因构建一株重组粗糙脉孢霉菌株解决了粗糙脉孢霉的菌丝太长，纤维素酶表达的诱导底物为不溶性纤维素，导致其难以投入到工业生产应用的问题。
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