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公开(公告)号:CN112430652A
公开(公告)日:2021-03-02
申请号:CN202011354422.0
申请日:2020-11-27
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒、检测方法及应用。本发明实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒,包含:上游引物、下游引物以及Taq Man探针。本发明提供利用上述的试剂盒检测家禽干扰素刺激因子的方法,包括:将标准品模板和待测样品DNA模板分别置于各自的反应体系中,并同时置入PCR仪进行扩增,扩增完毕后由PCR仪自动得出检测结果;检测结束后,根据噪音情况设定和调整基线及阈值并利用随机软件进行分析,建立标准曲线,根据荧光曲线和Ct值判断结果。本发明检测方法及试剂盒具有高灵敏度及相对的高特异性,而且可以精确定量检测标本中家禽干扰素刺激因子的mRNA表达量。
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公开(公告)号:CN112048006A
公开(公告)日:2020-12-08
申请号:CN202010937821.3
申请日:2020-09-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种IBV特异性中和表位抗原多肽,所述多肽为环状多肽,所述多肽的氨基酸序列为CSCPYVSYGRFCIQPDGSIKQC。本发明还公开了一种IBV特异性抗体及其制备方法。本发明还公开了一种替代中和效力测定的ELISA方法。本发明还公开了一种ELISA检测试剂盒,本发明应用建立的pELISA方法检测IBV抗体,并发现其与抗IBV中和抗体呈正相关,本发明可以用于IBV疫苗免疫效果的评价,IBV感染鸡的抗体水平测定,从而有益于鸡群健康管理等。
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公开(公告)号:CN111217916A
公开(公告)日:2020-06-02
申请号:CN202010039900.2
申请日:2020-01-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/866 , C12N7/01 , A61K39/295 , A61K39/215 , A61K39/225 , A61K39/15 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及猪三种致腹泻病毒中和抗原表位融合蛋白重构体及其制备方法和应用。所述猪三种致腹泻病毒PEDV、TGEV、PoRV的中和抗原表位融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。编码该中和抗原表位融合蛋白的基因序列如SEQ ID NO.1所示。本发明分别选取PEDV、TGEV、PoRV的主要中和抗原表位基因并进行拼接,而后通过重组杆状病毒真核表达系统对串联基因进行融合蛋白表达。将表达串联基因融合蛋白的重组病毒通过腹腔注射的方式免疫小鼠,可诱导机体产生免疫应答,具有较强的免疫原性。本发明为预防PEDV、TGEV、PoRV感染提供了一种新的方法,也为猪腹泻病毒新型疫苗的开发奠定了基础。
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公开(公告)号:CN110483637A
公开(公告)日:2019-11-22
申请号:CN201910659588.4
申请日:2019-07-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C07K16/40 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/16 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体、编码基因及其应用,属于生物医学技术领域。抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体特异性地识别禽流感病毒神经氨酸酶蛋白N2,具有抑制神经氨酸酶活性和中和病毒能力。本发明还克隆了抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体的轻、重链可变区基因序列和氨基酸序列,确认了基因序列和氨基酸序列的唯一性。本发明涉及的单克隆抗体、可变区基因及氨基酸序列可用于N2的禽流感病毒的诊断和治疗药物研发等,具有广泛的临床应用价值。
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公开(公告)号:CN109856399A
公开(公告)日:2019-06-07
申请号:CN201910220035.9
申请日:2019-03-22
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/574 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/558
Abstract: 本发明涉及一种J亚群禽白血病病毒抗体快速检测试纸条、制备方法及其应用,利用ALV-J囊膜蛋白gp85特异性表位作为抗原来检测血清中ALV-J特异性抗体。将特异性多肽表位作为抗原喷绘于NC膜,制作试纸条的检测线,选择小鼠抗鸡IgG单抗作为金标抗体,将制备的胶体金-抗体偶联复合物,喷涂于试纸条的金标垫上。该试纸条可以检测出人工感染ALV-J病毒鸡血清中的抗体。该试纸条可用于评价鸡群是否存在ALV-J感染。试纸条制备简便,成本低廉,应用广泛,经济效益高。
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公开(公告)号:CN109836478A
公开(公告)日:2019-06-04
申请号:CN201910208025.3
申请日:2019-03-19
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01 , C07K16/08 , C07K16/06 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了非洲猪瘟病毒P11.5蛋白特异性多克隆抗体的制备方法及应用,该方法利用P11.5多肽表位免疫实验动物如小鼠、兔等制备特异性多克隆抗体。该方法抗原纯度高,制备的抗体特异性强,亲和力高,使用的抗原量少,操作简便。所述的多克隆抗体的制备方法包括ASFV P11.5的特异性抗原表位的选择,多肽抗原的合成,动物免疫,抗体的测定等步骤。与常规方法比较,具有简便快速,抗原纯度高,制备的抗体特异性强,抗原使用量少的优点。该多克隆抗体可以用于非洲猪瘟病毒P11.5蛋白检测,为我国非洲猪瘟的防控提供重要的技术方法。
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公开(公告)号:CN104833801A
公开(公告)日:2015-08-12
申请号:CN201510113989.1
申请日:2015-03-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56983
Abstract: 一种检测小鹅瘟抗原的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用,本发明属于生物技术检测领域,本发明包括包被抗小鹅瘟病毒(GPV)单克隆抗体的酶标板、GPV标准阳性抗原和针对GPV不同表位的酶标记抗GPV单克隆抗体。本发明的技术原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。本发明可用于检测大分子抗原或特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、易于标准化等优点。
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公开(公告)号:CN103995123A
公开(公告)日:2014-08-20
申请号:CN201410266781.9
申请日:2014-06-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N33/54373 , G01N2333/23
Abstract: 一种竞争ELISA试剂盒检测牛布氏杆菌病的方法,属于生物技术检测领域,将超声裂解处理的牛种布鲁氏菌A99包被ELISA酶标板;再将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10和稀释的待检血清样品加入酶标板的板孔中;并同时分别将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10分别和已知的阴、阳性血清加入酶标板的板孔中,水浴后用PBST洗涤,再向各板孔中分别加入抗小鼠IgG酶标抗体,孵育洗涤后,进行显色反应,测得各板孔的OD450值,计算各板孔的抑制率。本发明利用建立的cELISA方法对小肠结肠炎耶尔森菌O9和大肠杆菌O157高免阳性血清进行检测,PI值均低于30%,可以有效地排除假阳性结果的发生。
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公开(公告)号:CN102924577B
公开(公告)日:2014-03-26
申请号:CN201210494560.8
申请日:2012-11-28
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了鸡高迁移率族蛋白B1(chHMGB1)抗原多肽和抗chHMGB1的单克隆抗体。该chHMGB1抗原多肽序列为VDAGKKVVAKAEKSKK。以该抗原多肽为免疫原免疫Balb/c小鼠,筛选得到一株杂交瘤细胞株2G1,保藏编号为CGMCCNo.6708。该细胞株能够持续稳定地分泌抗chHMGB1的单克隆抗体。该单克隆抗体不仅能够与融合蛋白表达的chHMGB1反应,而且能够与禽类巨噬细胞系HD11和CEF、DF1细胞中天然的chHMGB1特异性反应;该抗体还可以用于细胞刺激后培养上清中chHMGB1的分析,因此可用于对chHMGB1分子生物学功能的深入研究。
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公开(公告)号:CN103163299A
公开(公告)日:2013-06-19
申请号:CN201310046928.9
申请日:2013-02-05
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明提供了一种禽白血病双抗体夹心ELISA抗原检测试剂盒,其中包括:包被抗ALVp27蛋白单克隆抗体的酶标板、酶标记抗ALVp27蛋白单克隆抗体等。捕获抗体和检测抗体分别针对p27蛋白不同的抗原决定簇;包被在酶标板的抗ALVp27蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ALVP27-5D3分泌获得,酶标记抗ALVp27蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ALVP27-4F12分泌获得。本发明试剂盒操作简便、快速,可以用于ALV所有亚群病毒的检测,适用于基层各级兽医部门和出入境禽白血病的快速大量筛选检测。该方法所需成本低廉,经济效益显著、应用前景广泛。
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