实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒、检测方法及应用

    公开(公告)号:CN112430652A

    公开(公告)日:2021-03-02

    申请号:CN202011354422.0

    申请日:2020-11-27

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒、检测方法及应用。本发明实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒,包含:上游引物、下游引物以及Taq Man探针。本发明提供利用上述的试剂盒检测家禽干扰素刺激因子的方法,包括:将标准品模板和待测样品DNA模板分别置于各自的反应体系中,并同时置入PCR仪进行扩增,扩增完毕后由PCR仪自动得出检测结果;检测结束后,根据噪音情况设定和调整基线及阈值并利用随机软件进行分析,建立标准曲线,根据荧光曲线和Ct值判断结果。本发明检测方法及试剂盒具有高灵敏度及相对的高特异性,而且可以精确定量检测标本中家禽干扰素刺激因子的mRNA表达量。

    非洲猪瘟病毒P11.5蛋白特异性多克隆抗体的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN109836478A

    公开(公告)日:2019-06-04

    申请号:CN201910208025.3

    申请日:2019-03-19

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了非洲猪瘟病毒P11.5蛋白特异性多克隆抗体的制备方法及应用,该方法利用P11.5多肽表位免疫实验动物如小鼠、兔等制备特异性多克隆抗体。该方法抗原纯度高,制备的抗体特异性强,亲和力高,使用的抗原量少,操作简便。所述的多克隆抗体的制备方法包括ASFV P11.5的特异性抗原表位的选择,多肽抗原的合成,动物免疫,抗体的测定等步骤。与常规方法比较,具有简便快速,抗原纯度高,制备的抗体特异性强,抗原使用量少的优点。该多克隆抗体可以用于非洲猪瘟病毒P11.5蛋白检测,为我国非洲猪瘟的防控提供重要的技术方法。

    一种检测小鹅瘟抗原的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN104833801A

    公开(公告)日:2015-08-12

    申请号:CN201510113989.1

    申请日:2015-03-16

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: G01N33/56983

    Abstract: 一种检测小鹅瘟抗原的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用,本发明属于生物技术检测领域,本发明包括包被抗小鹅瘟病毒(GPV)单克隆抗体的酶标板、GPV标准阳性抗原和针对GPV不同表位的酶标记抗GPV单克隆抗体。本发明的技术原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。本发明可用于检测大分子抗原或特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、易于标准化等优点。

    一种竞争ELISA试剂盒检测牛布氏杆菌病的方法

    公开(公告)号:CN103995123A

    公开(公告)日:2014-08-20

    申请号:CN201410266781.9

    申请日:2014-06-16

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: G01N33/56911 G01N33/54373 G01N2333/23

    Abstract: 一种竞争ELISA试剂盒检测牛布氏杆菌病的方法,属于生物技术检测领域,将超声裂解处理的牛种布鲁氏菌A99包被ELISA酶标板;再将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10和稀释的待检血清样品加入酶标板的板孔中;并同时分别将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10分别和已知的阴、阳性血清加入酶标板的板孔中,水浴后用PBST洗涤,再向各板孔中分别加入抗小鼠IgG酶标抗体,孵育洗涤后,进行显色反应,测得各板孔的OD450值,计算各板孔的抑制率。本发明利用建立的cELISA方法对小肠结肠炎耶尔森菌O9和大肠杆菌O157高免阳性血清进行检测,PI值均低于30%,可以有效地排除假阳性结果的发生。

    禽白血病双抗体夹心ELISA抗原检测试剂盒

    公开(公告)号:CN103163299A

    公开(公告)日:2013-06-19

    申请号:CN201310046928.9

    申请日:2013-02-05

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种禽白血病双抗体夹心ELISA抗原检测试剂盒,其中包括:包被抗ALVp27蛋白单克隆抗体的酶标板、酶标记抗ALVp27蛋白单克隆抗体等。捕获抗体和检测抗体分别针对p27蛋白不同的抗原决定簇;包被在酶标板的抗ALVp27蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ALVP27-5D3分泌获得,酶标记抗ALVp27蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ALVP27-4F12分泌获得。本发明试剂盒操作简便、快速,可以用于ALV所有亚群病毒的检测,适用于基层各级兽医部门和出入境禽白血病的快速大量筛选检测。该方法所需成本低廉,经济效益显著、应用前景广泛。

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