一种抗单增李斯特菌MurA蛋白的纳米抗体及其应用

    公开(公告)号:CN119978119A

    公开(公告)日:2025-05-13

    申请号:CN202510466004.7

    申请日:2025-04-15

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种抗单增李斯特菌MurA蛋白的纳米抗体及其应用,涉及生物技术领域。该纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明用原核表达的单增李斯特菌的MurA蛋白作为免疫原免疫羊驼,提取外周血淋巴细胞总RNA,经反转录和两轮巢式PCR扩增VHH片段,将VHH片段与pComb3Xss载体经过酶切消化,连接后转化至TG1感受态细胞,利用噬菌体展示技术经过三轮淘选,成功筛选出一条抗单增李斯特菌MurA蛋白的纳米抗体。该纳米抗体可以特异性识别MurA蛋白和单增李斯特菌全菌,利用其建立的基于巯基化噬菌体诱导胶体金聚集的免疫比色传感器,特异性强,灵敏度高,检测限低,并且能够大大缩短检测时间。

    一种用微生物法转化人参皂苷为稀有人参皂苷的工艺

    公开(公告)号:CN116144727A

    公开(公告)日:2023-05-23

    申请号:CN202211536832.6

    申请日:2022-12-02

    Abstract: 本发明公开了一种用微生物法转化人参皂苷为稀有人参皂苷的工艺,涉及人参皂苷技术领域,包括下列步骤:步骤S1、取人参须根粉,分10次放入索氏提取器的提取筒中,在提取筒中加入乙醇溶液和有机酸混合溶液,将提取瓶放置在一定温度下的油浴中,回流抽提得到人参皂苷提取粗品粉末;步骤S2、微生物法转化:在LB液体培养基中加入步骤S1中得到的人参总皂苷粗品,再按照0.5‑2.0%的比例加入纤维微细菌72‑3菌液,利用新分离出的纤维微细菌72‑3发酵转化人参总皂苷为稀有人参皂苷,先通过37度48小时的培养转化;步骤S3、再经过大孔树脂柱和硅胶层析柱的富集、吸附、洗脱、过滤,真空干燥浓缩结晶,最终得到含有稀有人参皂苷水解产物Rh1和F1的混合物。

    一种基于PMA-qPCR技术的布鲁氏菌活菌计数方法

    公开(公告)号:CN110343744A

    公开(公告)日:2019-10-18

    申请号:CN201910801583.0

    申请日:2019-08-28

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种基于PMA-qPCR技术的布鲁氏菌活菌计数方法,属于微生物计数技术领域。本发明优化PMA处理布鲁氏菌S2的处理浓度与曝光时间,再结合qPCR方法检测布鲁氏菌BCSP31基因,建立PMA-qPCR定量检测布鲁氏菌活菌的方法。采用PMA-qPCR检测布鲁氏菌的灵敏度是普通PCR的100倍,可对布鲁氏菌活菌数进行准确定量,且PMA处理不对qPCR反应造成干扰。用PMA-qPCR法计数布鲁氏菌活菌数具有快速、简便、特异性较好等特点。与平板技术方法相比,既可以快速完成布鲁氏菌活菌数测定,又可以同时完成布鲁氏菌的定量定性检测。

    一种结肠靶向重组毒素及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN106084065B

    公开(公告)日:2019-08-30

    申请号:CN201610394140.0

    申请日:2016-06-06

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及一种结肠靶向重组毒素及制备方法和应用,属于利用基因工程制备结肠靶向重组毒素。一种结肠靶向重组毒素,其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示,以pET28a为表达载体,BL21(DE3)为表达宿主,构建了BL21(DE3)(pET28a‑rCCK96‑104PE38KDEL)重组工程菌株,带6聚组氨酸标签,便于纯化。利用Ni‑NTA金属螯合亲和层析柱,结合rTEV酶的特异性切割的方法,仅通过两步纯化,就获得了高活性、高纯度、无冗余序列的rCCK96‑104PE38KDEL重组蛋白,纯度在95%以上;在体外细胞实验中,纯化后的rCCK96‑104PE38KDEL重组免疫毒素能够特异性杀死高表达CCK2R的结肠癌细胞,抑制了癌细胞的增殖和扩散,对正常细胞和其它非CCK2R高表达肿瘤细胞没有杀伤作用,因此,rCCK96‑104PE38KDEL符合作为肿瘤靶向药物的条件,为治疗结肠癌提供了新的方向。

    一种腹泻性贝毒大田软海绵酸荧光检测试纸及其检测方法

    公开(公告)号:CN110018145A

    公开(公告)日:2019-07-16

    申请号:CN201910330343.7

    申请日:2019-04-23

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明属于食品安全免疫学检测技术领域,具体涉及一种腹泻性贝毒大田软海绵酸荧光检测试纸及其检测方法。所述试纸包括底板,所述底板上从左到右依次固接有加样垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述硝酸纤维素膜上从左到右依次设置有检测带和参照带;所述检测带由大田软海绵酸-蛋白质偶联复合物喷射在所述硝酸纤维素膜上干燥后形成;所述参照带由抗小鼠二抗喷射在所述硝酸纤维素膜上,干燥后形成。本发明提供的试纸及检测方法能快速、灵敏地检测出海产样品中的大田软海绵酸的含量水平,适用于大量样本毒素的安全筛查,从而为海产品食用安全提供快速检测试剂。

    一种卵白蛋白双抗夹心ELISA检测方法

    公开(公告)号:CN102539788B

    公开(公告)日:2013-12-11

    申请号:CN201210010496.1

    申请日:2012-01-13

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及一种卵白蛋白双抗夹心ELISA检测方法,属于生物检验检疫领域。抗卵白蛋白的单克隆抗体的制备,抗卵白蛋白的多克隆抗体的制备,包被抗体用特异性高的单克隆抗体,检测抗体用HRP标记的多克隆抗体,检测程序简单方便,检测时间短,且灵敏度高,最低检测限可达到0.31ng/mL,用于制备快速、有效、低成本的过敏原检测试剂盒,操作简单方便,一次操作时间不超过2h,且可同时检测多个样品,节省时间,检测灵敏度高。

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