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公开(公告)号：CN101302546A
公开(公告)日：2008-11-12
申请号：CN200810123545.6
申请日：2008-06-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 连续发酵或半连续发酵生产丁二酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明提供琥珀酸放线杆菌(Actinobacillus succinogenes)在以甘蔗糖蜜、玉米淀粉糖浆、菊芋水解糖浆、甜高粱秸秆糖浆及纤维质木质原料水解糖浆等碳水化合物原料连续或半连续制备丁二酸方法中的应用。本发明的方法利用多级连续发酵或两级半连续发酵可以提高菌体浓度和细胞活力，可获得高的丁二酸产量和高的丁二酸生产强度；容易实现自动化、连续化操作；较分批发酵可节约反复洗罐、灭菌等非发酵时间，因而生产效率可以大大提高；利用半连续发酵生产丁二酸较连续发酵更容易控制发酵参数，糖利用率、目标产物产率和目标产物产量高，设备及操作简单易行，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN117305194B
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202310234577.8
申请日：2023-03-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种拟无枝酸菌突变株及其应用，属于基因工程技术领域。本发明利用CRISPR/Cas12a基因编辑系统成功对拟无枝酸菌CCTCC NO:M2011265中的香兰素脱氢酶基因(vdh)和4‑羟基‑3‑甲氧基苯甲酰基‑β‑羟基丙酰辅酶脱氢酶基因(phdB)进行无痕敲除，获得拟无枝酸菌ΔvdhΔphdB菌株在3L发酵罐中，发酵60小时产香兰素的达到20.4g/L，对底物阿魏酸摩尔转化率达90.5％表现出良好的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN117965514A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410147861.6
申请日：2024-02-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种芳香族氨基酸解氨酶突变体及其制备反式肉桂酸和对香豆酸的方法，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明以来源于Zea mays的苯丙氨酸解氨酶(ZmPAL2)为出发序列，对第258位、第459位、第484位中至少一个的氨基酸进行取代，所获得的突变体与野生型相比，催化L‑苯丙氨酸的酶活力和转化率显著提升；对第135位以及与以第135位突变为基础组合第258位、第459位、第484位中的至少一个氨基酸突变，所获得的突变体与野生型相比，催化L‑酪氨酸的酶活力和转化率显著提升。以上获得的催化L‑苯丙氨酸和L‑酪氨酸的高活力突变体可应用于反式肉桂酸和对香豆酸的高效生产。
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公开(公告)号：CN117737031A
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202311795604.5
申请日：2023-12-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种一步纯化固定化D‑泛解酸内酯水解酶的方法及其应用，本发明在构建热纤维梭菌来源的碳水化合物结合模块24与D‑泛解酸内酯水解酶融合蛋白，并在毕赤酵母表达系统中高密度发酵获得含有大量融合酶D‑泛解酸内酯水解酶‑碳水化合物结合模块的粗酶液，将粗酶液与微晶纤维素混合反应，利用微晶纤维素吸附融合蛋白，即可快速实现一步纯化固定化D‑泛解酸内酯水解酶的制备，不需要进行细胞破碎以及进一步的纯化步骤，且所得D‑泛解酸内酯水解酶在贮存30天后仍保持90％以上酶活性，在循环使用10次时仍保持60％以上酶活性，具有良好的稳定性和可重复利用性。
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公开(公告)号：CN117305194A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202310234577.8
申请日：2023-03-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种拟无枝酸菌突变株及其应用，属于基因工程技术领域。本发明利用CRISPR/Cas12a基因编辑系统成功对拟无枝酸菌CCTCC NO:M2011265中的香兰素脱氢酶基因(vdh)和4‑羟基‑3‑甲氧基苯甲酰基‑β‑羟基丙酰辅酶脱氢酶基因(phdB)进行无痕敲除，获得拟无枝酸菌ΔvdhΔphdB菌株在3L发酵罐中，发酵60小时产香兰素的达到20.4g/L，对底物阿魏酸摩尔转化率达90.5％表现出良好的工业应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112852842B
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202110086152.8
申请日：2021-01-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种交替糖蔗糖酶表达及其制备交替糖的方法，属于酶工程技术领域。构建的毕赤酵母工程菌(Pichia pastoris X33/pPICZa‑ASR)，经3L发酵罐高密度发酵，所产交替糖蔗糖酶酶活达到34.5U/mL以上，实现了交替糖蔗糖酶的高效表达。以蔗糖为供体，以其他小分子糖为受体，利用重组工程菌生产的交替糖蔗糖酶催化合成交替糖。本方法实现了交替糖蔗糖酶的高效表达，展现良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN115725485A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202210984262.0
申请日：2022-08-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生物催化合成对羟基亚苄基丙酮的方法，属于生物工程技术领域。本发明首先构建了一种过表达脱氧核糖醛缩酶的重组大肠杆菌，并利用该重组菌株的全细胞和固定化细胞，以丙酮为反应介质催化对羟基苯甲醛生成对羟基亚苄基丙酮。采用本发明提供的重组大肠杆菌全细胞催化制备对羟基亚苄基丙酮时，产量达到19g/L，对羟基苯甲醛的摩尔转化率达到99.8％。本发明提供的这种生物法制备对羟基亚苄基丙酮的方法，具有反应条件温和、工艺简单、易于控制等优点，同时有利于环境保护，易于推广应用。
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公开(公告)号：CN112760299B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202110175757.4
申请日：2021-02-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了热稳定性提高的葡萄糖氧化酶突变体及其编码基因和应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明以来源于黑曲霉(Aspergillus niger)的葡萄糖氧化酶GOD作为母本，经多位点定点突变后得到热稳定性提高的葡萄糖氧化酶GODm。与野生型GOD在75℃下处理5min后失活相比，本发明中的突变体仍然有52.37％的酶活残余，比酶活达到534.93U/mg月是野生型GOD的2倍。本发明的突变体酶GODm热稳定性具有明显优势，有利于运输与保存，大大拓宽该酶在高温下的应用潜力。
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公开(公告)号：CN111206025B
公开(公告)日：2022-02-15
申请号：CN202010127139.8
申请日：2020-02-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种比活提高的溶菌酶突变体，属于生物工程技术领域。本发明公开了一种利用基因工程在人源溶菌酶C末端添加疏水短肽Val‑Ile‑Pro‑Leu‑Phe而得到的人源溶菌酶突变体，其比活提高了126％。本发明还公开了一种含突变人源溶菌酶基因的重组质粒，以及经过该重组质粒转化毕赤酵母后获得的高效表达人源溶菌酶突变体的重组毕赤酵母基因工程菌。本发明获得的人源溶菌酶突变体具有比活高，制备简单的特点，具有潜在的临床应用价值，在饲料、食品工业上也具有广泛的用途。
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公开(公告)号：CN108753852B
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN201810652442.2
申请日：2018-06-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生物法制备覆盆子酮的方法，包括在大肠杆菌中同时诱导表达植物来源的4‑香豆酰辅酶A连接酶、苄基丙酮合酶和苄基丙酮还原酶。本发明在生物合成覆盆子酮的代谢途径上新添加了苄基丙酮还原酶(RiRZS1)，增加了中间产物对羟基亚苄基丙酮的转化效率。此外，摇瓶发酵覆盆子酮的产量达到了70.62mg/L，进一步用生物合成法显著提高了覆盆子酮的产量。
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