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公开(公告)号：CN108619494B
公开(公告)日：2020-05-05
申请号：CN201810454228.6
申请日：2018-05-13
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种促黑激素重组毒素在制备治疗结肠癌药物中的应用，属于医药领域。促黑激素重组毒素的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所述，促黑激素重组毒素能够以黑素皮质激素受体‑1为靶标，特异性捕获和杀死高表达该受体的结肠癌细胞，所述结肠癌细胞包括HT29结肠癌细胞系、HCT‑116结肠癌细胞系。经细胞水平和动物水平的毒性和药效测试，证明促黑激素重组毒素对人结直肠癌细胞系HT‑29、HCT‑116等MC1R高表达的肿瘤细胞有特异性致凋亡作用，这两种肿瘤存在MC1R高表达，具有新的肿瘤靶向作用，是一种很有潜力的结直肠癌治疗或辅助治疗药物，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN108619494A
公开(公告)日：2018-10-09
申请号：CN201810454228.6
申请日：2018-05-13
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种促黑激素重组毒素在制备治疗结肠癌药物中的应用，属于医药领域。促黑激素重组毒素的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所述，促黑激素重组毒素能够以黑素皮质激素受体-1为靶标，特异性捕获和杀死高表达该受体的结肠癌细胞，所述结肠癌细胞包括HT29结肠癌细胞系、HCT-116结肠癌细胞系。经细胞水平和动物水平的毒性和药效测试，证明促黑激素重组毒素对人结直肠癌细胞系HT-29、HCT-116等MC1R高表达的肿瘤细胞有特异性致凋亡作用，这两种肿瘤存在MC1R高表达，具有新的肿瘤靶向作用，是一种很有潜力的结直肠癌治疗或辅助治疗药物，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN106084065A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610394140.0
申请日：2016-06-06
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种结肠靶向重组毒素及制备方法和应用，属于利用基因工程制备结肠靶向重组毒素。一种结肠靶向重组毒素，其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示，以pET28a为表达载体，BL21(DE3)为表达宿主，构建了BL21(DE3)(pET28a‑rCCK96‑104PE38KDEL)重组工程菌株，带6聚组氨酸标签，便于纯化。利用Ni‑NTA金属螯合亲和层析柱，结合rTEV酶的特异性切割的方法，仅通过两步纯化，就获得了高活性、高纯度、无冗余序列的rCCK96‑104PE38KDEL重组蛋白，纯度在95％以上；在体外细胞实验中，纯化后的rCCK96‑104PE38KDEL重组免疫毒素能够特异性杀死高表达CCK2R的结肠癌细胞，抑制了癌细胞的增殖和扩散，对正常细胞和其它非CCK2R高表达肿瘤细胞没有杀伤作用，因此，rCCK96‑104PE38KDEL符合作为肿瘤靶向药物的条件，为治疗结肠癌提供了新的方向。
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公开(公告)号：CN106084065B
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201610394140.0
申请日：2016-06-06
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种结肠靶向重组毒素及制备方法和应用，属于利用基因工程制备结肠靶向重组毒素。一种结肠靶向重组毒素，其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示，以pET28a为表达载体，BL21(DE3)为表达宿主，构建了BL21(DE3)(pET28a‑rCCK96‑104PE38KDEL)重组工程菌株，带6聚组氨酸标签，便于纯化。利用Ni‑NTA金属螯合亲和层析柱，结合rTEV酶的特异性切割的方法，仅通过两步纯化，就获得了高活性、高纯度、无冗余序列的rCCK96‑104PE38KDEL重组蛋白，纯度在95％以上；在体外细胞实验中，纯化后的rCCK96‑104PE38KDEL重组免疫毒素能够特异性杀死高表达CCK2R的结肠癌细胞，抑制了癌细胞的增殖和扩散，对正常细胞和其它非CCK2R高表达肿瘤细胞没有杀伤作用，因此，rCCK96‑104PE38KDEL符合作为肿瘤靶向药物的条件，为治疗结肠癌提供了新的方向。
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